【推荐1】从自然界中的生物体内分离得到的天然酶，在工业生产环境中催化效率往往较低。科研人员对酶的改造包括理性设计方法和非理性设计方法。
(1)理性设计是通过定点诱变改变蛋白质中的个别氨基酸，以产生更加理想的酶，此项技术称为_____。
(2)非理性设计方法主要通过易错PCR技术实现。易错PCR的原理是利用低保真的TaqDNA聚合酶和改变PCR的反应条件，降低DNA复制的保真度，在新DNA链的合成过程中增加碱基错配，从而使扩增产物出现较多点突变的一种体外诱导DNA序列变异的方法。
①TaqDNA聚合酶与一般DNA聚合酶相比最大的特点是 ________，其某一区域负责将碱基与模板链正确地互补配对，Mn²⁺可以降低这一功能，提高碱基的错配，但非互补的碱基对由于______不易形成，稳定性差，而Mg²⁺可以提高稳定性，易错PCR时应适当_______（填“提高”或“降低”）Mg²⁺浓度。
②易错PCR的反应程序为：95℃5min；95℃30s，55℃30s，72℃1min，30个循环；72℃10min。在循环之前的95℃5min处理为预变性，目的是确保_________；循环中55℃处理的目的是使__________结合；循环之后72℃处理时间延长至10min，有利于增加延伸过程中碱基错配的概率。
③下图是利用易错PCR改造某种天然酶活性的流程示意图。步骤a体现了基因突变具有_______特点，变异类型主要为碱基对的_____。

④步骤b应使受体菌处于______态；步骤c采用_____技术筛选突变酶；步骤d将一轮易错PCR筛选获得的有益突变继续进行新一轮的易错PCR，通过连续易错PCR和筛选，导致酶的_________进化，以获得满足人们需求的产物。

【推荐2】如图是运用生物工程技术培育“转基因试管牛”的图解。请回答下列相关问题：

（l）图中①过程之前通常采用_____法对采集的良种公牛精子进行获能处理。精子和卵子在发生上的重要区别是哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备是在_____完成的。
（2）图中③过程通常选择发育到_____阶段的胚胎进行移植，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_____
（3）构建药用蛋白基因表达载体需要将药用蛋白基因与_____的启动子等调控组件重组在一起，通过_____方法导入到性染色体组成为_____的受精卵中。
（4）若得到的药用蛋白不稳定，在体外保存期短。为解决这一问题，可通过对药用蛋白基因进行_____来实现对现有药用蛋白的改造。

【推荐3】腈水合酶（NHase）是一种金属酶，能催化腈类物质转化为相应的酰胺类物质，广泛应用于酰胺类化合物的生产。但由于NHase的稳定性较差，在催化反应过程中易受到温度等影响而逐渐失活，这严重影响了NHase的工业化应用。回答下列问题：
(1)研究人员拟通过蛋白质工程改造酶分子的结构，以提高NHase的稳定性，其基本思路是（设改造前的酶为NHase1，改造后的酶为NHase2）：预期NHase2的功能→____________→推测应有的氨基酸序列→找到并改编相应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得NHase2。
(2)根据NHase2的氨基酸序列推测mRNA的碱基序列______（填“是”或“不是”）唯一的，理由是_______。
(3)设计改造获得的NHase2最终还必须通过改造或合成______来完成，原因是___________________________。
(4)若要比较蛋白质工程改造后的NHase2与NHase1在50℃下的稳定性差异，请简要写出实验思路：________。

【推荐1】“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，由单克隆抗体与药物结合而成。单克隆抗体能自动导向，在生物体内与特定细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示，分析回答下列问题：

（1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得___________细胞，提取该细胞之前，给小鼠注射的特定物质相当于___________；B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是______________________。
（2）体外培养杂交瘤细胞时需要适宜气体环境，故需将杂交瘤细胞置于含________________和________________的混合气体的培养箱中进行培养。另外，培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入一些天然成分，如______________________。
（3）特异性抗体也可以通过常规方法来制备：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比，单克隆抗体具有______________________等优点。

【推荐2】2018年诺贝尔生理学或医学奖授予了美国的詹姆斯·艾利森和日本的本庶佑，以表彰他们在癌症免疫负调控机制，尤其是免疫检查点的研究中取得的成就。免疫检查点分子众多，PD－1/PD－L1作为一个最关键的免疫检查点，利用抗PD－1或PD－L1单克隆抗体类制剂阻断PD－1/PD－L1途径的治疗已经成为癌症免疫治疗的焦点。图为制备上述单克隆抗体的过程，请回答下列相关问题：

（1）①过程采用的实验技术为________________，促进该过程常使用______________诱导。　
（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成________________种类型的细胞C，经过筛选获得的细胞D是__________________，其具有的特点是__________________________________。
（3）在细胞培养过程中，首先应保证被培养细胞处于________________环境中，细胞培养还应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的主要作用是__________________________。
（4）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了____________。

【推荐3】Ⅰ2020年新冠肺炎流行，目前还没有特效药。有科学家认为，特异性抗体是目前可以期待的特效药，下图是研制和生产特异性抗体的两个技术路线。请据图回答相关问题：

（1）图中①过程涉及的技术是_____________。形成的细胞M可以在体外条件下大规模培养，也可以_____________增殖。在体外条件下进行培养时，培养液中除了必要的营养物质外，还要加入抗生素，目的是_______________________；将细胞接种到培养液中后，将培养液放置在合适的温度和含_______________________的混合气体条件下培养。
（2）图中④过程是______，该过程选择的质粒需有____________________________________ （答2点）等构件。
（3）有人说抗体n可能不能发挥吸附病毒的作用，你同意这个观点吗?______________，原因是_________________________________。
Ⅱ．下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是_____________。
（2）单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_____________。
（3）若不考虑环境因素的影响，克隆羊的性状为什么不全部像白面绵羊？ ______________。
（4）图乙过程的技术具有多种用途，但是不能______________
A．有选择地繁殖某一性别的家畜               B．繁殖家畜中的优良个体
C．改变动物的核基因                                D．用于保存物种
（5）在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是__________
A．重组细胞才具有全能性
B．卵母细胞含有的营养物质多
C．卵母细胞大，便于操作
D．卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达

【推荐1】女性怀孕后会分泌一种糖蛋白——绒毛膜促性腺激素（HCG），尿液中可检出HCG的存在。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，回答下列问题：

   

(1)制备单克隆抗体利用的生物学技术有_______（答出两点）。给小鼠注射的HCG相当于_______（填“抗体”或“抗原”）。
(2)将从小鼠脾脏中提取出的B淋巴细胞和小鼠的_______细胞融合，通过多次筛选，从而获得阳性克隆的杂交瘤细胞，并最终获得抗HCG单克隆抗体。
(3)用特定的选择培养基对乙筛选，所得细胞丙的特点是_______，对丙检测筛选得到丁，所采用操作技术依据的原理是_______。
(4)为了更多地生产出人HCG，有人构思采用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多份，进而培育出大量相同的转基因小鼠生产HCG，这种方法_______（填“可行”或“不可行”）。
(5)怀孕女性尿液中的HCG会与验孕试纸上的相应抗体结合。将试纸有MAX标志线的一端插入尿液后平放，若有HCG，则HCG会随尿液向右扩散，与包埋在标志线右侧的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合，形成复合体后继续随尿液向右扩散至检测线处，与固定于此的抗体2结合成新的复合体而在此处显色。对照线区域的抗体3也会捕获上述抗体1而显示出颜色。若女性已怀孕，则她尿检时显色的是_______（填“检测线”“对照线”或“检测线和对照线”）。

   

【推荐2】（除标注，下图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答。

（1）上图中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从____________和____________中分离获取。
（2）过程I将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的____________，加入抗生素是为了_______________。该过程对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（3）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，该过程研究的意义在于解决________________________________问题。
（4）该研究中，包含的生物技术有___________________________________（至少写出两种）。
（5）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有_______________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是___________。
（6）过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导入胚胎干细胞之前需构建基因表达载体，将构建好的表达载体导入胚胎干细胞最常用的方法是___________________。