【推荐1】去年年初，国内牛奶制品因为牧草进口成本上涨而涨价的现象引起了人们的关注。紫花苜蓿是一种重要的牧草，某研究团队拟将耐盐基因HLAl导入紫花苜蓿中培育耐盐牧草，具体实验流程如图甲，图乙是载体pCHLAl中T-DNA示意图。回答下列问题：

(1)过程②为________________，是基因工程的核心步骤，此过程需要使用的酶有________________。
(2)过程③常用的转化方法是农杆菌转化法，转化是________________。
(3)已知Basta是一种除草剂，则为达到培养并筛选的目的，过程④的培养基所含的成分必须含无机营养、有机营养、________________。
(4)过程④得到的幼苗________________（填“一定”或“一定不”或“不一定”）含有HLAl基因，为进一步确认，可用PCR扩增的方法进行鉴定，进行PCR反应所用到的引物应根据________________设计。
(5)要检测目的基因是否插入到苜蓿细胞的染色体DNA上，可采用___技术。
(6)判断本实验的目的基因是否表达成功，还应进行__________实验。

【推荐2】乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的神经系统疾病。乙型脑炎病毒是一种RNA病毒，其复制过程需要E蛋白参与。研究人员利用基因工程的方法构建了E蛋白疫苗，实验主要流程如图所示。回答下列问题：

(1)①过程遵循的碱基配对方式为______。若用特异性探针检测乙型脑炎病毒的RNA是否合成出DNA，该探针需要含有__________________序列。
(2)利用PCR技术扩增E蛋白基因时，所用的酶为__________________。PCR扩增过程中温度呈“升温→降温→升温”的周期性变化，其中“降温”的目的是______________________________。
(3)为了便于将含有E蛋白基因的细胞筛选出来，图中质粒通常含有______。
②过程中，含E蛋白基因的DNA片段和B质粒通常用相同的限制酶进行切割，其原因是____________。
(4)若图中受体细胞是大肠杆菌，将重组质粒导入大肠杆菌前，常用Ca²⁺处理大肠杆菌，其目的是___________________。与受体细胞为酵母菌相比，受体细胞为大肠杆菌时所形成的E蛋白结构不完全相同，原因是___________________________。

【推荐3】为了应对干旱和强降雨等灾害性天气，很多城市增设了雨水截流储存和利用的设施，如布设于道路周边或地势较低区域的生物滞留池。生物滞留池内土壤，植物和微生物等构成了小型生态系统。某城市道路生物滞留池内收集到的雨水含有高浓度污染物，其中的多环芳怪（PAHs）严重危害城市水环境。科研人员从解决污染问题和维护生态安全两方面考虑，在当地环境中筛选耐受菌，并通过转基因技术获得高效降解污染物的工程菌。回答下列问题：
(1)经检测发现，生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高。科研人员尝试筛选能降解芘的菌种。
①筛选能降解芘的菌种的基本操作步骤如下。请将下列“方框”内字母后面的内容补充完整：a_________；b________；c__________；d_________；e_________。

②在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到100kPa而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该进行的操作是_________。
③从对照区域和生物滞留池中分别培养出占比较高的菌属，结果如图1、图2所示。在两个区域中均能检测出的菌属有__________个，此结果能够说明滞留池土壤中_________出现了明显的变化。

④在另一个筛选对芘具有耐受性的菌株的实验中，分离得到四个菌属中的菌株，其生长曲线如图3所示。科研人员欲从中选择一个构建工程菌。结合图1、图2所示的结果，你认为应选择_________，理由是_________。

(2)科研人员将能高效降解芘的外源基因重组至所选受体菌的同时，还转入了含Lac启动子的核酸酶基因。在半乳糖苷分子的诱导下该启动子会被激活，表达的核酸酶会将自身遗传物质降解，进而发生菌体自毁。转人含Lac启动子的核酸酶基因在维护生态安全方面的意义是_________。
(3)试举一例说明人类在改造自然的过程中，可能会带来的生物安全隐患：__________。