为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本,并提取猪的DNA。实验步骤如下:
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h;
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液使蛋白质变性,抽提蛋白质;
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴1h;
④加醋酸钠和无水乙醇,高速离心15min;
⑤用70%乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA。
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是___ 。
(2)步骤③的目的是___ ,步骤④中使用无水乙醇的目的是____ 。
(3)将提取到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后,与___ 试剂共热,冷却后可观察到溶液呈蓝色。
(4)实验中发现,实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏,与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比,提取到的DNA含量较多,最可能的原因是___ 。
(5)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路___
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h;
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液使蛋白质变性,抽提蛋白质;
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴1h;
④加醋酸钠和无水乙醇,高速离心15min;
⑤用70%乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA。
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是
(2)步骤③的目的是
(3)将提取到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后,与
(4)实验中发现,实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏,与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比,提取到的DNA含量较多,最可能的原因是
(5)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路
更新时间:2016-12-12 13:32:27
|
【知识点】 酶的研究与应用
相似题推荐
非选择题-实验题
|
较难
(0.4)
【推荐1】请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题:
(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是______________ (A.蛋白质 B.脂质 C.核酸D.多糖)。它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_____________ 在一起。
(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成______________ 和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用________ 酶处理,可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,果汁的出汁率、澄清度与酶的_____________ 高低呈正相关。
(3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提物(经酶处理后的混合物)进行___________ 处理,从而得到干制品。
(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是
(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成
(3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提物(经酶处理后的混合物)进行
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
较难
(0.4)
名校
【推荐2】下图1为杨桃干型果酒固定化发酵流程图,图2为用B酵母和复合酵母对固定化发酵的影响。请回答下列相关问题
(1)酵母菌的活化是指___________________________________ ;对增殖后的酵母细胞常采用_______________ 法进行固定化,这是因为_________________________ 。
(2)“预处理杨桃汁”过程中使用果胶酶处理可使浑浊果汁变得澄清,其原因是_____________________________________________ 。
(3)根据图2分析,发酵速度较快的是_________________ ;在发酵后期,B酵母和复合酵母发酵的速率都变慢,主要原因是___________________________________ 。
(1)酵母菌的活化是指
(2)“预处理杨桃汁”过程中使用果胶酶处理可使浑浊果汁变得澄清,其原因是
(3)根据图2分析,发酵速度较快的是
您最近一年使用:0次
非选择题-实验题
|
较难
(0.4)
名校
【推荐3】加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题:
(1)该实验应控制的无关变量有__________________ (写出两项即可)。50℃时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是_____________________ 。
(2)表一是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录,请据表回答问题:①该实验设计体现了___________________________ 原则。
②若实验组1号洗净所需时间接近7min,最可能的原因是_____________________ 。
(3)根据以上实验结果,写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施:________ 、 ______ 。
(4)表二是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果,分析上述实验结果可以得出的结论是:
①_______________________________________________________ ;
②_______________________________________________________ 。
(1)该实验应控制的无关变量有
(2)表一是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录,请据表回答问题:①该实验设计体现了
表一 | |||||
脸盆编号 | 洗涤物(等量) | 洗涤温度 | 洗衣粉(等量) | 水量 | 洗净所需时间 |
1 | 油污布 | 45℃ | 加酶 | 2L | 4min |
2 | 油污布 | 45℃ | 普通 | 2L | 7min |
3 | 油污布 | 5℃ | 加酶 | 2L | 9min |
4 | 油污布 | 5℃ | 普通 | 2L | 8min |
②若实验组1号洗净所需时间接近7min,最可能的原因是
(3)根据以上实验结果,写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施:
(4)表二是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果,分析上述实验结果可以得出的结论是:
表二 | ||||||
温度/℃ | 20 | 30 | 40 | 45 | 50 | 60 |
普通洗衣粉去污力/﹪ | 15 | 18 | 20 | 21 | 21.5 | 22 |
加酶洗衣粉去污力/﹪ | 30 | 40 | 48 | 50 | 48 | 37 |
①
②
您最近一年使用:0次