人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,人工制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。回答下列问题。
(1)制备单克隆抗体过程中要用到___________ 和___________ 技术。制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于___________ ,使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
(2)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤___________ (填“能”或“不能”)能筛选杂交瘤细胞,原因是_____________________________________________________________________________ 。
(3)筛选获得的杂交瘤细胞具有______________________ 的特点。利用杂交瘤细胞生产的单克隆抗体可以与___________ 特异性结合,从而诊断早孕。
(1)制备单克隆抗体过程中要用到
(2)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤
(3)筛选获得的杂交瘤细胞具有
更新时间:2018-01-01 10:31:09
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【知识点】 动物细胞融合与单克隆抗体的制备解读
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【推荐1】下图为单克隆抗体制备流程示意图。请回答下列问题:
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(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有___________ 、____________ 。
(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是______________________ ,在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐、氨基酸等营养物质外,还需加入_____________________ 等天然成分,以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1mL细胞稀释液。其目的是_______________________ 。
(4)在细胞内DNA的合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA。而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的_______________________ 具有筛选杂交瘤细胞的作用。选育出产生高特异性抗体的细胞所依据的基本原理是__________________________________________________________ 。
(5)与一般的血清抗体相比,单克隆抗体的优点是_________________________________________ 。
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(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1mL细胞稀释液。其目的是
(4)在细胞内DNA的合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA。而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的
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【推荐2】德尔塔变异株是目前新冠肺炎传播的主要变异株。新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎,如图是SARS-CoVS蛋白特异性单克隆抗体的制备过程。研究该过程可为治疗新冠带来新希望。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/22/2963697881595904/2968126714683392/STEM/89c79607ed7844c287746a34aed5dcb7.png?resizew=650)
(1)若只考虑细胞两两融合,图中甲理论上有_____ 种。
(2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠的淋巴细胞有上述两种途径,但一般不分裂增殖,小鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能通过D途径不断分裂增殖。根据该原理,在含甲的混合培养液中添加氨基蝶呤_____ (填“能”或“不能”)筛选出A,原因是_____ 。
(3)SARS-CoVS蛋白单克隆抗体_____ (填“能”或“不能”)对新型冠状病毒发挥作用,理由是_____ 。
(4)为了进一步研究SARS-CoVS蛋白单克隆抗体X(以下简称抗体X)的效果及作用机制,科学家开展了如下实验:
实验一:在体外将抗体X与SARS-CoVS蛋白混合,检测抗体X对SARS-CoVS蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。
(注:KD值越小,抗体和蛋白的亲和力越高;抗体Y为一种已知的SARS病毒的抗体。)
实验二:以一定浓度的SARS病毒感染小鼠;一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X、Y;14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明:抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。
①实验一结果表明:对SARS-CoVS蛋白亲和力更高的抗体是_____ 。
②分析实验一和实验二的结果差异,研究人员提出假说:抗体除了中和病毒活性之外,还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合,从而增强巨噬细胞的吞噬作用,进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了SARS病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料,设计实验验证上述假说。写出实验思路_____ 。
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(3)SARS-CoVS蛋白单克隆抗体
(4)为了进一步研究SARS-CoVS蛋白单克隆抗体X(以下简称抗体X)的效果及作用机制,科学家开展了如下实验:
实验一:在体外将抗体X与SARS-CoVS蛋白混合,检测抗体X对SARS-CoVS蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。
(注:KD值越小,抗体和蛋白的亲和力越高;抗体Y为一种已知的SARS病毒的抗体。)
抗体种类 | KD |
抗体X | 5.32×10-9M |
抗体Y | 1.95×10-9M |
①实验一结果表明:对SARS-CoVS蛋白亲和力更高的抗体是
②分析实验一和实验二的结果差异,研究人员提出假说:抗体除了中和病毒活性之外,还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合,从而增强巨噬细胞的吞噬作用,进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了SARS病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料,设计实验验证上述假说。写出实验思路
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【推荐3】运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现人体细胞与小鼠体细胞融合得到的杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体,人的染色体则逐渐丢失,只剩一条或几条。下图是人的缺乏HGPRT酶细胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶细胞株(TK-)融合后并在HAT培养液中培养的过程,结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HCPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与增殖。请回答问题:
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(1)过程①表示________________ 技术,常用的诱导方法有________________ ,该技术突破了________________ 的局限,使远缘杂交成为可能。
(2)过程②中HAT培养液的作用主要是________________ 和________________ ;在培养人-鼠杂种细胞的过程中,需定期使用________________ 酶处理细胞,使贴壁细胞脱落,形成细胞悬液。
(3)根据图示结果可知,人的TK基因位于________________ 号染色体,理由是________________ 。
(4)利用上述方法不能实现对鼠基因定位,理由是________________ 。
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(1)过程①表示
(2)过程②中HAT培养液的作用主要是
(3)根据图示结果可知,人的TK基因位于
(4)利用上述方法不能实现对鼠基因定位,理由是
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