某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
(1)该团队在将甲插入质粒P0时,使用了_________ 和_________ 酶,质粒P0作为_____ 起作用。
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________ 和_________ 过程。
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的_________ 移入牛的____________ 中、体外培养、胚胎移植等。
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________ (填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。
回答下列问题:
(1)该团队在将甲插入质粒P0时,使用了
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的
更新时间:2020-10-02 00:03:15
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【推荐1】下图表示两种流感病毒的单克隆抗体的生产流程。回答下列问题:
(1)抗体1的生产过程所依据的遗传学原理是_____ ,抗体2的生产过程所依据的生物学原理是_____ 。
(2)图中d过程将目的基因导入大肠杆菌前,常用_____ 处理大肠杆菌使其处于感受态,要检测受体细胞是否转录出相应的mRNA,可采用的技术是_____ 。
(3)B淋巴细胞与细胞A融合后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,还可能有_____ 。体系中出现多种类型细胞的原因是_____ 。获得的杂交瘤细胞,需要经过克隆化培养和过程_____ 后,才能在体内或体外大规模培养。
(1)抗体1的生产过程所依据的遗传学原理是
(2)图中d过程将目的基因导入大肠杆菌前,常用
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【推荐2】干扰素是一种糖蛋白, 具有抗病毒、抑制细胞增殖、调节免疫及抗肿瘤作用。每升人血液只能提取 0.05 μg,且提取困难,所以价格昂贵。科学家利用基因工程的方法,将人干扰素基因导入微生物细胞,利用工程菌为人类生产干扰素,大大提高了产量和速度。下图为某基因公司利用酵母菌生产干扰素的过程,试分析回答下列问题∶
(1)基因工程的优点是______________________________ 。
(2)基因工程的核心步骤是____ ,该步骤通常使用的工具酶有__________________ 。
(3)酵母菌等微生物作为工程菌的优点有________________________ (答出2点即可)。将带干扰素基因的质粒导入酵母菌细胞常用Ca2+处理细胞,使其成为______ 细胞。
(4)干扰素基因在酵母菌细胞中稳定存在并完成表达的过程叫___ 。检测干扰素基因在酵母菌是否翻译出干扰素,常用的检测方法是______ 。
(5)若利用大肠杆菌作为干扰素基因的受体细胞,则大肠杆菌分泌的干扰素不具备生物活性,理由是__________________ 。
(1)基因工程的优点是
(2)基因工程的核心步骤是
(3)酵母菌等微生物作为工程菌的优点有
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【推荐3】苯丙酮尿症是由于患者PKU基因突变引起体细胞中缺少一种酶,致使体内的苯丙氨酸代谢异常转化为苯丙酮酸,从而导致患者神经系统损害。将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上来替换突变基因,可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是:从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2,根据其碱基序列分别合成HB1和HB2,再将两者分别与基因K1、K2连接,中间插入正常PKU基因和标记基因neor,构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换,导致两者之间区域发生互换,如图所示。回答下列问题:
(1)上图中通过基因定点整合可替换特定基因,该技术可用于单基因遗传病的治疗,该技术的应用原理属于________ 。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠,除了胚胎干细胞能大量增殖外,还因为胚胎干细胞________ 。
(2)实验中小鼠胚胎发育到囊胚期时,聚集在胚胎一端,个体较大的细胞是______________ ,可将其取出并分散成单个细胞进行培养,将来可为实验提供所需的胚胎干细胞。培养过程中培养液除了一些无机盐和有机盐外,还需要添加“两酸、两素”以及动物血清,其中的“两酸”是指________ ,培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为________ 。
(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时,会出现PKU基因错误整合。错误整合时,载体的两个K基因中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上。已知含有neor的细胞具有G418的抗性。 K1、K2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养,在双重选择下存活下来的是________ 的胚胎干细胞,理由是____________________________ 。
(4)将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠,从个体生物学水平检测,若小鼠尿液中________ ,说明PKU基因成功表达。
(1)上图中通过基因定点整合可替换特定基因,该技术可用于单基因遗传病的治疗,该技术的应用原理属于
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【推荐1】将人的抗病毒干扰素基因“嫁接”到烟草的DNA分子中,可使烟草获得抗病毒的能力,形成转基因产品。请分析回答下列问题:
(1)烟草转基因产品的获得属于______________
A.基因工程 B.细胞工程 C.微生物工程 D.酶工程
(2)烟草具有抗病毒能力,说明烟草体内产生了_______________ ,不同生物间基因移植成功,说明生物共用一套_______________ 。烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因,实际并不影响遗传信息的表达功能,这说明__________________________________________ 。
(3)该工程应用于实践,将给农业,医药等诸多领域带来革命,目前已取得了许多成就,请列举你所知道的或你所设想的应用该工程的三个具体实例。_____________________________________________
(4)有人认为,转基因技术是一把双刃剑,犹如船能载舟也能覆舟,甚至可能带来灾难性的后果,你是否支持这一观点?如果支持,请你举出一个可能出现的灾难性后果的实例。_______________________________________
(1)烟草转基因产品的获得属于
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【推荐2】如图所示为培育转基因大鼠和制备单克隆抗体的流程图,请据图回答下列问题。
(1)图1中培育转基因大鼠的目的基因是____________ ;将重组质粒导入大鼠的受精卵,而不是体细胞的原因是________________________ 。
(2)图1中所运用的生物技术包括________________________ (答出2点即可)。
(3)图2中X细胞和Y细胞分别是_____________________ ,①过程的原理与____________ 致癌因子的原理类似。
(4)图2中②过程常用的物理因素是____________ ;③过程最终筛选出的目的细胞的特点是____________ 。
(1)图1中培育转基因大鼠的目的基因是
(2)图1中所运用的生物技术包括
(3)图2中X细胞和Y细胞分别是
(4)图2中②过程常用的物理因素是
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【推荐3】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答.
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤是:_____ 、_____ 、_____ 、_____
(2)过程②必需的酶是______ 酶,过程③必需的酶是______ 酶
(3)在利用AB获得C的过程中,必须用______ 切割A和B,使它们产生______ ,再加入______ ,才可形成C
(4)为使过程⑧更易进行,可用______ (药剂)处理D一般将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤是:
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(3)在利用AB获得C的过程中,必须用
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