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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:139 题号:11352219
某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。

回答下列问题:
(1)该团队在将甲插入质粒P0时,使用了__________________酶,质粒P0作为_____起作用。
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了_________________过程。
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的_________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。

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【推荐1】下图表示两种流感病毒的单克隆抗体的生产流程。回答下列问题:

(1)抗体1的生产过程所依据的遗传学原理是_____,抗体2的生产过程所依据的生物学原理是_____
(2)图中d过程将目的基因导入大肠杆菌前,常用_____处理大肠杆菌使其处于感受态,要检测受体细胞是否转录出相应的mRNA,可采用的技术是_____
(3)B淋巴细胞与细胞A融合后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,还可能有_____。体系中出现多种类型细胞的原因是_____。获得的杂交瘤细胞,需要经过克隆化培养和过程_____后,才能在体内或体外大规模培养。
2022-05-11更新 | 175次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐2】干扰素是一种糖蛋白, 具有抗病毒、抑制细胞增殖、调节免疫及抗肿瘤作用。每升人血液只能提取 0.05 μg,且提取困难,所以价格昂贵。科学家利用基因工程的方法,将人干扰素基因导入微生物细胞,利用工程菌为人类生产干扰素,大大提高了产量和速度。下图为某基因公司利用酵母菌生产干扰素的过程,试分析回答下列问题∶

(1)基因工程的优点是______________________________
(2)基因工程的核心步骤是____,该步骤通常使用的工具酶有__________________
(3)酵母菌等微生物作为工程菌的优点有________________________(答出2点即可)。将带干扰素基因的质粒导入酵母菌细胞常用Ca2+处理细胞,使其成为______细胞。
(4)干扰素基因在酵母菌细胞中稳定存在并完成表达的过程叫___。检测干扰素基因在酵母菌是否翻译出干扰素,常用的检测方法是______
(5)若利用大肠杆菌作为干扰素基因的受体细胞,则大肠杆菌分泌的干扰素不具备生物活性,理由是__________________
2021-04-02更新 | 213次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】苯丙酮尿症是由于患者PKU基因突变引起体细胞中缺少一种酶,致使体内的苯丙氨酸代谢异常转化为苯丙酮酸,从而导致患者神经系统损害。将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上来替换突变基因,可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是:从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2,根据其碱基序列分别合成HB1和HB2,再将两者分别与基因K1、K2连接,中间插入正常PKU基因和标记基因neor,构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换,导致两者之间区域发生互换,如图所示。回答下列问题:

(1)上图中通过基因定点整合可替换特定基因,该技术可用于单基因遗传病的治疗,该技术的应用原理属于________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠,除了胚胎干细胞能大量增殖外,还因为胚胎干细胞________
(2)实验中小鼠胚胎发育到囊胚期时,聚集在胚胎一端,个体较大的细胞是______________,可将其取出并分散成单个细胞进行培养,将来可为实验提供所需的胚胎干细胞。培养过程中培养液除了一些无机盐和有机盐外,还需要添加“两酸、两素”以及动物血清,其中的“两酸”是指________,培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为________
(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时,会出现PKU基因错误整合。错误整合时,载体的两个K基因中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上。已知含有neor的细胞具有G418的抗性。 K1、K2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养,在双重选择下存活下来的是________的胚胎干细胞,理由是____________________________
(4)将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠,从个体生物学水平检测,若小鼠尿液中________,说明PKU基因成功表达。
2020-06-10更新 | 229次组卷
共计 平均难度:一般