【推荐1】生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用，请回答下列问题。
（1）利用_______技术制备的杂交瘤细胞，可用于制备单克隆抗体。与体内抗体相比，单克隆抗体具有理化性质单一、______、可大量制备等优点。
（2）干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产。该技术中目的基因和运载体要用同种_______切割，以产生相同的_____。
（3）在完成体外受精的过程中，对已取得的精子要进行_______处理，为了获取更多的卵细胞，一般要对雌性个体注射______，使其超数排卵。
（4）利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤，用于皮肤移植。在此过程中通入CO₂的目的是________，在培养液中加入_______酶，可防止细胞出现接触抑制现象。

【推荐2】异丁醇具有燃值高、能量密度高等优点，其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的意义。科研人员构建了一种表达载体pUC18（如图1）导入酵母菌，用于过量表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以期实现大规模生产异丁醇。图2是酵母细胞中葡萄糖代谢产生异丁醇、乙醇和乙酸的示意图，其中基因ADHs和ALDs分别控制E酶和F酶的合成。回答下列问题：
      
(1)将基因ILV2、ILV5、ILV3和AR010依次插入到质粒上的目的基因插入位点，选用高表达启动子pTEF1和____________作为调控序列。pTEF1是_____________识别并结合的位点。
(2)科研人员先将pUC18转化到大肠杆菌细胞中，以便筛选、保存和扩增重组质粒。重组质粒上的____________（填“真核”或“原核”）生物复制原点使pUC18能在大肠杆菌中扩增。已知氨苄青霉素抑制细菌细胞壁的合成，pUC18中氨苄青霉素抗性基因的作用是____________。
(3)提取完整的重组pUC18并导入组氨酸缺陷型酿酒酵母细胞中，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，该过程称为微生物的_____________培养。除必要的营养物质外，该选择培养基中需要添加的物质是____________。
A．组氨酸                    B．氨苄青霉素                    C．琼脂
(4)根据图示酵母细胞葡萄糖的代谢途径，为了进一步提高异丁醇的产量，应对基因____________进行改造使其表达产物减少。

【推荐3】请回答下列与基因工程有关的问题：
（1）将目的基因插入到T-DNA中用到的工具酶有____________________，在利用农杆菌转化法时，需将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中，原因是_________________________。
（2）在乙肝疫苗的生产中，应该选择________________（填抗原或抗体）基因作为目的基因，该目的基因利用____________________技术进行扩增，该技术需要用到____________________酶。在基因表达载体中标记基因的作用是________________________________。
（3）用基因工程生产乙肝疫苗时，若选用细菌为受体细胞，则不能得到引起免疫反应的基因表达产物，其原因是：______________。

【推荐2】如图，为我国某农场发展的桑基鱼塘生态农业模式图，请据此图回答以下问题：

（1）该图中，要想通过基因工程培养抗病桑树，用同种_____切割含有抗虫基因的DNA分子和运载体，再用_____连接，构建基因表达载体，将基因表达载体导入桑树的叶肉细胞，再通过______技术将叶肉细胞培养成植株。
（2）该农场从国外引入几头良种猪，若想大量繁殖此良种猪，可采用________技术。该技术首先要对供体和受体进行_____处理，然后给供体猪注射激素，使其_____，从而获得更多的卵母细胞，然后培养至_____期，与经过____处理的精子进行体外受精，得到早期胚胎，移植到受体猪体内。

【推荐3】请回答下列与生物工程相关的问题：
(1)将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是________。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以______________。
(2)用DNA连接酶把被限制酶I(识别序列和切点是—↓GATC—)切割得到的运载体和被限制酶II(识别序列和切点是-G↓GATCC-)切割得到的目的基因连接起来后，该重组DNA分子的新连接处能够再被限制酶II切割开的概率是__________。
(3)胚胎分割操作过程需要特别注意的问题是:将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后______。
(4)体外培养动物细胞需要满足以下条件:_______、添加了血浆（或“血清”)的培养基、适宜温度与pH、_________的气体环境等。
(5)对于转基因生物，公众在__________、____________和_____________方面产生了争议。
(6)湿地具有蓄洪防旱、调节区域气候等功能，这体现了生物多样性的__________价值。依据生态工程的_____原理，鄱阳湖自然保护区的建立需考虑周边的经济发展等相关问题。

【推荐1】近年来，由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题，导致野生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成。科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程如下：

(1)一般来说，郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、____、____。
(2)待郊狼数量增多以后，还可以采用体外受精技术或动物细胞核移植技术获得郊狼胚胎，并进行胚胎移植，进一步恢复濒危郊狼的种群数量。下列叙述正确的是____
①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时，桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时，受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更____，原因是____。
(4)采用机械方法将郊狼早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是____

A．胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚

B．不考虑基因突变，利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎

C．胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割

D．胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能

(5)从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是____。
(6)生物技术在造福人类的同时也可能带来安全与伦理问题，下列有关生物技术安全性等问题的观点错误的是____

A．生殖性克隆人理论上增加了人类基因的多样性

B．生殖性克隆需要核移植技术，而治疗性克隆不需要

C．鉴于转基因食品安全的不确定性，应该禁止转基因食品上市

D．我国禁止克隆人的实验，对治疗性克隆实验也进行严格审查

【推荐3】自1996年世界上第一只体细胞克隆羊多莉诞生以来，人类已经成功克隆了马、牛和猪等大型家畜，但体细胞克隆灵长类动物一直没有取得进展，究其原因主要是灵长类动物的卵细胞极为敏感，极轻微挤压都可能导致异常分裂，且细胞核移植到去核卵细胞后不能完全恢复到分化前的功能状态，导致胚胎发育率低。2017年，我国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”，该成果一经公布轰动了全世界。下图所示为克隆猴的培育过程。
   
(1)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是__________。
(2)我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内完成核移植，操作迅速使卵细胞受损极小，在技巧上保证了实验的成功。实际操作中，去核是指去除__________；核移植时将供体细胞注入__________，通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；
(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理重构胚，提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用机理分别是__________、__________，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达。Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列__________（填“会”或“不会”）发生改变。
(4)除操作技巧和化学方法的运用外，克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入__________等一些天然成分，将其置于含有__________混合气体的CO₂培养箱中培养。

【推荐1】人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下：
Ⅰ。采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ。将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ。电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ。将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，卵母细胞与精子结合过程中防止多精子入卵受精的生理反应包括_____。自然条件下，受精卵是在雌性动物的_____内完成的。
（2）步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是_____。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为_____。
（3）步骤Ⅲ中，进行早期胚胎培养时，培养液的成分应包括：无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、_____和核苷酸等营养成分，以及血清等物质。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是_____。
（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为_____的奶牛胚胎进行移植。
（5）胚胎移植实际上是_____和_____共同繁殖后代的过程。进行胚胎移植的优势是_____。

【推荐2】下图为转基因低乳糖奶牛培育流程。回答下列问题：

（1）图中涉及的生物技术有转基因技术、______、______和胚胎移植技术。
（2）重组质粒T是由______（写出具体的目的基因）基因和质粒连接而成的。原本不能消化乳糖及对乳糖过敏的人食用转基因低乳糖奶牛产出的乳汁后，能消化乳糖且不出现不适症，这说明动物基因工程的一重要作用是______。
（3）从牛卵巢中采集到卵母细胞后，接着对其进行的操作是先______，再______，获得去核的卵母细胞，再经核移植获得重组的受体细胞。
（4）要提高早期胚胎的利用率，应利用的技术是______，这一技术往往看做无性繁殖方法，理由是______。

【推荐3】我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平．下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

(1)该过程使用质粒的目的是__________________________________________________。
(2)图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来________，理由是： _____________。
(3)图示工程中，将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。然后还要通过_______技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
(4)图示中，将所采集到的卵母细胞在体外培养到________期即可通过显微操作将其细胞核去除并形成重组细胞，用物理或化学方法进行激活，然后再通过________技术培养成早期胚胎。
(5)过程⑧的实质是__________________________________________________________。