石油进入土壤后,会破坏土壤结构,分散土粒,使土壤的透水性降低,而且石油中的有毒物质能通过农作物进入食物链,最终危害人类。为解决石油污染问题,某科研小组从被石油污染较严重的土壤中分离出了能高效分解石油的细菌,操作过程如图1所示。(1)图1中过程③的操作主要目的是______ ;过程③中进行振荡培养可以增加培养液中的溶氧量,并使______ 。
(2)图1中过程④用涂布平板法接种后,若出现图2所示结果,其原因可能是______ 。用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目:将1mL样品稀释100倍,在4个平板上分别接种0.1mL稀释液,培养一段时间后,4个平板上的菌落数分别为80、82、78和88,据此可得出每毫升样品中的活菌数为______ 个。
(3)过程④培养一段时间后,培养基上出现了多种菌落特征,说明能够分解石油的微生物不止一种。为了判断培养基上生长的多个菌落是否为同一种类,可以观察菌落的______ (写出两点特征)等。过程⑤是将不同菌株分别接种到含有等量石油的培养基中进行培养并取样测定石油含量,这一操作的主要目的是______ 。
(4)某研究人员发现,某真菌的W基因可编码一种能高效降解石油的酶,已知图3中W基因转录方向是从左向右,启动子通常具有物种特异性,为使大肠杆菌产生该酶,在质粒中插入W基因,W基因上游启动子应选择______ 的启动子,以图中质粒为载体,进行转基因操作。不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。①W基因转录的模板链是______ 。利用PCR技术对W基因进行扩增时子链延伸的方向是______ 。
②与质粒中启动子结合的酶是______ 。
③应使用限制酶______ 切割图中质粒,使用限制酶______ 切割图中含W基因的DNA片段,以获得能正确表达W基因的重组质粒。
(2)图1中过程④用涂布平板法接种后,若出现图2所示结果,其原因可能是
(3)过程④培养一段时间后,培养基上出现了多种菌落特征,说明能够分解石油的微生物不止一种。为了判断培养基上生长的多个菌落是否为同一种类,可以观察菌落的
(4)某研究人员发现,某真菌的W基因可编码一种能高效降解石油的酶,已知图3中W基因转录方向是从左向右,启动子通常具有物种特异性,为使大肠杆菌产生该酶,在质粒中插入W基因,W基因上游启动子应选择
②与质粒中启动子结合的酶是
③应使用限制酶
更新时间:2024-05-25 11:36:39
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(0.4)
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【推荐1】红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如下图:请回答:(1)可在酸性条件下用___ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功。
(2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是___ 。
(3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是___ 。在固体增养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具__ 次。
(4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200mL水样过滤后,取滤膜放在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上,重复3次。将3个平板置于37°C恒温箱中培养24h后挑选深紫色的菌落进行计数。平板上目的菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为___ 个。若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是___ 。
(2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是
(3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是
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(0.4)
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【推荐2】酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的_____ ,及时对培养基进行分装,并进行_____ 灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约_____ (在25℃、50℃或80℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有_____ 。
a.为保证无菌操作,接种针,接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和_____ 供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上_____ 色细胞的个数应不少于_____ 。才能达到每毫升个活细胞的预期密度。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约
(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有
a.为保证无菌操作,接种针,接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和
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(0.4)
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【推荐3】科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌,并对果胶酶进行分离纯化。请回答下列问题:
(1)配制以_______ 为唯一碳源的选择培养基,筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______________ (回答两点)等特征可进行物种鉴定。
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度 离心后,_______ (填“上清液”、“沉淀物”或“上清液和沉淀物”)即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后,可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白,在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度_______ (填“较快”或“较慢”)。
(3)用凝胶电泳法测定果胶酶分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是_________________ ,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(4)生产果胶酶可从黑曲霉中提取,下列适于黑曲霉扩大培养 的培养基是( )
A.蛋白胨和酵母提取物培养基B.尿素固体培养基
C.MS培养基D.添加蔗糖的豆芽汁培养基
(5)某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤:
①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。
②配制海藻酸钠溶液过程中,加热时要_____________________ ,直至海藻酸钠完全溶化。
③溶化的海藻酸钠溶液必须________ ,才能加入已活化的酵母细胞。
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中,形成________ 。
(1)配制以
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①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。
②配制海藻酸钠溶液过程中,加热时要
③溶化的海藻酸钠溶液必须
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入氯化钙溶液中,形成
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【推荐1】为使水稻获得抗除草剂性状,科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株,获得抗草甘膦转基因水稻。
注:GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色
(1)将草甘膦抗性基因作为________ ,与Ti质粒用相同的______ 和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
(2)用___________________ 处理农杆菌后获得感受态细胞,将其与基因表达载体混合完成转化后,在添加_________________ 的培养基中,经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
(3)取某品种水稻的幼胚,先进行__________ 处理,然后接种到培养基中,水稻幼胚细胞发生_____________________ 形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。
(4)除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外,还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2,以确定目的基因是否______ 。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____________ 过程,获得转基因水稻。
(5)为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻,还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案,筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。____________
注:GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色
(1)将草甘膦抗性基因作为
(2)用
(3)取某品种水稻的幼胚,先进行
(4)除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外,还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2,以确定目的基因是否
(5)为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻,还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案,筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。
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【推荐2】水稻(2n=24)是一种热带起源的禾本科作物,开两性花,为雌雄同株。三系杂交水稻是我国研究应用最早的杂交水稻,具有高产的优良性状。 三系杂交水稻由不育系、保持系、恢复系三种水稻培育而成:雄性不育系(花粉败育,但雌蕊正常)的基因型为S(rr),其中S为细胞质基因,r为细胞核基因;保持系基因型为N(rr),与雄性不育系杂交后代仍为S(rr);恢复系基因型为N(RR),与雄性不育系杂交可以使其后代恢复为雄性可育。回答下列问题:
(1)水稻基因组计划需测定__________ 条染色体上的DNA序列。水稻根尖细胞有丝分裂后期,细胞中的染色体组数为__________ ,同源染色体对数为__________ 。
(2)不育系的产生是基因突变的结果,细胞核和细胞质都含有决定雄蕊是否可育的基因,其中细胞核的可育基因用R表示,不育基因用r表示,细胞质中的可育基因用N表示,不育基因用S表示,则水稻细胞中与育性相关的基因型有__________ 种,R能够抑制S的表达,则S(Rr)的表现型为__________ 。
(3)基因型为N(RR)的水稻与S(rr)杂交,F1的基因型是__________ ,F1自交,F2的表现型及比例为__________ 。科研人员发现这种雄性不育性状个体在特定的环境条件下又是雄性可育的,由此说明________________________________ 。
(4)由于雄性不育系不能通过自交来延续,无法用于之后的杂交育种。现有与育性有关的四个品系水稻N(RR)、S(RR)、N(rr)和S(rr),若想通过杂交制备雄性不育系应该选择的父本和母本分别是_________________________________ 。
(5)科研人员发现非温敏雄性不育系(不育性不会随日照的长短而发生变化)ee品系,科研人员将连锁的三个基因M、P和H(P是与花粉代谢有关的基因,H为红色荧光蛋白基因)与Ti质粒连接,构建____________________ ,转入雄性不育水稻植株细胞中,获得转基因植株,自交后代中红色荧光植株占一半,据此推测M、P、H基因在育种过程中的功能为______________________________ 。
(1)水稻基因组计划需测定
(2)不育系的产生是基因突变的结果,细胞核和细胞质都含有决定雄蕊是否可育的基因,其中细胞核的可育基因用R表示,不育基因用r表示,细胞质中的可育基因用N表示,不育基因用S表示,则水稻细胞中与育性相关的基因型有
(3)基因型为N(RR)的水稻与S(rr)杂交,F1的基因型是
(4)由于雄性不育系不能通过自交来延续,无法用于之后的杂交育种。现有与育性有关的四个品系水稻N(RR)、S(RR)、N(rr)和S(rr),若想通过杂交制备雄性不育系应该选择的父本和母本分别是
(5)科研人员发现非温敏雄性不育系(不育性不会随日照的长短而发生变化)ee品系,科研人员将连锁的三个基因M、P和H(P是与花粉代谢有关的基因,H为红色荧光蛋白基因)与Ti质粒连接,构建
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【推荐3】一些血液肿瘤与 B细胞的恶性增殖密切相关。恶性增殖的 B淋巴细胞膜上存在一种特殊蛋白质——CD19(其他细胞膜上基本不存在),跨膜分布于T淋巴细胞膜上的 CAR蛋白的胞外部位特异性识别CD19后,T细胞活化。据此,科学家研究出CAR-T疗法以治疗一些血液肿瘤疾病,其基本流程如图一,完成图一中过程A 的方法有多种;图二所示是利用转座子系统完成过程A,转座子系统由转座子质粒(含CAR基因)和转座酶基因质粒两部分组成,转座酶能识别转座子中 CAR基因两侧的重复序列。回答下列问题:
(1)培养T淋巴细胞的培养基在灭菌后,待其冷却至______ ℃左右时,加入使用过滤除菌法除去微生物后的______ 等一些天然成分。
(2)由图二可知,CAR 基因可在______ 的催化下合成mRNA,进而合成CAR蛋白。转座酶作用的化学键是______ ,转入转座酶基因质粒的原因是______ 。
(3)一般情况下,研制得到的CAR-T细胞与患者 T细胞的核 DNA______ (填“完全相同”或“不完全相同”),该过程中发生的这种变异属于______ 。
(4)图一中“检测”的常用方法是______ 技术,符合要求的 CAR-T细胞回输给患者后,CAR-T细胞和恶性增殖的B细胞会发生的变化有______ 。
(5)部分血液恶性肿瘤患者使用图示过程的 CAR-T疗法后,疗效不佳,其可能的原因是______ 。
(1)培养T淋巴细胞的培养基在灭菌后,待其冷却至
(2)由图二可知,CAR 基因可在
(3)一般情况下,研制得到的CAR-T细胞与患者 T细胞的核 DNA
(4)图一中“检测”的常用方法是
(5)部分血液恶性肿瘤患者使用图示过程的 CAR-T疗法后,疗效不佳,其可能的原因是
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