1 . 细菌在含¹⁵N的培养基中繁殖数代后，使细菌的DNA皆含有¹⁵N，然后再移入含¹⁴N的培养基中培养，提取其子代的DNA进行梯度离心，下图①－⑤为可能的结果，下列叙述错误的是（       ）

A．第一次分裂的子代DNA应为⑤

B．第二次分裂的子代DNA应为①

C．第三次分裂的子代DNA应为③

D．亲代的DNA应为⑤

2 . 大量悬浮培养产流感病毒的单克隆动物细胞，可用于流感疫苗的生产。下列有关叙述错误的是（       ）

A．培养前，可用机械的方法处理某些组织使其分散成单个细胞

B．用合成培养基培养动物细胞时一般要加入血清等天然成分

C．悬浮培养单克隆动物细胞一定程度上能避免接触抑制

D．传代培养时，悬浮培养的细胞用胰蛋白酶等处理后再离心收集

3 . 精子载体法以精子作为外源基因的载体，在受精过程中将外源基因导入动物受精卵，从而使外源基因进入子代的核基因组中，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．外源基因能够整合到精子的细胞核是提高转化率的关键

B．进行②过程前可对供体母鼠进行超数排卵处理

C．③过程的早期胚胎需要发育到原肠胚才能进行胚胎移植

D．④过程之前需要对受体母鼠进行激素处理，使其与供体母鼠同期发情

4 . 利用自然发酵法制作食品和调味品是我国古代劳动人民智慧的结晶。下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（       ）

A．果酒发酵转为果醋发酵后需适当升温并持续通气

B．制作泡菜和酸奶时需要通过密封来提供无氧环境

C．向发酵液中添加前一次的发酵液可提高发酵速度

D．传统发酵食品以单一菌种的固体发酵和半固体发酵为主

5 . 为修复被 DDT 污染的土壤，可按下图程序选育能降解DDT 的细菌（已知DDT 是一种含碳有机物，在水中溶解度低，含一定量 DDT的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是（　　）

   

A．只有长期使用DDT 的土壤中才含有能降解 DDT 的细菌

B．从用途方面来看，该实验所用培养基均为含有 DDT的选择培养基

C．将未接种的已灭菌的平板在相同条件下培养，可以判断培养基是否灭菌合格

D．菌落直径与透明圈直径的比值越大的菌株降解 DDT 的能力越强

6 . DNA复制和转录的共同点是（       ）

A．都需要酶的参与	B．都只发生在细胞核内
C．都以脱氧核苷酸为原料	D．不需要ATP提供能量

7 . 紫草是一种重要的药用植物，其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效，同时也是一种天然染料。由于大规模的乱采滥挖，野生紫草资源已趋于衰竭，为更好地获得紫草宁及其衍生物，利用新生营养芽为外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养来生产紫草宁已成为解决问题的重要手段。请分析回答下列问题：
(1)选用新生营养芽为外植体的原因是______________（答出一点）。外植体经过诱导后形成愈伤组织的过程称为____________。
(2)培养过程中需要加入蔗糖，蔗糖的作用是_____________（答出两点）。还要加入一定的植物激素，常用的植物激素有______。
(3)研究发现，悬浮培养比固体培养更有利于紫草细胞的生长，原因是________。
(4)紫草悬浮培养时细胞的生长曲线如图所示。

   

接种后第3天左右，紫草宁及其衍生物开始形成；对数生长期及直线生长期，紫草宁含量逐步上升；静止期，紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢______（填“有利于”或“不利于”）目的产物的形成。

8 . 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，为了改善黄瓜的品质，科学家利用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜试管苗叶细胞，再经植物组织培养获得甜蛋白基因过量表达的转基因黄瓜植株。图1为甜蛋白基因及限制酶切割位点。请回答下列问题：

   

(1)限制酶切割DNA分子时破坏的化学键是____________。上述实现转基因技术过程中，科学家利用了如图2所示PBI121质粒，为了保证目的基因能够正确插入质粒，切割目的基因及PBI121质粒可用的限制酶为______。
(2)利用农杆菌转化法能将甜蛋白基因转入黄瓜细胞，转化是指____________。
(3)转入甜蛋白基因后的黄瓜细胞，转化后应在培养基中添加______（填“新霉素”或“卡那霉素”或“新霉素和卡那霉素”），筛选转化成功的愈伤组织。若要获得产甜蛋白能力更强的基因，可以对甜蛋白基因进行改造，最终得到更多的甜蛋白，该过程可以通过蛋白质工程完成，基本思路为________________________。
(4)下表是鉴定含甜蛋白基因黄瓜植株的4种方法。请预测同一后代群体中，通过4种方法检出的含甜蛋白基因黄瓜植株的比例，从小到大依次是________________________。

方法	检测对象	检测目标	检出的含甜蛋白基因植株的比例
PCR扩增	基因组DNA	甜蛋白基因	P1
分子杂交	总mRNA	甜蛋白基因转录产物	P2
抗原—抗体杂交	总蛋白质	甜蛋白基因编码的蛋白质	P3
测甜度	黄瓜	含甜蛋白基因黄瓜	P4

9 . 将外源DNA与精子在吡啶核苷酸辅酶剂中一起孵育，精子可捕获外源DNA，并通过受精过程将外源DNA导入受精卵，该方法为精子载体法，能大大简化转基因动物的制备过程。如图表示用该方法制备转基因鼠的流程。据图分析，回答下列问题：

(1)从小鼠体内采集到的精子需要进行______处理才能用于体外受精，同时采集到的卵母细胞一般需培养到______期。
(2)过程③中，受精卵在体外培养时，一般要置于含有95%空气和5%CO₂的混合气体的培养箱中培养，其中CO₂的主要作用是_____________，受精卵增殖为早期胚胎的分裂方式是______。
(3)将早期胚胎移植到代孕母鼠体内时，一般______（填“需要”或“不需要”）使用免疫抑制剂处理代孕母鼠，这是由于____________。
(4)实验人员利用精子载体法将外源DNA导入小鼠精子，检测发现，不同小鼠个体精子中外源DNA的阳性率平均为13%左右。进一步实验，让检测为阳性的精子进行受精作用，将受精卵进行体外培养，胚胎中外源DNA表达的阳性率为4.7%。该实验结果说明运用精子载体法制备小鼠疾病模型______（填“具有”或“不具有”）可行性。

10 . 人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。利用基因工程生产重组人血清白蛋白（rHSA）可解决HSA短缺问题。科研人员依据基因组中HSA基因的碱基序列，同时考虑生产菌X（一种组氨酸缺陷型酵母菌）的生理特点，人工设计了rHSA基因。图1表示HSA基因，图2为基因工程所用质粒及相关元件（基因S控制合成信号肽，能引导后续合成的肽链进入内质网腔；HIS4控制合成组氨酸）。请回答下列问题：

(1)若要扩增出HSA基因并用于表达载体的构建，应选择的引物是图1中的______，其作用是___________。
(2)采用PCR技术扩增rHSA时，每次循环一般依次经过变性、复性和______三个步骤。构建基因表达载体时，将HSA基因构建在图2中的S基因后形成融合基因，目的是______。
(3)rHSA基因导入生产菌X需要经过两次筛选：第一次在含有氨苄青霉素的培养基中筛选得到含rHSA基因表达载体的大肠杆菌；第二次筛选时，将上述大肠杆菌与生产菌X混合，然后在___的基本培养基上培养，筛选出含有rHSA基因表达载体的生产菌X。rHSA基因表达载体既可在大肠杆菌中又可在生产菌X中稳定遗传的原因是_______________。
(4)AOX1为甲醇氧化酶的启动子，以其作为rHSA基因的启动子时，在以甲醇为碳源的培养基中rHSA基因正常表达，无甲醇时该基因不表达。从生产控制的角度分析，选用AOX1作为rHSA基因的启动子的优点是_______________。