血液作为一种常见的临床检测材料,如何从血液中快速、高效地分离和提取基因组DNA,对于临床血液检验与分析非常重要,科研人员对比分析了超声波处理法(方法A)、高盐法(方法B)、改良高盐法(方法C)等三种快速提取大鼠全血基因组DNA的方法,实验过程如图,请分析回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/5/1/2194035823804416/2198527230230529/STEM/22b4ab464e4644059f8e7d75930f21a1.png?resizew=576)
(1)常规细胞破碎方法是_____________ 。三种方法实验所需时间均较短,主要在样品处理和细胞破碎环节进行了优化,就三种方法而言,细胞破碎较理想的方法为___________
(2)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,分析原因可能是___________ 。
(3)步骤②中加入NaCl的目的是________
(4)得到含DNA的溶液后进行鉴定,需向其中加入________ 沸水浴加热冷却后变蓝。
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(1)常规细胞破碎方法是
(2)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,分析原因可能是
(3)步骤②中加入NaCl的目的是
(4)得到含DNA的溶液后进行鉴定,需向其中加入
更新时间:2019-05-07 14:18:00
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适中
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解题方法
【推荐1】某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。
(1)将DNA的粗提取物溶于2 mol/L的NaCl溶液中,加入________ 试剂,在________ 条件下进行鉴定,结果如下表:
注:“+”越多表示蓝色越深。
(2)该探究性实验课题的名称可能是“探究不同材料和不同________ 对DNA提取量的影响”。
(3)根据实验结果分析:
①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量更________ (填“多”或“少”)。
结论2:等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从________ 中提取的DNA量最多。
②针对结论1,请提出合理的解释:低温抑制了________ 的活性,DNA降解速度减慢。
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。
(1)将DNA的粗提取物溶于2 mol/L的NaCl溶液中,加入
材料保存温度 | 花菜 | 辣椒 | 蒜黄 |
20 ℃ | ++ | + | +++ |
-20 ℃ | +++ | ++ | ++++ |
(2)该探究性实验课题的名称可能是“探究不同材料和不同
(3)根据实验结果分析:
①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量更
结论2:等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从
②针对结论1,请提出合理的解释:低温抑制了
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(0.65)
名校
【推荐2】DNA的粗提取与鉴定的实验(如图):
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/20/37a154c0-4f49-4cb8-92ce-1ffd59169493.png?resizew=448)
(1)本实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡的全血,主要原因是鸡血细胞液中______________ 含量较高,另外本实验不适合用哺乳动物的血细胞液,原因是___________________ 。
(2)图中A所示加入蒸馏水的目的是___________________________ 。
(3)通过图中B所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是_____________________ 。
(4)图中C所示加入蒸馏水的目的是____________ 。
(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用______________ 试剂进行检验,在沸水浴条件下,冷却后可以看到颜色反应为________________ 色。
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(1)本实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡的全血,主要原因是鸡血细胞液中
(2)图中A所示加入蒸馏水的目的是
(3)通过图中B所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是
(4)图中C所示加入蒸馏水的目的是
(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用
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(0.65)
【推荐3】在DNA指纹技术研究中认为,DNA中的高度重复序列具有高度可变性,但其高度重复序列中有一小段序列在所有个体中都一样,称为“核心序列”。下图是某刑事案例中女受害者、受害者体内精液和三位怀疑对象的DNA指纹图谱,请根据以上内容和指纹图谱回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/29/2968460633210880/2970918746308608/STEM/8bbdf4732c1a47ad9008648b86210eb2.png?resizew=502)
(1)指纹图谱就是把“核心序列”串联起来作为探针,与不同个体的DNA进行___ 就会出现各自特有DNA指纹图谱。应用DNA指纹技术,首先需要用___ 酶将待测的样品DNA切成片段,然后用电泳的方法将这些片段按大小分开。
(2)提取动物细胞的DNA时需先破碎细胞,常用的方法是___ 。为了纯化提取的DNA,可利用DNA在___ 中溶解度的不同来去除杂质。在沸水浴的条件下,DNA遇___ 会变成蓝色。
(3)一滴血、精液或是一根头发中的DNA虽然含量很少,但仍可以进行DNA指纹鉴定,因为在鉴定之前可通过___ 获得大量的相同DNA。从上图可以判断出怀疑对象中___ 最可能是罪犯。
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(1)指纹图谱就是把“核心序列”串联起来作为探针,与不同个体的DNA进行
(2)提取动物细胞的DNA时需先破碎细胞,常用的方法是
(3)一滴血、精液或是一根头发中的DNA虽然含量很少,但仍可以进行DNA指纹鉴定,因为在鉴定之前可通过
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(0.65)
【推荐1】生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇,其技术流程为:纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。
(1)纤维素酶的成本能否下降,是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①最好选择怎样的环境采集土样?______________ 。
②以下是一种培养基配方:纤维素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4·7H2O 1.2 g、KH2PO4 0.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪素0.5 g(蒸馏水定容到1 000 mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度,其原理是______________ 。
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基上加入________ 染液,将筛选获得的菌液稀释后用________ 接种到鉴别培养基上,然后挑选产生________ 的菌落作为菌种进行扩大培养。
④纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢?请设计实验进行检测。_________________ 。
(2)进行工业化酶解时,为了使纤维素酶能反复使用,可以采用_______________ 技术。
(3)乙醇是酵母菌的发酵产物,发酵时酵母菌直接利用的物质是________________ 。
(4)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性,从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种,该过程需要先提取DNA,然后对其上的基因片段进行改造。DNA提取时,可以利用DNA在_____________________ 而析出,为了纯化提取的DNA,向DNA滤液中加入嫩肉粉,目的是_______________ ,DNA鉴定时,可使用__________ 试剂并在沸水中加热产生____________ 色反应。
(1)纤维素酶的成本能否下降,是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①最好选择怎样的环境采集土样?
②以下是一种培养基配方:纤维素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4·7H2O 1.2 g、KH2PO4 0.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪素0.5 g(蒸馏水定容到1 000 mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度,其原理是
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基上加入
④纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢?请设计实验进行检测。
(2)进行工业化酶解时,为了使纤维素酶能反复使用,可以采用
(3)乙醇是酵母菌的发酵产物,发酵时酵母菌直接利用的物质是
(4)发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性,从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种,该过程需要先提取DNA,然后对其上的基因片段进行改造。DNA提取时,可以利用DNA在
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(0.65)
【推荐2】下图表示用洋葱作为实验材料的三个实验的操作流程。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/9/2481002518380544/2481474135023616/STEM/b9f5abdc89914431be6a02aa0410a147.png?resizew=513)
(1)步骤A表示研磨提取洋葱叶肉细胞中的色素,研磨后过滤获得滤液。从安全和实验效果角度考虑,在研钵中可以加入的以及要将色素提取液进行过滤时漏斗中要放入的分别是________ (填序号)。
①弄碎的洋葱叶 ② 少量的二氧化硅 ③ 少量的碳酸钙 ④ 无水乙醇 ⑤丙酮 ⑥ 单层尼龙布 ⑦ 定性滤纸 ⑧单层纱布
步骤A、B按规范要求进行操作,一段时间后滤纸条出现的现象如图中①所示,造成这一结果的原因可能是________________________ 。
(2)用洋葱根尖做有丝分裂实验中的C操作包括________ 等步骤,视野中观察到最多的是应处于________ 期的细胞。
(3)假设图②是利用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞进行的相关实验,图示现象显示细胞所处的状态以及③处此时充满的溶液分别为________ ,某学生在进行D步骤时,发现实验现象无明显变化,可能的原因是____________________________ 。
(4)在利用洋葱提取DNA时,在切碎的洋葱中加入一定量的________ ,进行充分的搅拌和研磨过滤后,收集研磨液,以便进行DNA的提取和鉴定。除了上述实验以外,洋葱可作为实验材料并在光学显微镜下观察的实验有________ (填序号)。
①探究根尖细胞中是否含有脂肪 ② 探究细胞的呼吸方式 ③ 探究DNA和RNA在细胞中的分布 ④ 探究种群数量的动态变化 ⑤ 观察多种多样的细胞
(5)有资料表明,赤霉素能促进大麦种子萌发。现欲探究300 mg/L赤霉素溶液对花生种子萌发的影响,请你简要写出实验的主要思路:________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/9/2481002518380544/2481474135023616/STEM/b9f5abdc89914431be6a02aa0410a147.png?resizew=513)
(1)步骤A表示研磨提取洋葱叶肉细胞中的色素,研磨后过滤获得滤液。从安全和实验效果角度考虑,在研钵中可以加入的以及要将色素提取液进行过滤时漏斗中要放入的分别是
①弄碎的洋葱叶 ② 少量的二氧化硅 ③ 少量的碳酸钙 ④ 无水乙醇 ⑤丙酮 ⑥ 单层尼龙布 ⑦ 定性滤纸 ⑧单层纱布
步骤A、B按规范要求进行操作,一段时间后滤纸条出现的现象如图中①所示,造成这一结果的原因可能是
(2)用洋葱根尖做有丝分裂实验中的C操作包括
(3)假设图②是利用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞进行的相关实验,图示现象显示细胞所处的状态以及③处此时充满的溶液分别为
(4)在利用洋葱提取DNA时,在切碎的洋葱中加入一定量的
①探究根尖细胞中是否含有脂肪 ② 探究细胞的呼吸方式 ③ 探究DNA和RNA在细胞中的分布 ④ 探究种群数量的动态变化 ⑤ 观察多种多样的细胞
(5)有资料表明,赤霉素能促进大麦种子萌发。现欲探究300 mg/L赤霉素溶液对花生种子萌发的影响,请你简要写出实验的主要思路:
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【推荐3】为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿-异戊醇,蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/6/1681331221397504/1685509176418304/STEM/647c14bf4f1a4d1486e7d69a9aa76bad.png?resizew=467)
结果检测
注:①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多;②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留,若小于1.8表示存在蛋白质残留。③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。
(1)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是_____________ 。步骤④“? ”表示___________ 。
步骤⑤中加RNA酶的作用是_______________ 。
(2)影响DNA纯度的物质主要有______________ 。提取的DNA中RNA残留较多的方法是______________ 。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是______________ 。
(3)电泳可以直观对比DNA的完整性,分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同,从而产生不同的条带。下图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带,而C方法有明显的“拖尾”现象。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/6/1681331221397504/1685509176418304/STEM/a19c25c075f847418ac0c72a8460031f.png?resizew=413)
①只出现一条带的原因是______________ 。
②出现“拖尾”现象的原因是______________ 。
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结果检测
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/6/1681331221397504/1685509176418304/STEM/7c6063d7bc904d3694fa2c8d9fcb254e.png?resizew=569)
(1)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是
步骤⑤中加RNA酶的作用是
(2)影响DNA纯度的物质主要有
(3)电泳可以直观对比DNA的完整性,分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同,从而产生不同的条带。下图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带,而C方法有明显的“拖尾”现象。
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①只出现一条带的原因是
②出现“拖尾”现象的原因是
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名校
解题方法
【推荐1】某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验,选择了不同温度(20℃、-20℃)条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料,部分实验步骤如图1所示。回答下列问题:______ (填酶的名称)。
(2)图1中,将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中,然后进行离心处理,再取______ (填“上清液”或“沉淀物”)放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA,这样做的原理是______ 。
(3)将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中,加入______ 试剂,在______ 条件下进行鉴定。
(4)DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析,相同温度条件下,______ 的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在______ ℃条件下DNA粗提取含量更高,其原因可能是______ (从酶的角度作答)。
(2)图1中,将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中,然后进行离心处理,再取
(3)将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中,加入
(4)DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析,相同温度条件下,
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(0.65)
【推荐2】真核生物细胞内,大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起,难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/6/15/1967896110161920/1971244742451200/STEM/de368a8b154342ffb646352a409842d5.png?resizew=341)
(1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法,如图表示从各种物质间____________________________ 存在差异这一角度开展了研究:
a.取鸡血细胞悬液10 mL,加蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒____________________________ (填“缓慢”或“快速”)搅拌。过滤、取滤液,然后将滤液转移到塑料材质的大烧杯中。
b.沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,用玻璃棒沿一个方向________ (填“缓慢”或“快速”)搅拌,同时不断收集析出的物质。根据图示鸡血中几种物质的析出情况分析:
①如果只收集纤维蛋白,可采取的措施是____________________________ 。
②DNA在浓度约为____________________________ (填最小值)的硫酸铵溶液中溶解度最小,此浓度下与其同时析出的物质还有____________________________ 。
(2)如果要进一步去除其他杂质,尽可能提高获得的DNA纯度,可采取的两种办法有____________________________
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/6/15/1967896110161920/1971244742451200/STEM/de368a8b154342ffb646352a409842d5.png?resizew=341)
(1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法,如图表示从各种物质间
a.取鸡血细胞悬液10 mL,加蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒
b.沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,用玻璃棒沿一个方向
①如果只收集纤维蛋白,可采取的措施是
②DNA在浓度约为
(2)如果要进一步去除其他杂质,尽可能提高获得的DNA纯度,可采取的两种办法有
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(0.65)
【推荐3】选取合适的实验材料是实验能否成功的关键条件之一。某校甲、乙两个生物兴趣小组的同学为了探究教材中的相关实验,从市场上买了白色洋葱和几包某品牌的高活性干酵母。
(1)甲组选用白色洋葱进行如下实验:
①为了验证洋葱根尖伸长区细胞中含有较少的脂肪:取新鲜的洋葱根尖并作徒手切片,选取2-3片最薄切片放置在载玻片的中央,滴加苏丹Ⅲ染色,并用50%的酒精洗去浮色后,在显微镜下观察,结果几乎观察不到被染成橘黄色的颗粒,最可能的原因是____ 。
②取其鳞片叶外表皮进行“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验时,在盖玻片的一侧滴入含有伊红(植物细胞不吸收的红色染
料)的O.3g/L的蔗糖溶液,则在显微镜下观察到原生质层内外的颜色分别是____ ;细胞能够发生质壁分离的内因是____ 。
③为了从鳞片叶的叶肉细胞中提取DNA,他们撕去鳞片叶的内表皮和外表皮,剪碎后放入研钵内,在进行研磨前,还需要加入__ 等物质。
(2)乙组选用酵母菌作材料进行如下实验:
①用活化后的酵母菌来探究呼吸方式,若用澄清的石灰水作为检测试剂,则观测的指标是____ 。
②为了探究酵母菌种群增长的最适温度,在已知15~35℃温度范围内继续实验,下图为视野中观察的实际结果,表为实验过程记录表 (单位:×106个/mL):
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/31/1698701870252032/1700171779080192/STEM/38cc5884537a4072a51c900d4487d813.png?resizew=217)
则:
a.若使用的血球计数板的计数室长和宽各为1mm,深度为0.1mm,按图1来估计每ml活化液中含酵母菌的数目为____ 个(不考虑死活)。
b.请在答题卡的相应位置,画出上述实验过程中不同温度条件下培养液中酵母菌种群数量达到K值时的柱形图____ 。
c.若其他条件保持不变,适当提高培养液的浓度,则该组别的K值将____ (选填“增加”“减小”或“保持不变”)。
(1)甲组选用白色洋葱进行如下实验:
①为了验证洋葱根尖伸长区细胞中含有较少的脂肪:取新鲜的洋葱根尖并作徒手切片,选取2-3片最薄切片放置在载玻片的中央,滴加苏丹Ⅲ染色,并用50%的酒精洗去浮色后,在显微镜下观察,结果几乎观察不到被染成橘黄色的颗粒,最可能的原因是
②取其鳞片叶外表皮进行“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验时,在盖玻片的一侧滴入含有伊红(植物细胞不吸收的红色染
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/31/1698701870252032/1700171779080192/STEM/fccad58bd5df4f5c87ead3d7d9f2bf7a.png?resizew=2)
③为了从鳞片叶的叶肉细胞中提取DNA,他们撕去鳞片叶的内表皮和外表皮,剪碎后放入研钵内,在进行研磨前,还需要加入
(2)乙组选用酵母菌作材料进行如下实验:
①用活化后的酵母菌来探究呼吸方式,若用澄清的石灰水作为检测试剂,则观测的指标是
②为了探究酵母菌种群增长的最适温度,在已知15~35℃温度范围内继续实验,下图为视野中观察的实际结果,表为实验过程记录表 (单位:×106个/mL):
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/31/1698701870252032/1700171779080192/STEM/236d4851efe94810a5bba7f5c720b342.png?resizew=368)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/5/31/1698701870252032/1700171779080192/STEM/38cc5884537a4072a51c900d4487d813.png?resizew=217)
则:
a.若使用的血球计数板的计数室长和宽各为1mm,深度为0.1mm,按图1来估计每ml活化液中含酵母菌的数目为
b.请在答题卡的相应位置,画出上述实验过程中不同温度条件下培养液中酵母菌种群数量达到K值时的柱形图
c.若其他条件保持不变,适当提高培养液的浓度,则该组别的K值将
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