【推荐1】大肠杆菌的一种质粒只有某限制酶的一个识别序列，位于该质粒的lacZ基因中。lacZ基因若无外源基因插入，便可表达出半乳糖苷酶。当培养基中含有两种物质I和X时，X便会被半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。如果lacZ基因中插入了外源基因，带有该种质粒的大肠杆菌便不能表达半乳糖苷酶，培养基中的X不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。大肠杆菌的这种质粒还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活、筛选出重组质粒的示意图。据图回答下列问题：


(1)图示通过______________方法获得蓝藻基因。作为受体大肠杆菌应_______________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，完成基因工程操作_______________________________步骤。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_________________________________________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①_______________________________。②_____________________________。
(4)若改用噬菌体为运载体，科学家分别用³²P、³⁵S标记噬菌体内的目的基因、外壳，在下图中标记元素³²P、³⁵S所在部位依次是____________________（填图中标号）。

【推荐2】（1）用限制酶BamHI和BclI（识别序列和切割位点如图A所示）联合切开长度为2.8kb（1 kb = 1000对碱基）的pul基因，并将之与BamHI打开的质粒（如图B所示）粘连拼接，那么所获得的重组质粒（每个质粒分子含单个pul基因）用BamHI和EcoRI联合酶切，可产生长度分别为__________kb的片段或者长度分别为________________kb的片段。

（2）上述重组质粒与大肠杆菌受体细胞混合进行导入操作，之后还需要筛选，这是因为_________________________________________________。
（3）上述含重组质粒的大肠杆菌细胞进行大规模培养可获得普鲁兰酶产品，在工业化应用之前可先进行提纯及固定化处理，这个过程在生物工程中称为___________，其目的和原理是___________（填下列选项）。
A．使普鲁兰酶不溶于水，因为支链淀粉不溶于水
B．使普鲁兰酶重复使用，因为酶在反应前后性质不变
C．使普鲁兰酶更趋稳定，因为蛋白质固定化后不易被降解
D．使普鲁兰酶活性更高，因为蛋白结构在固定化后往往会改变

【推荐3】干扰素是脊椎动物受多种因素诱导产生的一组抗病毒分泌蛋白，对体液免疫和细胞免疫均有调节作用。随着现代科学技术的发展，可以通过转基因工程技术利用大肠杆菌生产干扰素，回答下列相关问题：
（1）从人白细胞中提取干扰素基因的mRNA，通过_____的方法得到 cDNA，再通过 PCR技术扩增，用该技术进行目的基因扩增的前提是需要用已知的_____为模板合成引物。
（2）将干扰素基因、_____和标记基因构建成基因表达载体导入大肠杆菌，大肠杆菌需用_____处理，使之成为一种_____的感受态细胞。若不构建基因表达载体而是将干扰素基因直接导入大肠杆菌细胞，则一般不能得到干扰素，其原因是_____。
（3）检测干扰素基因是否导入大肠杆菌细胞应采用_____技术，经检测从大肠杆菌细胞中获得的干扰素未能达到预期的生物活性，其原因可能是_____。

【推荐1】为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题：

(1)酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶(Cla Ⅰ、Sac Ⅰ、Xba Ⅰ)的切点如图甲所示，现为获得融合基因，研究人员采用PCR法扩增酶D基因，首先要依据基因的________设计引物，同时从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，再用________和________酶处理两个基因后，即可得到________端与________端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T­DNA中，构建________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的培养基上，其目的是________________________，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_______________________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过________________技术，可培育成转基因油菜植株。

【推荐2】回答下列问题：
(1)天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的_____。
(2)结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有_____（答出三点）等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用_____的转基因方法。
(3)为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面_____后去除下表皮，再将其置于经过滤灭菌处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法及其对应的原理是_____（答出两点）。原生质体在培养过程中，只有重新形成_____后，才可进行有丝分裂。
(4)利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程，与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间_____，且不经历_____过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。
(5)将抗病基因通过转基因的方法导入植物的分生组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间用分子水平方法判断抗病基因是否表达，应检测_____（答两点）。

【推荐3】将基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如下图：

(1)发育成的植株④称为_____________，基因型为_____________________.
(2)小麦形成花粉的细胞分裂方式是_____________，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是________________。
(3)若得到可育的植株，需要用____________对_________（填符号）进行处理，所获得的基因型可能是_______________________________________。
(4)①→②过程需要的条件有________。

A．营养

B．激素

C．光照

D．pH

【推荐1】科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄一马铃薯”植株，请回答下列问题：

(1)获得a、b所选用的酶为___________。植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有___________。
(2)过程②为原生质体融合，所用的化学诱导剂一般是___________，③过程成功的标志是___________。
(3)诱导f中植株生根的过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较4过程__________（填“高”或“低”）；若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞内含n条染色体，则“番茄一马铃薯”杂种植株的体细胞内含___________条染色体，最终获得的“番茄一马铃薯”属于__________倍体植株，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？___________。

【推荐2】如图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：

（1）步骤①是_______________________，最常用的方法是___________________。
（2）步骤②一般常用的化学试剂是___________，目的是____________________。
（3）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是________，其中步骤④相当于_______，步骤⑤相当于_______。
（4）原生质体融合的目的是获得_______。远缘杂交的两个亲本的遗传特征能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是________。

【推荐3】下图为植物体细胞杂交过程示意图，据图回答：

(1)步骤①是去掉______，使植物细胞成为______。
(2)步骤②一般常用的化学试剂是____________。与③过程密切相关的细胞器是____________。
(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，其中步骤④相当于______，步骤⑤相当于______。在④⑤培养过程中，培养基需要添加____________、____________等植物激素。
(4)若远源杂交亲本A和B都是二倍体，则杂种植株为______倍体。从理论上讲，杂种植株的育性为______。（填“可育”或“不可育”）