1 . 大肠杆菌能在基本培养基上生长，X射线照射后产生的大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在完全培养基上生长。夹层培养法多用于营养缺陷型菌株的筛选，其具体操作是：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含菌液（经过X射线处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层的基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，经培养后会长出形态不一的菌落（如图所示）。下列说法错误的是（　　）

A．X射线可能诱发基因突变导致大肠杆菌营养缺陷

B．夹层培养法不适用于对需氧型微生物进行筛选

C．首次出现的菌落做标记时，应在皿盖上做标记

D．最后培养基上形态较小的菌落可能是营养缺陷型菌株

2 . 利用液态发酵法生产醋酸的操作流程如图所示。下列说法正确的是（       ）

A．操作过程中加入α-淀粉酶是为了使葡萄糖更快地被分解成乙醇

B．从乙醇发酵转为醋酸发酵时要适当降低温度并适时通入无菌空气

C．对醋酸发酵中的主要微生物进行显微镜直接计数时需使用细菌计数板

D．通过观察培养液中菌落的颜色、形状、大小等特征对微生物进行初步鉴别

4 . 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（       ）

A．微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高

B．与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多

C．c点时，可对堆肥取样并用角蛋白为唯一氮源的培养基对微生物群进行培养和筛选

D．若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线

5 . 稀释涂布平板法是微生物培养与计数中常用的方法，下列叙述错误的是（       ）

A．由于土壤中细菌的数量庞大，需将土壤稀释后再涂布在选择培养基上培养计数

B．稀释涂布平板法使用时可用无菌水进行稀释

C．采用稀释涂布平板法接种后，不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单菌落

D．在同一稀释度下至少对3个平板计数，菌落数目往往比活菌数目多

6 . 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8，并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。

(1)培养基a的作用是___________，配制好的培养基通常采用的灭菌方法是________。
(2)挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为_______。

(3)b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，根据菌落直径和透明圈大小，_________________________的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。
(4)He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选，获得纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵，摇瓶培养的目的是__________，发酵过程中可通过_________法检测活菌的数量。若取某一时刻的发酵样液，稀释10⁸倍后取0.1ml稀释液涂布平板上，菌落数目稳定时，菌落数分别是145、163、154，推测样液中菌体的数量为________个/mL^-1。若改用显微镜直接观察法检测活菌的数量，往往较实际值偏大，偏离实际值的原因是________。
(5)为获得纯培养物的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA，检测DNA所用的试剂是______________。获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有_______________________________（答出两点即可）。

9 . 橙汁生产过程中感染脂环酸芽孢杆菌，品质会受到影响。为优化橙汁生产的质量监控工艺，技术人员设计了如下流程，开展脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定。下列相关说法正确的是（　　）

A．步骤①应取自果园的深层土壤来制备土壤稀释液，因为土壤深层富含有机质

B．步骤②制备土壤稀释液振荡20min的目的是让培养液与微生物充分接触

C．步骤③最终将土壤悬浮液稀释了1000倍

D．步骤④所示菌落数作为平均数可知果园土壤的目的菌数约为6×103个/mL

10 . 现代发酵工业大多采用好氧、液体、深层、分批及单一纯种发酵的方式进行，选育高产、优质的菌种是发酵工业的前提条件，为筛选适合于液体深层发酵培养的高产果胶酶菌株，某实验小组进行了如下实验：
(1)实验过程：
①菌种初筛：称量磷酸氢二钾、硫酸镁、硝酸钠、刚果红（可与多糖物质形成红色复合物）、______（填字母：A．牛肉膏B．蛋白豚C．果胶D．淀粉E．琼脂），加蒸馏水定容，制备初筛平板；接种；培养一段时间后，在经刚果红染色的平板上筛选______的菌落。
②菌种复筛与酶活力测定：将经过3轮初筛选出的具有较高果胶酶活性的菌株发酵培养；取等量上述不同菌株的发酵上清液，按一定倍数稀释后，分别加入果胶溶液，水浴保温反应，测定其中的还原糖含量，计算酶活力；设置______作为空白对照组。
注：酶活力（简称为酶活）：上述实验条件下，每分钟水解果胶产生还原糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）
③______：将筛选出的菌株接种于______培养基，观察菌落特征，依据《真菌鉴定手册》对菌株进行菌落特征、菌丝体形态特征初步鉴定；提取其进行克隆，测序，并与序列数据库进行比对。
(2)为优化菌株发酵的碳源和氮源，该小组又开展了相关的单因子实验，结果如下图：

      

实验结果表明该菌株最适碳源为______，最适氮源为______。其中橘皮粉因含有较多______物质，可以促进果胶酶的产生。
(3)该小组还可以从______（写两点）等方面考虑，进一步优化产酶条件。
(4)除了筛选自然高产菌株外，获得高产果胶酶菌株的方法还有______（写一种）。