组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:356 题号:15262256
促红细胞生成素(EPO)能促进骨髓中红系祖细胞增殖、分化成成熟红细胞,从而维持血液中红细胞的数量,用于临床治疗因慢性肾功能不全等所致的贫血。下图表示转EPO基因山羊的培育过程,从其乳汁中可以获得有活性的重组人促红细胞生成素(rhEPO),但科学是一把双刃剑,有人借助基因治疗手段,将EPO基因注入人体,在体内形成局部的EPO制造基地,以此来增加血液中的红细胞含量,从而提高运动成绩,这是基因兴奋剂!这种做法是违法的。回答下列问题:

(1)不是将EPO基因直接导入受精卵,而是经过过程①构建重组表达载体,再经过过程⑤将重组表达载体导入受精卵,其目的是使EPO基因在受体细胞中___,能够表达和发挥作用,并遗传给后代。过程①常用到___酶,过程⑤常采用___仪完成。
(2)图示重组表达载体中,选用某种乳蛋白基因的调控序列作为EPO基因的启动子原件,目的是___
(3)受精卵可以在体外通过___(填“人工授精”或“体外受精”)技术获得;从___。(填“卵巢中采集”或“输卵管中冲取”)的卵母细胞可以直接与用___(填“假阴道法采集”或“钙离子载体A23187溶液处理”)的精子来完成这一技术过程。
(4)接受EPO基因治疗的人很可能会产生外周血栓和心血管问题,从而患上高血压和中风,原因可能是___

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的,基本操作流程如图所示,请据图分析回答:

(1)图中A是_______,最常用的是_______;在基因工程中,需要在限制酶和________酶的作用下才能完成剪接。
(2)不同种生物之间基因能够移植成功,从分子水平分析,进行基因工程的主要理论依据是___________,也说明了生物共用一套________
(3)研究中发现,番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用,会导致害虫无法消化食物而被杀死,人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内,使玉米获得了与番茄相似的抗虫性状,玉米这种变异的原理属于_________________
(4)科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上,经培养长成的植株具备了抗病性,这说明______________________________
2019-07-24更新 | 113次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐2】下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解,质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lac Z基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal,产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。请分析回答下列问题。

回答下列问题。
(1)基因工程的基本操作程序包括:________________________
(2)过程①选用限制酶的最佳方案是______。
A.只有Bam HIB.Bam HI和Eco RIC.Eco RV和Bam HID.Eco RV和Eco RI
(3)构建基因表达载体时,一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是______,终止子的作用是______
(4)过程②需要先将大肠杆菌用______处理,目的是______
(5)为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌,可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入______,培养一段时间后挑选出______(填“蓝色”或“白色”)的菌落进一步培养,从而获得大量目的菌。
(6)目的基因导入受体细胞后,首先要进行分子水平的检测,常用______技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳;其次还需要进行______水平的鉴定。
2023-06-22更新 | 75次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】加端PCR是使扩增产物的末端加上一段DNA序列的PCR。加端PCR的引物被设计成除与模板配对的那一部分以外再加上若干碱基,以便能使扩增产物的末端加上额外的一段DNA。 hIGF-1 cDNA编码成熟蛋白的序列两端无起始密码子和终止密码子的对应位置,也没有合适的限制酶切割位点。实验人员为了在枯草杆菌中表达hIGF-1,应用加端PCR技术对hIGF-1 cDNA进行改造,以期获得含有hIGF-1成熟蛋白79个氨基酸编码序列,并在两端分别带有PstⅠ和SalⅠ酶切位点的DNA片段。加端PCR技术示意图如下,回答下列问题:

(1)进行加端PCR时应选用的引物是_______
(2)在目的基因的两端添加限制酶切割位点的目的是_______,将含有改造后的hIGF-1基因导入枯草杆菌的常用方法是用Ca2+处理枯草杆菌,其目的是_______;原核生物作为基因工程的受体细胞的优点有_______(答出3点)。
(3)限制酶PstⅠ的识别序列及切割位点为-CTGCA↓G-,请根据该序列写出经PstⅠ切割后产生的黏性末端_______
(4)在构建基因表达载体时,使用PstⅠ和SalⅠ酶两种限制酶切割hIGF-1基因和质粒,而不是只选择一种限制酶切割hIGF-1基因和质粒,这样做的优点是_______(答出2点)。
2023-08-30更新 | 161次组卷
共计 平均难度:一般