【推荐1】华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后，提炼而成的中药复方制剂，是我国经典抗肿瘤药物。 研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌 HepG-2 细胞的作用机理，进行了一系列实验。请根据题中信息回答下列问题。
Ⅰ.肝癌 HepG-2 细胞的培养：
（1）培养肝癌HepG-2细胞时，在培养基中加入适量的__________以补充合成培养基中缺乏的物质，为防止培养过程发生污染要加入____________。此外，每 48h 更换 1 次培养液，目的是________________。
Ⅱ.探究华蟾素药效作用机理的实验：
（2）用不同浓度的华蟾素注射液分别处理 HepG-2 细胞 12h、24h 和 48h，测定华蟾素注射液对 HepG-2 细胞增殖的影响，结果如下图。

由图甲可知，华蟾素能有效地______肝癌HepG-2细胞增殖，且与______呈正相关。图乙的结果进一步表明，华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在______________。
（3）DNA 拓扑异构酶Ⅱ（简称 TopoⅡ）为真核生物所必需，在 DNA 复制、转录、重组及形成正确的染 色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用，TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞。 华蟾素注射液处理 HepG-2 细胞 48h 后，采用 RT-PCR 技术检测 TopoⅡ基因的表达情况，RT﹣PCR是将mRNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式反应相结合的技术，具体过程如图丙。
   
①RT-PCR 即逆转录-聚合酶链反应。其主要原理是：提取HepG-2 细胞中的总 RNA， 以一段_______作为引物，在________酶的作用下合成 cDNA，再以 cDNA 为模板进行_________。
②要对图中单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要___________个引物B。

【推荐3】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与植物组织培养有关的问题：
（1）在配制MS培养基时，通常先将各种药品配制成一定倍数的________，这样配制的最主要优点是________（A．便于低温保存   B．延长使用时间   C．降低称量误差   D．减少杂菌污染）
（2）从自然界中获取的菊花茎段，须先用酒精等进行消毒，最后用________进行洗涤。将茎段插入培养基的过程必须在________中的酒精灯火焰旁进行，保证无菌环境。
（3）从带芽的茎段上长出丛状苗________（选“需要”或“不需要”）经历脱分化，长出的丛状苗需________后，再转入________培养基中继续培养。
（二）回答与动物克隆有关的问题：
（1）克隆培养法的基本要求是所建立的克隆必须来源于________。以下不属于提高克隆成功率的是________（A．添加血清   B．持续通入纯氧   C．使用CO₂培养箱   D．胰岛素刺激）。
（2）克隆绵羊的诞生证明________的体细胞，还能恢复到类似________时期的功能，同时说明在胚胎和个体发育中________具有调控细胞核发育的作用。
（3）人—鼠杂交细胞通常会丢失人的染色体，因此，________（选“能”或“不能”）利用该细胞杂交技术对鼠的基因进行定位。通过杂交瘤技术制备的单抗可以作为________与抗原发生反应，用以研究抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。

【推荐1】I．人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y），该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。
(1)若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取_______作为模板，在_______催化下合成cDNA，再利用_______技术在体外扩增获得大量Y的基因。
(2)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。若将上述所得Y的基因插入农杆菌Ti质粒上的______________中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经培养、筛选等得到了能稳定表达Y的愈伤组织，则说明Y的基因已经______________。
(3)天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性，具体思路是______________。
Ⅱ．根据所学知识回答问题：
(4)药用植物——川芎易受病毒侵染造成大幅度减产，日本学者用川芎的_______作为外植体进行脱毒培养，培养基一般含有水分、无机盐、_______、氮源、维生素等。
(5)植物组织培养的主要原理是植物细胞具有_______。科研人员利用植物的_______作为外植体培养出单倍体植株，具体过程是在_______和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过_______产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
(6)在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到_______阶段时，将胚胎移人受体（代孕）动物体内。

【推荐2】目前，英国研究人员利用最新的3D打印技术，“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明，这些干细胞仍能保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，在实验室已成功克隆出数个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答：
（1）自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或中分离出来的一类_______细胞。
（2）上述过程中要应用到动物细胞工程技术有_______、_____。胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大，___明显；在功能上具有_______。
（3）将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，在分子水平上需要采用_______技术。
（4）若选用囊胚进行胚胎分割，要注意对其_______做到均等分割。
（5）胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明，为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是________。

【推荐3】长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

(1)在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有_________________。
(2)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核的形成；⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为____________________（填序号）。
(3)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有__________________________________
(4)试管牛E的性别为_________________，克隆羊多利的性状和____________ （黑面绵羊\白面绵羊）最接近。
(5)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_________________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的_______________冲洗出来。
(6)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________；图中标号3为__________，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(7)动物的早期胚胎移植到同种且____________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜______________________。