【推荐1】奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。
   
(1)构建基因表达载体时要用到的工具酶是__________。图1中新青霉素抗性基因的作用是作为标记基因以便_________。
(2)研究者根据乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因设计引物，对乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA分子进行PCR，结果如下表：

PCR结果	乳腺细胞	口腔上皮细胞	蹄部细胞
乳铁蛋白肽基因引物	有PCR产物	无PCR产物	无PCR产物
人干扰素基因引物	有PCR产物	有PCR产物	有PCR产物

结果说明：牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的_________细胞中表达，人干扰素基因则可在转基因奶牛的_________细胞中表达，这与构建表达载体时__________的选择有关。
(3)该技术__________（填需要或不需要）对重组胚胎性别进行鉴定，理由是：__________。

【推荐2】以下是有关现代生物科技的两个问题。请回答：
I.下而是与动物细胞工程有关的问题，请分析回答：
(1)在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用___处理，以使其分散成单个细胞，制成细胞悬液。
(2)气体环憧中CO₂的作用是_________。
(3)应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞.原因是10代以后细胞可能发生___________。
(4)单克隆抗体与常规抗体相比，具有________的特点。
II.转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示，图中I.、I、EcoRI、ApaI等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切点。

(1)若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaI对图中对应的位点进行切割?_______。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstI、 ApaI限制酶切割质粒?_________。
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞，由此推断重组质粒中应含有___基因。作为标记基因。
(3)②、③阶段是否可使用同种培养基?_______ 。

【推荐3】水稻的雄性不育植株是野生型水稻的隐性突变体（正常基因M突变为m）。雄性不育植株不能产生可育花粉，但能产生正常雌配子。
(1)水稻的花为两性花，自花授粉并结种子。在杂交育种时，雄性不育植株的优点是无需进行_____________，大大减轻了杂交操作的工作量。
(2)我国科研人员将紧密连接的，且不与其它基因发生交换的三个基因M、P和R（P是与花粉代谢有关的基因，R为红色荧光蛋白基因）成功转入雄性不育水稻植株的一条染色体DNA中，获得转基因植株，如下图所示。

向雄性不育植株转入M基因的目的是让转基因植株_____________。转基因植株自交后代中，雄性不育植株为_____________荧光植株，由无荧光植株和红色荧光植株的性状分离比为_____________，分析P基因的功能是_____________。
(3)雄性不育植株不能通过自交将雄性不育的特性传递给它的子代，而育种工作者构建出的转基因植株的特点是_______________________________________。

【推荐1】如图是克隆猴的培育过程。回答下列问题：

   

(1)常用______法去除猴B卵母细胞的细胞核，选择卵母细胞培育克隆猴的原因是______（答出两点）。
(2)将猴A胚胎成纤维细胞核移入猴B去核卵母细胞的技术称为______。早期胚胎通常要发育到______期才能进行胚胎移植。科研人员欲由细胞M发育成的早期胚胎得到多个基因相同的克隆猴，可采取______技术。
(3)体细胞与受精卵相比，细胞核中的DNA基本相同，但表观遗传修饰不同，因此基因表达也有所差异，于是体细胞细胞核转移入去核卵母细胞后，无法正常“指挥”生长发育过程。研究人员将组蛋白去甲基化酶的mRNA注入了图中M细胞，可使胚胎的发育率和妊娠率提高，推测原因是______。
(4)与克隆猴不同，试管猴的培育属于______（填“有性生殖”或“无性生殖”），试管猴的培育需要经过______技术获得受精卵，待受精卵发育至一定时期在进行胚胎移植。

【推荐2】我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：

(1)卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程，该过程存在基因的选择性表达。
(2)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外还可以采用____________、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到__________阶段才能进行胚胎移植。
(3)不考虑致死情况，得到的孤雌小鼠性染色体组成为XX，孤雄小鼠性染色体组成为___________。
(4)在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割  ，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是___________________。

【推荐3】如图为多莉羊克隆过程，请回答下列问题：

（1）图中乳腺细胞在核移植前要进行特殊处理，如调节培养基中________的浓度，以利于细胞核的一系列变化和细胞融合后基因表达的分子开关启动；核移植时需要借助精密的显微操作仪和高效率的______法，得到重建的合子。重建的合子通过_________培养得到8细胞胚。下列关于重建合子到8细胞胚的过程中说法正确的是____________（A.细胞开始分化             B.每个细胞的体积变小             C.2细胞胚体积比8细胞胚小             D.2细胞胚到8细胞胚有机物总量增多），然后移植到经___________排卵但未经配种的苏格兰代孕黑面母羊子宫内，最后得到克隆羊多莉。
（2）多莉采用了上述技术路线，一般认为这种生殖（繁殖）方式是__________。克隆羊多莉引起世界轰动的原因之一是___________细胞核的移植成功率远高于成体细胞。

【推荐1】人血清白蛋白（HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，具有重要的医用价值。下图是通过基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。回答下列问题：

（1）为获取HSA基因，首先提取人血细胞中的mRNA，利用_______________法合成总cDNA。再利用_______________技术扩增HSA基因，该技术所用到的关键酶是_______________，扩增得到的HSA基因_______________（填“含有”或“不含有”）启动子。
（2）HSA基因导入受体细胞前，需要实施基因工程的核心步骤：_______________。
（3）途径Ⅱ选用大肠杆菌作为受体细胞具有繁殖快、遗传物质少等优点。但相比于途径1，利用大肠杆菌获得的rHSA存在无活性的缺点，试从细胞结构的角度进行分析_______________。

【推荐2】新型冠状病毒在世界范围内   传播已有一段时间，各国在防止病毒传播、扩散的同时，都在努力加快疫苗研发进度；到目前为止，已有部分疫苗进入临床使用阶段。下图是部分疫苗制备的流程，结合图回答有关问题。

(1)灭活疫苗方案具有技术方案简单、成熟度高、研发快速的优点，但作用效果低，即在体外培养新冠病毒，经过灭活减毒处理后注入人体刺激其产生________。
(2)若制备腺病毒载体新冠病毒疫苗，首先需要在______作用下，以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录获得DNA；此外，还需要______ 酶参与，才能制备重组的腺病毒，该步骤在基因工程中被称为______；
(3)核酸疫苗，也称基因疫苗，是指将含有编码的蛋白基因序列的质粒载体导入宿主体内，通过宿主细胞表达抗原蛋白，诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗制备更加简易，更加安全，使用更加方便。下面是制作关于2019-nCoV的RNA疫苗的简化过程：扩增该病毒的某种基因→插入病毒复制子中→病毒自我复制并提取mRNA→混入载体（如脂质体）中。而DNA疫苗的制备方法为将2019-nCoV的基因插入基因表达载体，并提取质粒使用。在扩增该病毒的某种基因时，可用 _______（请写完整中文名称）技术，扩增时的三个阶段分别变性，复性和________；扩增时需加入引物，如扩增n次，则需要引物 _____个；引物不宜过短的原因是 __________。
(4)新冠疫苗制备后，经过一段时间后，可能会起不到良好的预防作用，原因是____。

【推荐3】青蒿素是最有效的抗疟疾药物，由野生黄花蒿产生。
研究Ⅰ：野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms基因和如tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织，改造过程用到的部分结构如图。

（1）图中结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P的作用是_____________。在获得转基因的冠瘿组织过程中，构建基因表达载体是核心步骤，在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体进行切割，这样做的好处是_____________。
（2）T-DNA的作用是可以使自的基因进入植物细胞，并插入到植物细胞中染色体的DNA上，要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用_____________技术。
（3）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是_____________。
研究Ⅱ：为研究IAA、BL对野生黄花蒿植株侧根生长情况的影响，现将相似的野生黄花蒿均分成若干组，在含有不同浓度的IAA，并且含有或者不含有1nmol/L BL的琼脂粉培养基上垂直生长8天，计算每厘米初生根上侧根的数目，实验结果见图。

IAA浓度（nmol/L）
据图分析：激素组成是_____________的一组其侧根数目作为计算百分比的标准（100%）。IAA浓度为0时，BL对侧根的发育表现为______。IAA对侧根的发育表现为_____________。在5-20nmol/L浓度范围内IAA和BL彼此间表现_____________作用。