秀丽隐杆线虫的fat-1基因,编码ω-3PUFAs脱氢酶,能将ω-6PUFAs转化为ω-3PUFAs。人类食物中的ω-3PUFAs是极度缺乏的,若提升食物中的ω-3PUFAs比例,对健康更有利。本研究试图通过转基因技术将fat-1基因转入绵羊的基因组,再用动物克隆技术创造能产生ω-3PUFAs的转基因绵羊,生产具有保健功能的羊肉,技术流程如图所示。回答下列问题:
(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是____________ ,应用____________ 法将fat-1基因导入绵羊胎儿成纤维细胞。
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过____________ 的方法,为细胞提供无毒的环境,并将细胞置于含有____________ 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有____________ 且形态良好的卵母细胞进行去核处理,再将供体细胞注入去核的卵母细胞中,通过____________ 法使两细胞融合,形成重构胚。
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行____________ 处理,可通过____________ 技术检测fat-1基因是否成功表达。
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(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行
更新时间:2023-07-25 15:08:50
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【推荐1】二倍体哺乳动物体细胞不易进行基因操作和筛选,而生殖细胞已高度分化,不能在体外扩增培养。我国科学家建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞系,为基因操作找到了新的动物模型(过程如下图所示),请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/26/41f8d161-8cd7-4c2e-8903-576bd516e459.png?resizew=496)
(1)单倍体胚胎干细胞取自囊胚的____________ 细胞,图中③过程通常采用的方法是__________________________ 。
(2)④过程采用的技术手段是__________________ 。由此可见,单倍体胚胎干细胞能够代替精子,使卵细胞成功“受精“,支撑小鼠胚胎的全程发育。
(3)进行⑥过程时,需选择发育到________________ 阶段的胚胎进行移植,在移植前需要对受体动物进行_________________ ,早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础是___________________________________________ 。
(4)为增加后代的数量可以通过_________________ 技术对胚胎进行处理。
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(1)单倍体胚胎干细胞取自囊胚的
(2)④过程采用的技术手段是
(3)进行⑥过程时,需选择发育到
(4)为增加后代的数量可以通过
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【推荐2】烟青虫是一种对烟草危害极大的昆虫,现要将一段抗烟青虫基因通过农杆菌转入烟草细胞,再通过组织培养技术得到抗烟青虫的转基因烟草。
(1)在构建表达载体的过程中,要先用两种不同的______ 分别切割目的基因和
质粒,原因是防止,质粒自身环化,并保证______ 之后用
连接酶连接形成______
(2)在以上重组质粒中,目的基因和抗卡那霉素抗性基因,都应该位于
质粒的______ 片段内,原因是______
(3)用______ 处理农杆菌,可使重组的
质粒更容易转入农杆菌,然后将得到的农杆菌和烟草细胞愈伤组织共同培养一段时间后,将愈伤组织置于含有______ (抗生素)的培养基上进行组织培养,通过调整______ (植物激素)的比例使其脱分化、再分化形成转基因植株,再用烟青虫进行进一步选择。
(1)在构建表达载体的过程中,要先用两种不同的
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(2)在以上重组质粒中,目的基因和抗卡那霉素抗性基因,都应该位于
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(3)用
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【推荐3】苎麻纤维被普遍应用于纺织和造纸行业,但其中含有的胶质必须被去除;与传统的高温碱煮相比,芽孢杆菌产生的碱性果胶酶用于苎麻脱胶具有降低能耗和化学污染的优势,因此获得高表达的碱性果胶酶基因工程菌,低成本生产碱性果胶酶对于纺织工业节能减排具有重要的意义。请回答下列问题:
(1)芽孢杆菌在产生碱性果胶酶的同时会分泌出对纤维有害的内源性纤维素酶,因此将碱性果胶酶基因pel转入毕赤酵母中表达,该过程需要___________ (工具酶)和载体,作为载体必须具备能够在宿主细胞内复制并稳定保存,以及_________________ (至少答出两点)等条件。
(2)构建的基因表达载体应含有毕赤酵母的启动子作为_____________ 酶识别和结合的部位,从而启动目的基因的表达;同时还应含有标记基因,其作用是________________ 。
(3)将基因表达载体导入毕赤酵母时,用________________ 处理,使其处于感受态。
(4)目的基因在受体细胞是否能翻译出蛋白质,可用______________ 技术来检测。也可将导入目的基因的毕赤酵母接种于果胶底物平板上28℃培养, 2–3 d 后观察结果如下图(A为刚接种时,B为培养2–3d后),水解圈越大代表______________________ 。
(1)芽孢杆菌在产生碱性果胶酶的同时会分泌出对纤维有害的内源性纤维素酶,因此将碱性果胶酶基因pel转入毕赤酵母中表达,该过程需要
(2)构建的基因表达载体应含有毕赤酵母的启动子作为
(3)将基因表达载体导入毕赤酵母时,用
(4)目的基因在受体细胞是否能翻译出蛋白质,可用
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【推荐1】下图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图,图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/1/2690210455904256/2690413218095104/STEM/85ebfecb-0f8f-427b-bc5c-6b3af0b663fe.png?resizew=565)
(1)图一所示,制备细胞悬液时,常用__________ 酶来消化剪碎的组织块。配制培养液时,通常需要在合成培养基的基础上添加__________ 等一些天然成分。当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂,这种现象称为细胞的__________ 。
(2)ES细胞是由______ 中分离出来的一类细胞,ES细胞在功能上具有发育的_______ 。
(3)在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是______________________ 。
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(1)图一所示,制备细胞悬液时,常用
(2)ES细胞是由
(3)在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是
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【推荐2】阅读如下材料:
资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题:
(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用_____________ 法。在培育有些转基因植物时,除了常用的农杆菌转化法,还有一种十分简便经济的方法是_________ 法。
(2)资料乙中所采用的技术属于_________ 工程范畴。
(3)资料丙属于_________ 工程的范畴。兔乙应与兔甲是同种的、_________ 的母兔,胚胎移植能成功的生理学基础是早期胚胎未与母体建立联系,处于_________ 状态。
(4)在体外进行早期胚胎细胞培养时,为了达到无菌无毒的目的,需要加入_______________ ;需要定期更换培养液,防止有害的细胞_________ 积累对细胞自身造成危害。
资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题:
(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用
(2)资料乙中所采用的技术属于
(3)资料丙属于
(4)在体外进行早期胚胎细胞培养时,为了达到无菌无毒的目的,需要加入
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【推荐3】干细胞的培养成功是动物细胞培养领域重要的成就之一。科学家将四种“关键基因”(Oct3/4、Sox2、KIf4、c-Myc)通过逆转录病毒导入到小鼠的成纤维细胞中,然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞,2-3周后,这些细胞显示出ES细胞的形态,具有活跃的分裂能力,它们就是iPS细胞。请回答下列问题:
(1)根据来源,干细胞可分为____ 和_____ 等,其中前者不具有发育成完整个体的能力。
(2)培养成纤维细胞时采用培养皿或______ 培养,并需将其置于____ 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(3)若将病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞,再使它转化为需要的细胞,用这些细胞给病人治病,_____ (填“会”或“不会”)产生免疫排斥反应,原因是______ 。
(1)根据来源,干细胞可分为
(2)培养成纤维细胞时采用培养皿或
(3)若将病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞,再使它转化为需要的细胞,用这些细胞给病人治病,
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【推荐1】报20215报道,青岛业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞,将该细胞的细胞核移入中华田园猫卵子,经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中,经过62天孕育,成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题:
(1)从成年雌性森林猫皮肤组织中分离成纤维细胞,需在皮肤组织中添加___________ 酶。作为细胞核受体的卵子应是___________ ,用显微注射法将供体细胞核导入该细胞后形成重组细胞,由此培育成的森林猫体细胞克隆后代的性别是___________________ 。哺乳动物体细胞核移植的难度大于胚胎细胞核移植,原因是______________________ 。
(2)猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热,该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫(特别是幼龄猫)的一种发热性高度接触性、致死性传染病,而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图,若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞,则乙细胞为已免疫小鼠的______________________ 。与植物细胞融合相比,图示甲、乙细胞融合的过程中特有的诱导剂是___________ 。
①②筛选的目的分别是______________________ 。
(1)从成年雌性森林猫皮肤组织中分离成纤维细胞,需在皮肤组织中添加
(2)猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热,该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫(特别是幼龄猫)的一种发热性高度接触性、致死性传染病,而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图,若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞,则乙细胞为已免疫小鼠的
①②筛选的目的分别是
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【推荐2】科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其主要技术流程如图,请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/22/2490012953419776/2490642727272448/STEM/8bc5a13a-4a8a-4730-8856-a75ae705ee1b.png)
(1)在获取上皮细胞悬浮液的时候,通常要用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理组织,原因是___________________________________________________________________ 。
(2)步骤①应先对卵母细胞进行______ 处理。由图可知,步骤②要分离出ES细胞,需将重组胚胎培养到_____________ 期。
(3)步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞,是因为ES细胞___________ 。该过程需要先利用_______ 技术扩增干扰素基因,其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成_____________ 。
(4)步骤④将ES细胞诱导分化成造血干细胞而不是其他细胞,其原因是_______________ 。
(5)为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达,可以采用抗原——抗体杂交技术,其原理是____________________________________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/22/2490012953419776/2490642727272448/STEM/8bc5a13a-4a8a-4730-8856-a75ae705ee1b.png)
(1)在获取上皮细胞悬浮液的时候,通常要用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理组织,原因是
(2)步骤①应先对卵母细胞进行
(3)步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞,是因为ES细胞
(4)步骤④将ES细胞诱导分化成造血干细胞而不是其他细胞,其原因是
(5)为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达,可以采用抗原——抗体杂交技术,其原理是
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【推荐3】下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/2/12/2397646611382272/2397972686159872/STEM/88eb2a39d01b4b4d877cb0e781fa6f9a.png?resizew=460)
回答下列问题:
(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为______ 。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用______ 的方法。②代表的过程是______ 。
(2)经过多次传代后,供体细胞中______ 的稳定性会降低,因此,选材时必须关注传代次数。
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是__________________ 。
(4)在胚胎移植时,首先要对______ 进行选择和处理,胚胎移植后,要对受体进行是否______ 的检查。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/2/12/2397646611382272/2397972686159872/STEM/88eb2a39d01b4b4d877cb0e781fa6f9a.png?resizew=460)
回答下列问题:
(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为
(2)经过多次传代后,供体细胞中
(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是
(4)在胚胎移植时,首先要对
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【推荐1】下图为牛胚胎性别鉴定和分割示意图,请据图回答问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2010/5/31/1561454045593600/1561454048313344/STEM/5362260029db49e0a976247ce627d46e.png?resizew=444)
(1)回答A、B、C、D所代表结构的有关问题:
①从胚胎移植的生理学基础角度看,B的存在使哺乳动物的_____ 在一定时间内,不会与____ 建立组织上的联系,而是处于游离状态,这就为______ 提供了可能。
②囊胚孵化后,再进一步发育,D表层的细胞形成原肠胚的________ ,下方的细胞形成原肠胚的________ ,由________ 包围的囊腔叫原肠腔。C则发育成胎儿的_________ 。
(2)回答甲、乙、丙所代表技术的有关问题:
①进行甲过程时,应选择发育良好、形态正常的_______ 或_______ ;如果选择了图中所示的早期胚胎,那么技术关键是_____________________ 。
②乙技术所取的样本是________ ;此外,在性别控制方面,具有应用价值的两项技术是________ 和_________ ,它们的原理分别是______________ 和PCR技术原理及______________ 。
③进行丙过程时,可以将半个胚胎注入预先准备好的_________ 中,或直接将裸半胚植入受体。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2010/5/31/1561454045593600/1561454048313344/STEM/5362260029db49e0a976247ce627d46e.png?resizew=444)
(1)回答A、B、C、D所代表结构的有关问题:
①从胚胎移植的生理学基础角度看,B的存在使哺乳动物的
②囊胚孵化后,再进一步发育,D表层的细胞形成原肠胚的
(2)回答甲、乙、丙所代表技术的有关问题:
①进行甲过程时,应选择发育良好、形态正常的
②乙技术所取的样本是
③进行丙过程时,可以将半个胚胎注入预先准备好的
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【推荐2】如图为纯种荷斯坦小奶牛的培育过程,请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/3/6/2154517782085632/2156067740131328/STEM/c1c5dd37639043f1a0371d10f7b43f49.png?resizew=494)
(1)从供体母牛体内获取的卵母细胞,一般要在体外培养到____________ (时期)才能参与受精,从良种公牛体内获取的精子要经过__________ 处理才能受精。
(2)体内受精和操作A的区别之一是场所不同,体内受精的场所是________ 。早期胚胎培养所需的培养液中除了有水、无机盐、维生素、_______________ 、核苷酸外,还需加入______ 。
(3)操作B是胚胎移植,移植前要对受体母牛进行____________ 处理,胚胎能在受体母牛的子宫中成活,是因为______________________________________________ 。胚胎移植到受体母牛的子宫后,其遗传特性____________ (填“会”或“不会”)在孕育过程中受到影响。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/3/6/2154517782085632/2156067740131328/STEM/c1c5dd37639043f1a0371d10f7b43f49.png?resizew=494)
(1)从供体母牛体内获取的卵母细胞,一般要在体外培养到
(2)体内受精和操作A的区别之一是场所不同,体内受精的场所是
(3)操作B是胚胎移植,移植前要对受体母牛进行
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