32. 柴油是重要的燃料油之一,也因泄漏与不当排放等造成了严重的环境污染。科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g,加入含100mL培养基M的锥形瓶中,在30℃条件下振荡培养5天,取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基,按此步骤连续培养5次,分离获得醋酸钙不动杆菌DB(一中柴油降解菌)。利用该菌,科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件,获得实验结果如下图。请回答下列问题:
(1)为获得醋酸钙不动杆菌DB,培养基M应以
_____为唯一碳源,还要考虑无机盐的
_____和比例。
(2)在实验过程中,科研人员“30℃条件下振荡培养5天,取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基,按此步骤,连续培养5次”的主要目的是
_____。
(3)在分裂醋酸钙不动杆菌DB操作时,在严格无菌条件下,采用
_____(填接种方法)在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种,接种完,对接种环进行
_____灭菌处理。培养一段时间后,观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的
_____进行重复培养,直到分离出单一菌株。
(4)据图分析,若某地区土壤发生柴油重度污染时,则可以将
_____,并添加浓度为
_____的表面活性剂,以有利于提高对柴油的降解效果。