某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体,以快速检测该病毒,其主要过程如图所示。回答下列问题:(1)图中已免疫的脾细胞是指_________ 细胞。与正常细胞比较,骨髓瘤细胞具有的特点有_________ 。
(2)诱导动物细胞融合的常用方法有_________ 和灭活病毒诱导法等。灭活病毒诱导细胞融合的原理是_________ 。
(3)在杂交瘤细胞筛选过程中,常使用特定的选择培养基(如HAT培养基),其目的是___________ 。筛选得到符合要求的杂交瘤细胞应具有的特点包括_________ 。
(4)单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异,除了可以作为检测的诊断试剂外,还可应用于_________ 。
(2)诱导动物细胞融合的常用方法有
(3)在杂交瘤细胞筛选过程中,常使用特定的选择培养基(如HAT培养基),其目的是
(4)单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异,除了可以作为检测的诊断试剂外,还可应用于
更新时间:2024-05-02 11:01:20
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【知识点】 动物细胞融合与单克隆抗体的制备解读
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【推荐1】研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种癌细胞特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为治疗乳腺癌有效的生物制剂。
(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量________ (填低或高)。H蛋白是一种跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠所需H蛋白(抗原)时,应构建________ 区基因,转入受体细胞表达并提纯。
(2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤,复性(55~60 ℃)时__________________________ 碱基互补配对。设计引物是PCR技术的关键之一,某同学设计的两对引物如下表所示,其中引物对________ (填A或B)设计不合理。
(3)制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内,这样做的目的是使小鼠体内产生_________________________________ 。
(4)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可以将__________________________ 结合制成“生物导弹”,杀死癌细胞。
(1)H蛋白在成年个体的正常组织中表达量
(2)为扩增出大量目的基因需用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、复性、延伸等步骤,复性(55~60 ℃)时
引物对A | P1 GTCCGCTAGTGGCTGTG P2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG |
引物对B | S1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA S2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG |
(3)制备抗H蛋白单克隆抗体时,需将H蛋白注射到小鼠体内,这样做的目的是使小鼠体内产生
(4)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可以将
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【推荐2】人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体,科研人员进行相关研究。请回答:
(1)科研人员以Myo作为抗原获得免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与____________ 细胞经灭活的仙台病毒诱导融合。该过程的原理是病毒表面含有糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的______________ 分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
(2)用特定的____________ 培养基筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。将得到的细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作,多次重复该过程的目的是筛选获得______________ 的杂交瘤细胞。
(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别人肌红蛋白(Myo),其原因是该抗体具有___________ 等特性。
(1)科研人员以Myo作为抗原获得免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与
(2)用特定的
(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别人肌红蛋白(Myo),其原因是该抗体具有
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【推荐3】目前现代生物技术迅速发展并被广泛应用于医疗卫生领域,如生物制药、生物治疗、器官移植等。请回答下列问题:
(1)癌症的靶向治疗需要首先制备“制导”分子——单克隆抗体。单克隆抗体比从血清中分离的抗体纯度高,特异性强,原因是______ 。人鼠嵌合单克隆抗体是把鼠源性抗体的一部分和人源性抗体的一部分进行嵌合,使得产生的抗体既能保持识别特定抗原的能力,又降低了人体的免疫排异反应。生产人-鼠嵌合单克隆抗体需要对____ (“人和鼠的抗体”、“人和鼠抗体的mRNA”、“人和鼠抗体的基因”)进行改造。细胞融合技术的优点是____ 。
(2)干扰素基因比较小,____ 已知,在基因工程制药的过程中可以通过DNA合成仪用化学方法合成。由于化学合成的DNA片段一般都很短,所以需要用____ 酶将小片段连接起来,从而获得所需长度的目的基因。DNA合成仪还可以合成PCR技术中所用的____ 。
(3)为解决肾源不足和免疫排异问题,可将病人的核移植胚胎干细胞诱导分化,形成肾脏后自体移植,该过程______ (“体现了”、“没有体现”)胚胎干细胞的全能性。
(1)癌症的靶向治疗需要首先制备“制导”分子——单克隆抗体。单克隆抗体比从血清中分离的抗体纯度高,特异性强,原因是
(2)干扰素基因比较小,
(3)为解决肾源不足和免疫排异问题,可将病人的核移植胚胎干细胞诱导分化,形成肾脏后自体移植,该过程
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