面对2019新型冠状病毒在全球的肆虐,包括我国在内的各国都在想方设法积极应对。下图为科研人员研发冠状病毒疫苗的几种技术思路。
(1)途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是____________ 与5%二氧化碳的混合气体,二氧化碳的主要作用是____________ 。途径Ⅰ与途径Ⅱ相比,生产的疫苗安全性更高的是途径____________ 。
(2)途径Ⅲ中,过程①的操作需要____________ 酶。途径Ⅲ中所示技术的核心是________ (用图中数字作答)。
(3)途径Ⅳ生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为mRNA不需要进入____________ ,无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险,且易被____________ 水解,不会遗传给子细胞。
(4)该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成,为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的____________ 序列,通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/9/1/2540381142007808/2541203795853312/STEM/59811e3860e04372bfb532dc029c3a99.png?resizew=425)
(1)途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是
(2)途径Ⅲ中,过程①的操作需要
(3)途径Ⅳ生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为mRNA不需要进入
(4)该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成,为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的
更新时间:2020-09-02 09:55:16
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【推荐1】图甲是抗寨卡病毒(一种RNA病毒)单克隆抗体制备的过程图,图乙是克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/29/2968843828289536/2974415078957056/STEM/2557b492-09e9-46c3-894e-3fe47af30b38.png?resizew=573)
(1)图甲和图乙所示的过程中,应该都会用到的动物细胞工程技术是____________ 。
(2)图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术,其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________ 诱导细胞融合。
(3)通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是____________ 。
(4)核移植时受体应选用____________ 期的卵母细胞。
(5)在制备单克隆抗体的过程中,进行了两次筛选,第一次筛选是利用HAT____________ (填“选择”或“鉴别”)培养基,由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存,故只有____________ 细胞能长期存活;第二次筛选获得____________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/29/2968843828289536/2974415078957056/STEM/2557b492-09e9-46c3-894e-3fe47af30b38.png?resizew=573)
(1)图甲和图乙所示的过程中,应该都会用到的动物细胞工程技术是
(2)图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术,其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用
(3)通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是
(4)核移植时受体应选用
(5)在制备单克隆抗体的过程中,进行了两次筛选,第一次筛选是利用HAT
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【推荐2】回答下列(一)、(二)小题:
(一)自然界中有很多种微生物,尚未能分离纯化培养,科研人员开发了新的微生物分离技术以筛选微生物。
(1)配制培养基并分离微生物的步骤是:_____ →_____ →_____ →_____ →_____ →_____ →_____ →培养。筛选微生物的一般思路是,根据表型特征利用 _____ 培养基进行筛选。
(2)若某种微生物没有明显表型特征时,就无法通过上述方法筛选,科研人员通过图所示的流程进行筛选。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/2b9471be-336c-4f99-9dc2-7a88b5c95dc2.png?resizew=553)
①据图分析,科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的_____ ,构建表达载体,并导入用 _____ 处理的大肠杆菌细胞中,获取大量膜蛋白。
②用获取的膜蛋白作为抗原,利用兔子制备单克隆抗体的具体流程是:_____ 。
(3)将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合,目的是_____ 目标微生物。用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞,结果如图2所示。对结果进行比较,应从区域 _____ (选填图中数字)的细胞中筛选目标微生物。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/93398935-3520-4035-999e-b7c098e7b6d1.png?resizew=453)
(二)如图表示获得抗除草剂转基因玉米的培育过程,图中的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/a26cf991-5cda-4d92-869f-e252394d7599.png?resizew=582)
(4)构建重组质粒是基因工程的核心,此过程通常需要_____ 和DNA连接酶等工具酶。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有一段包含报告基因的T﹣DNA序列,因该片段能进入植物细胞并 _____ ,从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔定律。
(5)图中筛选1的目的是_____ 。农杆菌转化愈伤组织的过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。因此,进行筛选2时,应在培养基中加 _____ ,并挑选 _____ 的愈伤组织细胞,用于植物组织培养。
(6)将单个转化的愈伤组织细胞置于适当的液体培养基中,经过适当配比的_____ 诱导,可发育成胚状体,最后发育成完整的植株。此过程始终要在适宜温度、适宜培养基及 _____ 等条件下进行。
(一)自然界中有很多种微生物,尚未能分离纯化培养,科研人员开发了新的微生物分离技术以筛选微生物。
(1)配制培养基并分离微生物的步骤是:
(2)若某种微生物没有明显表型特征时,就无法通过上述方法筛选,科研人员通过图所示的流程进行筛选。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/2b9471be-336c-4f99-9dc2-7a88b5c95dc2.png?resizew=553)
①据图分析,科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的
②用获取的膜蛋白作为抗原,利用兔子制备单克隆抗体的具体流程是:
(3)将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合,目的是
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/93398935-3520-4035-999e-b7c098e7b6d1.png?resizew=453)
(二)如图表示获得抗除草剂转基因玉米的培育过程,图中的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/28/2967762985238528/2968487107600384/STEM/a26cf991-5cda-4d92-869f-e252394d7599.png?resizew=582)
(4)构建重组质粒是基因工程的核心,此过程通常需要
(5)图中筛选1的目的是
(6)将单个转化的愈伤组织细胞置于适当的液体培养基中,经过适当配比的
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【推荐1】2020年3月16日,中国科学家陈薇院士团队研制的重组新冠疫苗通过临床研究注册审评,获批进入临床试验。重组新冠疫苗的制备流程如图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/5/8/2458545056874496/2458804994039808/STEM/5e39dcb082bd4db3bb07383ddbe2dcb8.png?resizew=650)
回答下列问题。
(1)步骤②需要___________ 作为原料。步骤③需要的工具酶是_____________ 。
(2)被用作载体的Ad5应具有的特点是________________ (答出1点即可)
(3)步骤④是___________________ 。
(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作为_______________ ,刺激机体产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是_________________ (填“有”或“无”)SARS-CoV-2感染史,理由是_____________________ 。
(5)为探究疫苗的注射剂量对志愿者产生的免疫效果,需进一步试验,请写出实验思路______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/5/8/2458545056874496/2458804994039808/STEM/5e39dcb082bd4db3bb07383ddbe2dcb8.png?resizew=650)
回答下列问题。
(1)步骤②需要
(2)被用作载体的Ad5应具有的特点是
(3)步骤④是
(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作为
(5)为探究疫苗的注射剂量对志愿者产生的免疫效果,需进一步试验,请写出实验思路
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【推荐2】棉花是世界上主要的农作物之一,棉纤维长度是纤维品质中重要的指标之一,普通棉花中的β-甘露糖苷酶基因(GhMmaA2)能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶会催化半纤维素降解,使棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,成功获得转基因花品种,具体过程如下图。请分析回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/12/1/2863192067735552/2865941513969664/STEM/5df573e9-301f-4233-bda9-a45b8950f12f.png?resizew=530)
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心,基因表达载体除了图示组成外,至少还有______ 、______ 等,构建基因表达载体的目的是使目的基因稳定存在并且可以遗传给下一代。
(2)为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞?______ 。
(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义基因表达载体,用SmaI酶和NotI酶切割正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、8.45kb四种长度的DNA片段,则用NotI酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是______ 和______ 。
(4)④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是______ ,转化后的细胞再通过______ 技术形成完整的植株,该技术的原理是利用了植物细胞具有______ 的特点。
(5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而______ (“促进”或“抑制”)基因的表达,其意义是______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/12/1/2863192067735552/2865941513969664/STEM/5df573e9-301f-4233-bda9-a45b8950f12f.png?resizew=530)
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心,基因表达载体除了图示组成外,至少还有
(2)为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞?
(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义基因表达载体,用SmaI酶和NotI酶切割正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、8.45kb四种长度的DNA片段,则用NotI酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是
(4)④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是
(5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而
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【推荐3】腺病毒能引起人呼吸系统不适等症状,但致死率低。研究发现该病毒可作为基因工程的载体。陈薇等科学家研发了以人5型腺病毒(Ad5)为载体的重组新冠疫苗,这是国内第一个进入临床试验阶段的新冠疫苗。腺病毒载体疫苗生产过程示意图如下:
请分析回答下列问题:
(1)在制备人肾上皮细胞系(293细胞)时,发现培养一段时间,细胞铺满培养瓶后不再分裂,这种现象称为______ 。出现此现象后,需用______ 处理,得到细胞悬液,再进行______ 培养,以获得更多的293细胞。
(2)新冠病毒为RNA病毒,其遗传物质不能直接拼接到质粒上,因此在制备以上疫苗时需先通过______ 过程获得相应的DNA。构建重组腺病毒穿梭质粒,可使用双酶切法,使之产生______ (填“相同”或“不同”)的黏性末端以提高目的基因与质粒重组的成功率。据图可知需将______ 导入293细胞,从而获得转基因腺病毒。
(3)检测转基因腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达,可检测细胞内是否含有相应的______ 或抗原分子,若检测抗原分子可用______ 技术获得特异性探针。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/8/7/aaaf96e5-c7fd-44cf-a807-3b3e9092fd91.png?resizew=413)
请分析回答下列问题:
(1)在制备人肾上皮细胞系(293细胞)时,发现培养一段时间,细胞铺满培养瓶后不再分裂,这种现象称为
(2)新冠病毒为RNA病毒,其遗传物质不能直接拼接到质粒上,因此在制备以上疫苗时需先通过
(3)检测转基因腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达,可检测细胞内是否含有相应的
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【推荐1】治疗艾滋病的药物“洛匹那韦”能治疗新冠病毒感染的原因是:HIV和新冠病毒均具有包膜,其成分和细胞膜相同,包膜上有侵染宿主细胞所必需的蛋白质。它们在宿主细胞中的繁殖过程都会形成HIV蛋白酶,该蛋白酶正是“洛匹那韦”的作用对象之一。新冠病毒粘附、侵入肺泡上皮细胞的过程如图所示:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/3/31/3206223974547456/3206681320308736/STEM/2780c25f30ad42d7b4828851fd5e79b0.png?resizew=312)
回答下列问题:
(1)包膜的主要成分是_____ ,新冠病毒可以启动包膜与细胞膜上的_____ 结合,从而通过_____ 方式进入细胞内部,该方式依赖细胞膜具有_____ 性,所消耗的能量来自_____ (填图中序号)。
(2)HIV蛋白酶在宿主细胞中的合成场所为_____ 结构(填图中序号),该结构的形成与细胞核中_____ (填图中序号)有关,细胞核和细胞质之间通过_____ 结构进行物质交换和信息交流。
(3)“洛匹那韦”治疗新冠病毒感染的机理可能是_____ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/3/31/3206223974547456/3206681320308736/STEM/2780c25f30ad42d7b4828851fd5e79b0.png?resizew=312)
回答下列问题:
(1)包膜的主要成分是
(2)HIV蛋白酶在宿主细胞中的合成场所为
(3)“洛匹那韦”治疗新冠病毒感染的机理可能是
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【推荐2】新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合。图1为病毒侵入后,人体内发生的部分免疫反应。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为研制单克隆抗体药物的示意图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/4/21/564f4f06-5021-4979-8a6e-a4672a4adba7.png?resizew=510)
(1)最近国内报道多起进口冷链食品外包装上检测到新冠病毒,此种传播途径肯定不是___________。
(2)图1中细胞①为___________ 。根据资料及图2信息,注射进小鼠的物质为___________ 。产生单克隆抗体的细胞名是___________ 。
(3)图2中④、⑤均为融合后不符合要求的细胞则细胞④或⑤的特点可能是___________。(多选)
(4)图2中所示的细胞工程技术有___________ 。
果蝇肠道中有包括醋酸杆菌在内的多种微生物,为研究醋酸杆菌对果蝇生长发育的影响,研究者首先需对醋酸杆菌进行分离。
(5)分离醋酸杆菌:培养基中加入一定浓度甘露醇既可为醋酸杆菌提供___________ ,又能抑制其它肠道微生物的生长,因此从功能上看可作为___________ 培养基用于分离醋酸杆菌。实验中剥取果蝇肠道并用___________ (生理盐水/无菌水/蒸馏水)冲洗,将所得液体涂布于已制备的培养基中,分离得到醋酸杆菌。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/4/21/564f4f06-5021-4979-8a6e-a4672a4adba7.png?resizew=510)
(1)最近国内报道多起进口冷链食品外包装上检测到新冠病毒,此种传播途径肯定不是___________。
A.空气传播 | B.接触传播 | C.媒介物传播 | D.病媒传播 |
(3)图2中④、⑤均为融合后不符合要求的细胞则细胞④或⑤的特点可能是___________。(多选)
A.能快速增殖,也能产生抗体 | B.不能增殖,但能产生抗体 |
C.能快速增殖,不能产生抗体 | D.不能增殖,不能产生抗体 |
果蝇肠道中有包括醋酸杆菌在内的多种微生物,为研究醋酸杆菌对果蝇生长发育的影响,研究者首先需对醋酸杆菌进行分离。
(5)分离醋酸杆菌:培养基中加入一定浓度甘露醇既可为醋酸杆菌提供
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【推荐3】新冠病毒(RNA病毒)引起的疫情仍在一些国家和地区肆虐,科研工作者研制的新冠病毒核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)为新冠肺炎疫情防控提供了快速、简便、精准的核酸检测方案,RT-PCR荧光探针法即实时荧光定量PCR技术,通过荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,对待测样品通过检测荧光信号的累积(以Ct值表示)来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒检测的具体操作过程如图所示,回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/6/26/3009762830090240/3012229656305664/STEM/4c0946097b7e4ae8a41fc7c1bb2916fe.png?resizew=193)
(1)若要得到正确的检测结果,正确的操作步骤是______ (用数字序号表示),
①从病人组织样本中提取RNA;②利用PCR扩增DNA片段;③分析PCR扩增结果;④采集病人组织样本;⑤反转录获得cDNA。
(2)PCR反应中的每次循环可分为变性、复性和______ 三步,其中变性的温度是______ ,复性的目的是______ ;PCR反应过程中子链的延伸方向是______ 。
(3)采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述RT-PCR过程,每一个扩增出来的DNA序列,都可与预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的目的基因越多,观察到的Ct值就越______ 。
(4)新冠病毒疫苗有多种,其中我国科学家已研发出的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(重组疫苗)是一种基因工程疫苗,其基本制备步骤是:将新冠病毒的S基因连接到位于载体上的腺病毒基因组DNA中,重组载体经扩增后转入特定动物细胞,进而获得重组腺病毒并制成疫苗。重组疫苗只需要注射一针即可完成接种。数周后,接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA,但其DNA不会整合到人的基因组中。请由此推测只需要注射一针即可起到免疫保护作用的原因:______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/6/26/3009762830090240/3012229656305664/STEM/4c0946097b7e4ae8a41fc7c1bb2916fe.png?resizew=193)
(1)若要得到正确的检测结果,正确的操作步骤是
①从病人组织样本中提取RNA;②利用PCR扩增DNA片段;③分析PCR扩增结果;④采集病人组织样本;⑤反转录获得cDNA。
(2)PCR反应中的每次循环可分为变性、复性和
(3)采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述RT-PCR过程,每一个扩增出来的DNA序列,都可与预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的目的基因越多,观察到的Ct值就越
(4)新冠病毒疫苗有多种,其中我国科学家已研发出的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(重组疫苗)是一种基因工程疫苗,其基本制备步骤是:将新冠病毒的S基因连接到位于载体上的腺病毒基因组DNA中,重组载体经扩增后转入特定动物细胞,进而获得重组腺病毒并制成疫苗。重组疫苗只需要注射一针即可完成接种。数周后,接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA,但其DNA不会整合到人的基因组中。请由此推测只需要注射一针即可起到免疫保护作用的原因:
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