【推荐1】华南虎是原产中国的老虎品种，已有近30年没有野生华南虎出现的报告，一些专家认为野生华南虎已经濒临灭绝。科学工作者尝试用普通老虎完成体细胞克隆华南虎的研究，如图是其培育过程。请据图回答下列问题：

   

(1)克隆华南虎的遗传性状与虎__________（填字母）基本一致。
(2)A、B、C3只虎没有提供遗传物质的是__________。
(3)为了让虎多排卵，可以向其注射__________激素。
(4)普通虎B的卵母细胞中的“核”其实是__________。
(5)有人设想将虎的体细胞与牛的体细胞进行融合，以获得新物种“虎—牛”，你认为依据目前的生物技术和理论能否实现这一愿望？__________。
(6)动物细胞特有的诱导融合的方法：__________。
(7)克隆华南虎的过程是否遵循孟德尔的遗传定律？__________。

【推荐2】乙型肝炎病毒感染引发的乙型肝炎（以下简称乙肝）是医学上难以攻克的疾病，其对人类的生活、学习和工作等造成较大的影响。请回答下列有关问题。
（1）医学上常用重组酵母菌表达的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）经纯化、灭活及加佐剂吸附后制成重组乙肝疫苗用于预防，这样的疫苗既安全又有效，其主要原因是_____________________________。重组酵母是通过_____工程培育成的，此项工程技术用到的工具酶有___________。
（2）为了治疗乙肝患者，科研人员利用经乙肝病毒感染后小鼠的_______细胞和瘤细胞进行杂交，然后进行两次筛选，从而获得单一品种抗体，第二次筛选的目的是___________，此抗体的主要优点是_________________。
（3）转氨酶存在于肝脏细胞中，在肝功能检查时，血液中转氨酶常作为诊断肝炎的一个重要参考指标，这主要是由于肝脏是蛋白质代谢的重要器官，肝脏发生病变时，___________，肝细胞中的转氨酶会大量进入血液，使血液中转氨酶的量增加。

【推荐3】如图为某生物工程操作流程模式图，请据图回答下列问题：

（1）若该图表示植物体细胞杂交，①过程须先利用_______去除细胞壁，并用_______（诱导剂名称）诱导，所获得的C的名称是_________，②过程所用培养基中除一定营养物质外，还需要添加________，以获得新的植株。
（2）若该图表示单克隆抗体的制备，A代表注射特定抗原后的淋巴细胞，B代表_________。用特定的选择性培养基进行筛选后，保留下的C具有的特点是_________________________。
（3）若此图表示良种母牛的胚胎分割移植，①过程要用______对良种母牛进行超数排卵处理，还要对供体和受体进行________处理。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意_______，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）苯酚是一种常见的工业污染物，具有致癌、致畸和致突变作用。某环保公司从污泥中分离得到了苯酚降解菌，用于处理含酚废水。
(1)为了获得能降解苯酚的菌株，可利用某培养基（成分为KH₂PO₄2．25g/L、K₂HPO₄2．75g/L、（NH₄）₂SO₄1．0g/L、MgCl₂0．2g/L、NaCl 0．1g/L、FeCl₃ 0．02g/L、CaCl₂ 0．01g/L）配制富集培养基。配制时，必须在以上培养基中添加______成分。在使用高压蒸汽灭菌锅对该培养基灭菌时，若压力已达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是______。
(2)将污泥样液接种在以上富集培养基中，培养一段时间后进行涂布分离，涂布分离过程无需使用的器具是______。

A．

B．

C．

D．

(3)经过培养后，在平板上长出一些形态、大小和颜色不完全相同的菌落，这说明______。对分离的菌株进一步诱变、______和鉴定，从而获得能高效降解苯酚的菌株。
(4)实际应用中，采用活性炭、海藻酸钠、饱和硼酸（一种交联剂）等对高效降解苯酚的菌株进行______处理，有效降低了成本。用比色计测定经过处理过的含酚废水，______越小，表明处理效果越好。
（二）某种植物甲能抗真菌病，其抗性是由细胞内基因A决定的。利用基因工程将甲的基因A转移到乙种植物体内，可提高乙抗真菌病的能力。
(5)获取未知序列的基因A。利用已获得的纯度高的抗真菌病蛋白作为抗原，可制取特异性探针，将植物甲______中所有基因进行表达后，可利用该探针通过______技术找到相应的表达产物，进而获得基因A。
(6)借助农杆菌可将基因A转移到乙植物。将基因A插入到Ti质粒的T-DNA中，取经CaCl₂处理过的农杆菌与该重组质粒在离心管内进行混合等操作，以完成______实验，随后将离心管置于摇床培养并注意降低______，以利于农杆菌恢复状态。取田间的植物乙，首先进行______，经培养获得愈伤组织，再用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织，将愈伤组织转移到含有适当配比的______的培养基中继续诱导形成芽和根后，再转入含有抗生素的培养基中进行培养用以______，最终获得再生植株。
(7)除上述方法外，还可以获得甲、乙的原生质体，并用聚乙二醇等介导促进细胞融合，利用杂种细胞培育杂种抗真菌病新品种。杂种细胞形成的标志是______。

【推荐2】回答下列（一）（二）小题。
（一）枯草杆菌广泛分布于土壤及腐败的有机物中，某工厂为生产耐高温的淀粉酶，开展了枯草杆菌菌株的筛选、酶的固定化分析研究，其流程如图所示：

（1）配制培养基：该培养基应以___________为唯一碳源。
（2）取土样加入盛有无菌水的三角瓶中，常压加热至水沸腾后维持20分钟，其目的是___________，取出三角瓶置于37℃培养24小时，液面产生黄白色皮膜，用接种环挑取菌膜，用___________法接种到平板上，于37℃恒温箱中培养24小时，取出观察，若淀粉被水解，菌落周围会产生___________，选择优良的菌株进行扩大培养。
（3）在建立和优化淀粉酶固定化酶柱连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的___________（答出2点即可）、反应pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过___________来调节。
（4）固定化酶柱在使用后，需用___________洗涤，放置于4℃冰箱中。
（二）高温胁迫是影响植物生长发育的重要因素之一，高温逆境会使番茄的生长发育受到限制，转入codA基因的番茄对高温的耐 受性大于野生型番茄。

注:图中限制性核酸内切酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同
（1）如图为质粒限制性核酸内切酶酶切图谱。codA基因不含图中限制性核酸内切酶识别序列。为使PCR技术扩增的codA基因能重组进该质粒，扩增的codA基因两端需分别引入___________和___________不同限制性核酸内切酶的识别序列。
（2）制备番茄的原生质体时，在___________环境下用酶解法处理番茄的根尖、叶片等细胞。
（3）导入目的基因的番茄细胞经___________形成愈伤组织，通过调节___________，可以从这种愈伤组织诱导出芽和根的顶端分生组织，由此再生出新的植株。
（4）番茄的培养细胞在长期培养中，其胚胎发生和器官形成能力下降，可能原因有___________（写出2点即可）。
（5）种植业和畜牧业是人类食物生产系统的两大支柱，两者结合的优化设计需要按照___________规律进行综合优化，使系统从总体上获得最佳的经济效益、生态效益和社会效益。

【推荐3】细胞融合又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞融合形成单个细胞的过程。下图为细胞融合的一般过程，请据图回答：

（1）若A、B为植物细胞，在细胞融合之前已用__________（物质）处理，除去了细胞壁；A、B到C的过程中，常用的物理方法是_____________（至少写两个）。形成的D细胞还要应用_______技术把D培养成植株。
（2） 若A、B是动物细胞，一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，然后用_______酶处理使其分散开来；从A、B到C的过程中，常用的诱导剂是____。
（3）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了________；图中B为_____________________。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为克隆，这种细胞的特点是___________________________________。
（4）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有_____种（只考虑两个细胞的相互融合）；用来培养的D细胞应该是_________，获得D后，常用的培养方法在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

【推荐1】研究人员为了制备烟草（四倍体，4n=48）的叶片细胞与紫罗兰（二倍体，2n=14）的紫色花瓣细胞的原生质体，并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株，进行了如下实验：
一、原生质体的制备：酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号                  项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	0	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0．5	0．5	0．5
果胶酶液（mL）	0	0	0	0．5	0	0
蜗牛酶液（mL）	0	0	0	0	0．5	0
纤维素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0．5
实验结果（绿色深浅程度）	一	一	—	++＋	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）。
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是_____________________________，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有_________等多种酶。该实验中____________是空白对照组，其设置意义是___________________。
（3）如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验，其检验的方法可以是_________________________________________________________________________。
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液：
三、原生质体融合：将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后，离心10min，将分离得到的融合成团的，原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后，凝固形成很薄的平板。．再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析：
（4）步骤三中，若所有的原生质体均两两融合，则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是____________________________。
（5）只利用显微镜观察，不借助其他手段_________（能，不能）鉴别出杂种融合的原生质体，你所依据的观察现象是____________________________。
四、制取紫罗兰烟草的人工种子：
（6）制备人工种子时，用人工薄膜包裹__________若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株，杂种植株为___________倍体。

【推荐2】紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，某位分子药理学家发现紫杉醇的抗癌机理；紫杉醇能和微管蛋白聚合体相互作用，促进微管聚合并使之稳定，从而阻碍了肿瘤细胞的分裂，直至死亡。该药用于治疗对常规化疗无效的卵巢癌和乳腺癌。研究发现，紫杉醇对多种癌症都有一定的疗效。利用植物组织培养和细胞培养的方法来生产紫杉醇及其合成前体是扩大紫杉醇来源的重要途径。下面是两条技术路线思路；
A.扩大红豆杉栽培使用，保护野生红豆杉物种资源。

B.利用离体培养的红豆杉细胞生产紫杉醇。

(1)A路线利用的原理是___。A图中②表示___，b过程表示___。
(2)A、B路线中所用外植体最好取春季新长出的茎叶，接种前常用___对外植体进行消毒。
(3)某中学生物兴趣小组用新鲜幼嫩茎的一部分作为材料进行组织培养，在外植体插入的培养基上，愈伤组织能正常形成且继续长大，根和芽却迟迟不能形成；你面对这样的问题，紧接着的操作是将愈伤组织转接到___上，长出芽后，再转接到___上，最终培养出试管苗。
(4)B路线中，为了筛选出高产紫杉醇细胞，研究者采用诱变的方法处理愈伤组织。他们选愈伤组织作为处理材料的原因是______。在悬浮培养过程中，即使营养条件充足，红豆杉细胞悬浮培养一段时间，就会停止增殖。结合紫杉醇的作用，分析其原因可能是___ ，所以需要不断更换培养液继代培养。

【推荐3】穗花杉是我国保护植物，现存数量较少。穗花杉双黄酮具有抗炎、抗肿瘤、清除自由基、保护神经、舒张血管等功能，如图是某科研小组利用植物细胞工程来生产穗花杉双黄酮的主要过程，回答下列问题：

(1)图示过程______（填“能”或“不能”）体现细胞的全能性。
(2)过程①表示______，该过程需要在______等条件的诱导下才能实现；③过程中应用到______技术手段实现了细胞数量的增多，从而获得大量的穗花杉双黄酮。
(3)图示过程中，之所以选择穗花杉的幼嫩茎作为外植体，主要是因为______。
(4)与从穗花杉植株中提取穗花杉双黄酮这一传统方式相比，通过植物细胞工程生产穗花杉双黄酮的优势有______（至少答出两点）