【推荐1】【生物——选修3：现代生物科技专题】
图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________。农杆菌转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_____________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中_____________上。
（2）推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是__________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则________________。
（3）方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与_______________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植人受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于_________时期的_______细胞进行检测。

【推荐2】资料显示，中国每年约有13万新增宫颈癌病例，占全球新发病例的三分之一，其中约有8万女性去世。宫颈癌也是中国15岁至44岁女性中的第二大高发癌症。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：

(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_________________________。
(2)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/ mL，每孔加入细胞稀释液_____ mL，使每个孔内细胞一般不多于一个，达到单克隆培养的目的。
(3)由上述过程生产出的单克隆抗体一般不能直接用于人体，理由是____________________。
(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。_______________________________________。
(5)利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间，其基本途径是从_________________出发，设计_________________，进一步推测应有的氨基酸序列，进而确定对应的脱氧核苷酸序列，据此获得相应基因。

【推荐3】采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF1）基因导入受试植物，并检测了相关指标。
回答下列问题：
(1)将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的酶是__________。
(2)一个完整的基因表达载体包括复制原点、启动子_____________________________等，构建基因表达载体的目的是___________________；其中启动子的作用是___________
(3)将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中（如下图），半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的__________（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的__________进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。

(4)已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是____________________。相较于草本植物，采用杨树这种乔木作为Cd污染土壤修复植物的优势在于___________（写出两点即可）。

【推荐1】Ⅰ.有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。

(1)实验使用的培养基，含有营养物质和______。制备培养基时，应将pH调至______。图中继续实验中可能包含的实验操作依次有______、______、______。
(2)通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。可能的原因是______。
(3)实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是______。图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将细菌悬液进行梯度稀释，分别取0.14mL稀释倍数为的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕的细菌数为______个。
Ⅱ.研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内，成功获得了抗虫转基因棉花，在一定程度上减少了杀虫剂的使用，减少了环境污染，提高了作物的产量和质量。
(4)提取某细菌总RNA，经逆转录形成互补的DNA（cDNA），再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA，PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程，故反应体系中需加入______酶。
(5)常用农杆菌与经______处理后的外植体共培养一段时间完成转化，需先将C基因的cDNA插入到T质粒的T-DNA上并导入农杆菌，有利于______。若要检测目的基因是否反向插入，______（填“能”或“不能”）根据带标记的目的基因单链作探针的核酸分子杂交结果判断。
Ⅲ.基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切害（如图）。请据图回答：

(6)CCR5基因是人体的正常基因，其编码的细胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵辅助性T淋巴细胞的主要辅助受体之一。科研人员依据______的部分序列设计sgRNA序列，导入骨髓造血干细胞中，构建sgRNA-Cas9复合体，以实现对CCR5基因的定向切割，变异的CCR5蛋白无法装配到细胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的—从而有效减缓病症。

【推荐2】科学家利用基因工程和胚胎工程等技术培育转基因奶牛的流程如图所示，他们将某病毒的抗原基因加上乳腺蛋白基因的启动子并进行适当修饰后导入受精卵，最终获得的转基因奶牛分泌的乳汁中含有该病毒的抗原。据图分析并回答下列问题。

（1）图中①过程需要_________的催化；②过程常用到多聚酶链式反应，该反应用到的酶具有的显著特点是____________；③过程用到的工具酶是__________。
（2）科学家在④过程获得的受精卵中没有检测到该病毒的抗原，这一结果_____（填能或不能）作为判断“目的基因没有导入受精卵染色体”的依据，理由是__________。
（3）比较⑤和⑥过程，细胞的减数分裂没有完成的是______。
（4）囊胚的d细胞与其他细胞相比，在形态上具有的特点是__（答出3点即可）。

【推荐3】下表是几种限制性核酸内切酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制性核酸内切酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

限制性核酸内切酶	BamHI	Bcl I	Sau3A I	HindIl
识别序列及切割位点

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用___________________两种限制性核酸内切酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶连接形成重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于______________态的大肠杆菌中。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加______________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中____________________________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为______________，对于该部位，这两种酶__________（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。
(4)若用Sau3AⅠ酶切图1质粒，最多能获得___________种大小不同的DNA片段。
(5)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自_____________