【推荐1】回答下列利用转基因动物生产药物的问题：
(1)家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把干扰素基因片段正确插入表达载体的__________和___________之间。采用__________技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。
(2)若要获得含有人干扰素基因的转基因牛，将基因表达载体导入受体细胞。导入并培养成功后，该基因在________（填“任意体细胞”或“乳腺细胞”）中表达。构建基因工程表达载体时，若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生______（填“相同”或“不同”）黏性末端的限制酶。

【推荐2】为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员利用基因工程大量制备α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：

(1)从某种海洋细菌中提取出α-淀粉酶基因所用到的工具是______________________________。
(2)从海洋细菌中提取出目的基因后，研究人员需要利用PCR技术进行快速扩增，过程是：目的基因受热变性后解链为单链，_____________与单链结合，然后在____________作用下进行延伸。PCR技术所用到的原料是______________________________________。
(3)构建重组表达载体时，目的基因应插在启动子的__________（选填“上游”或“下游”）。
(4)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用___________处理细胞，使细胞处于感受态；第二步是将重组表达载体溶于缓冲液中与感受态细胞混合。
(5)重组表达载体进入宿主细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。采用DNA分子杂交技术是为了检测________________________________；而采用DNA和RNA分子杂交技术是为了检测______________________________________________________。

【推荐3】新冠病毒主要通过表面的S蛋白与人体细胞表面的受体（ACE2）结合来侵入细胞。人体感染病毒后会产生针对S蛋白的特异性抗体，可以用抗体试剂盒进行检测。抗体试剂盒的研制需要用到单克隆抗体技术，流程如下：

(1)从免疫过的小鼠______中获取______细胞和骨髓瘤细胞融合，诱导动物细胞融合常用的具体方法是______（至少写两种）。图中旋转培养骨髓瘤细胞的原理是_______，图中在HAT培养液中筛选出的杂交瘤细胞具有______的特点。
(2)要测试多孔培养板的板孔中是否是所需的特异性抗体，需吸取______（填“上清液”或“沉淀细胞”）。图中用到的测试液体中应选用的蛋白质是______。
(3)阳性克隆的杂交瘤细胞可以在小鼠体内或体外进一步扩大培养，生产出的单克隆抗体的优点是______，（至少答2点），可以被用来制作“生物导弹”，体外培养需要放置在CO₂培养箱中，体外培养到一定时期的杂交瘤细胞会因为______而导致分裂受阻，需进行传代培养。体内培养的优点是______。
(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知新冠病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程的核心步骤是______。

【推荐1】回答下列与现代生物科技、生物技术实践有关的问题：
（1）1989年投入工业化生产的我国第一个基因重组新药是-干扰素，要获得-干扰素，先要制备白细胞，经病毒诱导，分离出______，在______酶的催化下合成DNA，再经PCR克隆-干扰素基因，将-干扰素基因与______连接，构建表达载体，转化腐生型假单胞杆菌，筛选高表达、稳定遗传的工程菌。
（2）测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数板法、平板______计数法、______法等。制作生长曲线时，以______作纵坐标，______作横坐标。

【推荐2】研究人员利用小鼠的单倍体 ES 细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小 鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Amp^r 是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r 是 G418 抗性基因。
（1）利用 PCR 技术可以扩增目的基因，PCR 反应体系中除含缓冲液、模板 DNA、dNTP（包含 dATP、dCTP、 dGTP、dTTP）、引物外，还应含有_____；引物应选用下图中的_____（填图中字母）。

（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为_____。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞， 而一定浓度的 G418 能有效杀死不具有 Neo^r 的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的 2 种限制酶是_____（填图中的编号），③处的培养液应添加_____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中桑椹胚需通过_____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行_____处理。

【推荐3】人体中α-2a基因表达的干扰素（α-2a）具有抗癌和抗病毒的能力。科学家们采用基因工程技术将α-2a基因导入大肠杆菌进行干扰素生产。图甲、乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
   
请据图分析回答：
(1)利用PCR技术将α-2a基因扩增n代，共需_____对引物参与子代DNA分子的合成，该过程中需使用_____酶。在该酶的作用下，从引物的_____端延伸子链。
(2)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，最好选用_____限制酶切割处理质粒、外源 DNA以防止质粒和外源DNA发生自身环化；构建基因表达载体时，用_____酶催化目的基因与质粒间形成_____键。
(3)干扰素（α-2a）体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在-70℃的条件下保存半年。这一目的已经通过_____工程实现了，该工程的直接操作对象是_____。

【推荐3】有种被称为“黑寡妇”的蜘蛛吐出的丝比已知的任何蛛丝的强度都高，用这种蜘蛛丝织成的布比制造防弹背心所用的纤维的强度还高得多。科学家们把“黑寡妇”蜘蛛体内产生的蜘蛛丝蛋白的基因，巧妙地移植到山羊受精卵的细胞核内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，并用相应的技术获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，科学家给这种物质取名叫“生物钢”。其过程如下，请回答下列问题：

(1)通过过程①获得的蜘蛛丝蛋白基因可以利用__________技术进行大量的扩增，扩增时需要设计相应的引物，引物设计的依据是_________________。
(2)过程②科学家通过___________方法将蜘蛛丝蛋白基因导入山羊的受精卵中，过程④还必须经过早期胚胎培养、___________等胚胎工程的技术手段，进而培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器。
(3)构建基因表达载体的目的是__________________，并且可以遗传给下一代。
(4)转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”坚韧程度极强，可替代高强度包装塑料和商业用渔网，请从环境保护的角度考虑其优点是________________。