人类乳头瘤病毒(HPV)有多种亚型,HPV45属于高危型,与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白,如图为科研人员进行了抗HPV45L1蛋白单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据下图回答下列问题:
(1)图中向小鼠注射抗原(HPV45)后,所获得的免疫抗血清实际上是含有___________ (填写抗体的名称)的混合物,这种方法制备的抗体不仅产量低,而且纯度低。与其相比,单克隆抗体突出的优点在于它的__________ ,并能大量制备。
(2)与植物原生质体融合相比,杂交瘤细胞融合过程特有的方法是用__________ 处理。通过动物细胞培养技术体外培养杂交瘤细胞时,培养过程中需要定期更换培养液,原因是__________ ,培养液中有各种营养物质,但仍需添加___________ 以补充细胞生长所需的未知营养物质。
(3)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板中培养,分别取其上清液进行抗体阳性检测。检测的原理及操作流程如下图:
实验过程中,将____________ 作为抗原固定,将未免疫的小鼠血清及从多孔培养板的不同孔中取出的___________ 种杂交瘤细胞上清液稀释不同倍数后分别加入到反应体系中,然后加入__________ 与待测抗体发生特异性结合,待充分反应后测吸光值,颜色越深吸光值越高说明反应效果越强。
(1)图中向小鼠注射抗原(HPV45)后,所获得的免疫抗血清实际上是含有
(2)与植物原生质体融合相比,杂交瘤细胞融合过程特有的方法是用
(3)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板中培养,分别取其上清液进行抗体阳性检测。检测的原理及操作流程如下图:
实验过程中,将
更新时间:2023-04-15 08:07:15
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【推荐1】下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1)_____________________________ 技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)在图中HAT培养上,未融合的亲本细胞和融合的_________________ 都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最主要的优点是__________________ 。
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速大量繁殖特点,又具备淋巴细胞的产生专一的抗体的特点,经过选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行______________ 和___________ ,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或在____________ 内增殖,从________________ 或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了。
(1)
(2)在图中HAT培养上,未融合的亲本细胞和融合的
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最主要的优点是
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速大量繁殖特点,又具备淋巴细胞的产生专一的抗体的特点,经过选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行
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【推荐2】正常细胞表面的PD-L1蛋白与T细胞表面的PD-1蛋白结合后能够相处的融洽,而细胞表面没有PD-L1蛋白的肿瘤细胞处境就不同了,T细胞会对其杀伤。但有很多肿瘤细胞表面也能表达出PD-L1蛋白,试图逃过T细胞的杀伤。为阻断肿瘤细胞的这种免疫逃逸,现采用重组表达的人PD-L1蛋白兔疫小鼠,制备抗PD-L1抗体,具体过程如图所示。回答下列问题:
(1)A细胞是采用重组表达的人PD-L1蛋白兔疫小鼠后,从小鼠的脾中得到的_____ 细胞。
(2)诱导A细胞与B细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和_____ 法等。
(3)用特定的_____ 培养基进行第1次筛选:在该培养基上,_____ 的细胞都会死亡,只有融合的_____ 细胞(即C细胞)才能生长。
(4)第2次筛选的目的是获得_____ 的细胞。
(5)扩大培养是指将第2次筛选出的细胞在体外用培养液培养,或注射到_____ 内增殖。
(6)抗PD-L1抗体注入体内后通过体液传送与_____ 结合,可阻断肿瘤细胞的免疫逃逸。
(1)A细胞是采用重组表达的人PD-L1蛋白兔疫小鼠后,从小鼠的脾中得到的
(2)诱导A细胞与B细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和
(3)用特定的
(4)第2次筛选的目的是获得
(5)扩大培养是指将第2次筛选出的细胞在体外用培养液培养,或注射到
(6)抗PD-L1抗体注入体内后通过体液传送与
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【推荐3】神经纤毛蛋白-1(NRP-1)能在肿瘤细胞内表达,是血管内皮生长因子家族成员的受体,通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。研究人员从肿瘤细胞中扩增出NRP-1基因并用其导入大肠杆菌体内进行培养,分离提纯相应NRP-1,并用其免疫小鼠,以制备抗NRP-1的单克隆抗体(NRP-1MAb)。
(1)利用PCR技术可以从肿瘤细胞的基因组中分离扩增得到完整的NRP-1基因,其原因是__________ 。
引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的__________ 。
(2)将扩增后的目的基因构建成表达载体后,导入用__________ 处理的大肠杆菌体内完成转化,最后可从大肠杆菌中分离提纯相应NRP-1。
(3)研究人员用NRP-1对小鼠进行免疫的目的是使小鼠的脾中得到定能生成能产生__________ 的B淋巴细胞。将小鼠脾中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用特定的选择培养基进行筛选,在该培养基上不能存活的是__________ 。
(1)利用PCR技术可以从肿瘤细胞的基因组中分离扩增得到完整的NRP-1基因,其原因是
引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的
(2)将扩增后的目的基因构建成表达载体后,导入用
(3)研究人员用NRP-1对小鼠进行免疫的目的是使小鼠的脾中得到定能生成能产生
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【推荐1】2017年11月~12月,中科院神经科学研究所研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。如图是体细胞克隆猴的技术流程,请据图回答问题:(1)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养,其原因是_____ 。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时,常利用______ 酶消化处理,制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。
(2)图示过程涉及的主要技术有_______ (答出两点即可)。以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同,图中克隆猴的遗传物质主要来自________ 。
(3)图中步骤①是克隆猴的技术难点之一,需要将卵母细胞培养到______ 后进行去核操作;而后用物理或化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程。
(4)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现,胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测,图中KDM4dmRNA翻译产生的酶的作用是_____ 。
(2)图示过程涉及的主要技术有
(3)图中步骤①是克隆猴的技术难点之一,需要将卵母细胞培养到
(4)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现,胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测,图中KDM4dmRNA翻译产生的酶的作用是
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【推荐2】利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程,请回答下列问题:
(1)对1号猪使用____________ 处理,使其超数排卵,收集并选取处在____________ 时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号猪的组织块,用____________ 处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO2培养箱中培养,其中CO2的作用是____________ 。
(3)为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行____________ ,此操作过程应选择发育良好、形态正常的____________ 时期进行。产出的基因编辑猪的性染色体来自于____________ 号猪。
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有____________ (填序号)。
①DNA测序 ②染色体倍性分析
③体细胞结构分析 ④抗原抗体杂交
(1)对1号猪使用
(2)采集2号猪的组织块,用
(3)为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有
①DNA测序 ②染色体倍性分析
③体细胞结构分析 ④抗原抗体杂交
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【推荐3】细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:
(1)若a、b分别是基因型为Rr和m两个玉米品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂____________ 诱导融合,共可产生____________ 种基因型的融合细胞(仅考虑两两融合),
(2)若将d培育成植株,还需利用____________ 技术,依据的生物学原理____________ 。
(3)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后细胞需经过筛选,最终筛选后的所需细胞群应具备的特点是____________ 。
(4)对动物细胞进行培养时,通常在培养集中加入适量的______ 以补充合成培养基中缺乏的物质,为防止培养过程中发生污染还可以加入__________ 。
(1)若a、b分别是基因型为Rr和m两个玉米品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂
(2)若将d培育成植株,还需利用
(3)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后细胞需经过筛选,最终筛选后的所需细胞群应具备的特点是
(4)对动物细胞进行培养时,通常在培养集中加入适量的
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