【推荐2】孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸等风险，但由于其价格低廉，治疗鱼病效果好，有一些养殖企业仍在滥用孔雀石绿。蚕豆根尖微核检测技术是国际公认的遗传学毒性检测的标准，科研人员利用该技术检测了孔雀石绿对蚕豆根尖的微核率。请回答下列问题：
实验原理：真核生物受内外环境的污染后，染色体发生断裂等异常，导致染色体片段不能顺利进入子细胞的细胞核。当细胞进入下一次分裂时，在细胞质中形成圆形或椭圆形的、比主核小的微核。微核率=含微核的细胞数/所观测细胞总数。
实验步骤：
①孔雀石绿浓度的选择：选择0.05、0.1、0.5、1.0、2.0mg/L这5个浓度，并设置空白对照。
②蚕豆根尖的染毒处理：取饱满、大小均匀的蚕豆种子在适宜的条件下浸种催芽。待根尖长到1~2cm左右时，取出种子，并用不同浓度的孔雀石绿溶液、蒸馏水分别进行处理，处理时间为12、24、36、48、72h，最后恢复培养24h。
③制作装片：取培养的种子，切取1cm长的幼根，进行解离、 ？ 、制片。
④镜检统计：显微镜观察，统计根尖分生区细胞的微核数，染色体畸变数，同时进行显微摄影，部分染色体异常的细胞如下图a~e。
   
注：多极有丝分裂是指核分裂时，细胞中出现两个以上的极，染色体发生不规律分配的一种异常分裂方式。往往与中心体数目增加有关。
(1)本研究的自变量是_______。步骤①中应选取_______作对照。步骤③中解离的目的是_______，“？”表示的是_______。
(2)步骤④中低倍镜下观察到的根尖分生区细胞的特点是_______，再用高倍镜观察_______（选填“同一细胞”或“不同细胞”）从而找到不同的分裂时期。实验过程中，所观察到的大多数细胞均处于分裂间期，原因是_______。
(3)观察统计微核应选择_______期的细胞。图a、b所示的细胞中均出现了微核，图c~e的细胞若在自然状态下继续分裂，形成微核概率较大的有_______。
(4)科研人员进一步发现，在孔雀石绿的胁迫下细胞的微核率显著上升，提示孔雀石绿的毒性效应在特定条件下随孔雀石绿浓度或胁迫时间的增加而______________；但是当胁迫时间较长时（≥48h），较高浓度组（≥1.00mg·L^-1）的微核率却略有下降趋势，可能的原因是高浓度的污染物长时间胁迫会减缓、抑制、甚至终止_______，从而微核无法被检出，但毒性效应并未因此减弱。