组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.4 引用次数:88 题号:8486848
狂犬病是一种死亡率非常高的传染病,传统抗狂犬病毒的抗体产址低、效应低。研究发现,将人源抗狂犬病毒的抗体基因构建的目的基因表达载体导入烟草细胞中,产生的烟草蛋白可中和99%的狂犬病毒。回答下列问题:
(1)人源抗狂犬病毒抗体编码基因的偏好性改造:在不改变编码_________序列的前提下,对人源抗狂犬病毒抗体基因进行修饰,使其编码基因具有表达________的偏好性。
(2)构建基因表达载体之前,为了便于__________的识别和结合,目的基因需融合花椰菜花叶病毒的启动子;构建目的基因表达载体时,为了防止_____。可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体。常采用_______法将目的基因表达载体导入烟草细胞中。
(3)该种抗狂犬病毒的抗体制备方法中,烟草扮演的角色是______,该制备方法的优点有______________

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非选择题-解答题 | 较难 (0.4)
【推荐1】CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术,科研人员对其进行了一系列改造。
(1)Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形成复合体(如图1)。复合体中的sgRNA与目的基因按照________原则特异性结合。复合体在sgRNA引导下结合目的基因,Cas9蛋白切割目的基因造成双链断裂,细胞在修复断裂的DNA时会随机插入、删除或替换部分碱基对,从而引发________

(2)将编码Cas9蛋白的基因改造后形成新基因dCas9,与Cas9蛋白相比,dCas9蛋白失去剪切活性,但与sgRNA结合等功能不变。构建能够表达dCas9的质粒A,设计一系列与红色荧光蛋白基因(RFP基因)上游不同部位结合的sgRNA序列(如图2),并以此为依据构建能表达sgRNA的质粒B,将质粒A、B共同导入含有RFP基因的大肠杆菌,测定大肠杆菌红色荧光强度,实验结果如图3所示。

实验结果显示,对照组的红色荧光强度约为sgRNA3组的________倍。由实验结果可以得出:________
(3)VP64蛋白可结合RNA聚合酶,激活基因的转录,但VP64蛋白无法识别或结合特定的DNA片段。科研人员欲利用上述系统和VP64蛋白促进特定基因表达,请设计促进细胞中已存在的基因X表达的方案_______
(4)请写出CRISPR/Cas9及其改造产品的在科学研究中的应用_______
2023-01-04更新 | 844次组卷
非选择题-解答题 | 较难 (0.4)
【推荐2】普通番茄细胞中存在能分解细胞壁的酶(由A基因编码),因而成熟的番茄果实易软化而不耐储运,科学家们通过基因工程技术,导入目的基因B(位于环状DNA上),可以使分解细胞壁的酶“沉默”,成功培育耐储运的番茄新品种。研究人员将B基因转入普通西红柿。该过程所用的质粒与B基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性内切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ识别的碱基序列和酶切位点分别为G′GATCC、T′GATCA、′GATC、A′AGCTT。回答下列问题:

(1)图1所示质粒中没有标注出来的结构是______;启动子是____________的部位,驱动______
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时,可以用限制酶BamHⅠ切割质粒,用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段,这样做的原因是________________________
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合,加入DNA连接酶连接并成功导入受体细胞(不考虑基因突变),将受体细胞放入培养基中进行筛选,则受体细胞的表型包含______。
A.抗X、抗YB.抗X、不抗YC.不抗X、抗YD.不抗X、不抗Y
(4)目的基因可用PCR技术进行体外扩增,与体内DNA复制不同,PCR过程中解旋的方法是____________
2022-10-29更新 | 196次组卷
非选择题-解答题 | 较难 (0.4)
【推荐3】疫苗接种是当前新冠肺炎疫情防控工作的一项重要举措,我国科学家研发了多种新冠疫苗,其中重组腺病毒疫苗研发策略是:将新冠病毒的S蛋白基因整合到腺病毒DNA中,形成表达S蛋白的重组腺病毒,注射到健康人体内,腺病毒可侵染人体细胞,达到预防新冠病毒感染的效果。回答下列问题:
(1)与直接将S蛋白注射到体内作为疫苗相比,重组腺病毒疫苗的优点是可以引起人体产生_____________免疫,更有效清除病毒。
(2)为了构建重组腺病毒DNA,需要将S蛋白基因插入腺病毒DNA中,由于腺病毒DNA分子较大,传统的限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理效率较低,所以采取如图1所示方法获得重组腺病毒DNA。将质粒1和质粒2共同导入受体细胞中,据图推测,最终重组线性DNA分子的筛选过程中,应在培养基中加入_____________(用字母表示即可)。

(3)生产疫苗的过程是将上述重组线性DNA分子(不编码病毒复制必需的E1蛋白)导入到293细胞系(该细胞系可表达人体细胞没有的E1蛋白),最终包装成完整的腺病毒。重组DNA分子中缺失E1基因的意义是______________
(4)为了检测疫苗的效果,科学家用不同方式给雪貂接种重组腺病毒疫苗后,感染新冠病毒,一段时间后检测新冠病毒含量,结果如图2所示,说明重组腺病毒疫苗_______________,且效果最好的免疫方式是______________
(5)作为符合新冠疫苗的接种对象,你可以采取哪些行动响应国家疫苗接种的政策? _____________(两方面)。
2022-01-28更新 | 385次组卷
共计 平均难度:一般