1 . 人的血清白蛋白在临床上需求量很大，为提高其产量，科学家通过转基因技术和克隆技术培育出能分泌含人血清白蛋白乳汁的奶牛，流程如下图所示，图中数字表示相关的实验操作步骤。据图回答下列问题：

(1)为获得人血清白蛋白基因，需利用PCR的方法从提取的DNA中获取目的基因。在PCR的反应体系中需要加入引物其作用是_______，除此以外此体系中还需加入______、______、耐高温的DNA聚合酶，为激活耐高温的DNA聚合酶，还应加入_______。且按以下循环顺序设置温度为90℃以上、50℃左右和_______℃左右。
(2)获得人血清白蛋白基因后，科研人员构建了基因表达载体，下图为基因表达载体的部分结构。

结合题意分析图中与人血清白蛋白基因重组的是_______的启动子，与图中启动子结合的酶是________。构建重组质粒后为了确定人血清白蛋白基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物_______________。
(3)进行实验操作步骤①时，采用的技术是_______。若用体细胞取代胚胎细胞，则经过步骤②后得到早期胚胎的成功率会降低的原因是________。

2 . 科研人员设法保存了北部白犀牛的精子和部分组织，欲通过胚胎移植等方法繁育该物种，其研究过程如图所示，其中①②③表示操作过程。下列说法正确的是（　　）

A．①表示注射相关激素，从卵巢中收集的卵母细胞可直接与精子完成体外受精过程

B．③表示胚胎移植，重构胚发育为胚胎的过程不需要进行任何处理

C．两种后代细胞中的核DNA相同，细胞质DNA不同

D．后代B为雌性白犀牛，后代A与后代B的性别不一定相同

3 . 埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。EBO是一种负链RNA病毒，即作为基因组的RNA进入细胞后必须先产生出与之互补的RNA，后者才是mRNA。
(1)EBO的病毒中必须有___酶，因为该酶是其宿主细胞中没有的又是病毒核酸复制必需的。而mRNA是___过程产生该酶的模板。
(2)以GP作为疫苗比减毒疫苗___（填“安全”或“不安全”），原因是___。
(3)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的___细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是___。
(4)为了从羊奶中分离纯化GP蛋白，科研人员将GP蛋白基因通过___（方法）导入___中，基因的首段必须含有使其仅能在羊的___中特异性表达的___。若用抗GP抗体检测早期胚胎培养液，正确的检测结果应该是___（填“阳性”或“阴性”），为了确认目的基因转化成功，需要进一步提取体外培养至___时期的胚胎的___细胞的DNA，用___技术进行检测。

4 . 在体细胞克隆猴的培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10 s之内对卵母细胞进行去核操作，在15 s之内将体细胞注入去核的卵母细胞。有评论者认为该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，请结合图示回答问题。   

注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，二者可以调节基因的表达，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。
(1)采集卵子之前，需给母猴注射适量的_____，以增加排卵。卵母细胞需培养到_____期，再通过_____法去除细胞核，得到去核卵母细胞。
(2)重构胚的发育类似正常的早期胚胎发育，培养液的成分除了有机盐、氨基酸、无机盐等营养物质以外，还需添加_____。代孕母猴对移入子宫的重构胚_____，这为胚胎在受体内的_____提供了可能。
(3)胚胎移植的实质是_____。胚胎分割可以增加胚胎数量，在对囊胚进行分割时要注意_____。

5 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。图1、2、3分别是牛胚胎移植、早期胚胎培养及克隆羊培育图，请据图完成下列问题：

   

(1)在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有________、________（至少写出两项）。
(2)与受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②核膜消失，雌、雄原核融合，形成合子；③精子释放多种酶；④精子入卵，卵细胞膜发生生理反应，拒绝其他精子进入卵内；⑤雌雄原核形成。正确的顺序为________（填序号）。
(3)图2从A到E中，适宜牛进行胚胎分割的时期有_________；
(4)胚胎移植是指将动物的早期胚胎移植到同种且___________与供体相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，该技术的实质是__________。

6 . 下列关于胚胎工程的叙述，正确的是（       ）

A．经胚胎移植的后代，其遗传特性与受体保持一致

B．用于移植的胚胎只能由优良供体通过体外受精获得

C．要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应

D．进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力

7 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的重要因素。下图为科学家设计的快速繁育良种奶牛的部分流程示意图。回答下列问题：

(1)过程①为同期发情处理，其目的是_____。
(2)受精的标志是观察到两个极体或者_____。若过程②为体内受精，则受精过程在良种母牛的_____中完成；若过程②为体外受精，则良种公牛的精子需要进行_____处理。
(3)受精卵经过程③发育为_____胚，用分割针对其进行分割时，要注意_____。图中采集的甲为_____细胞，其可用于做DNA分析、基因诊断，还可用于_____等。

8 . 人乳铁蛋白广泛分布于乳汁等外分泌液中，在初乳中含量较高，对细菌、真菌和病毒等有抑制作用。下图表示利用基因工程技术构建人乳铁蛋白基因重组质粒的过程（图中Tet＇表示四环素抗性基因，Amp＇表示氨苄青霉素抗性基因），五种限制酶的识别序列及切割位点如下表所示。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	G↓GCC CCG↑G	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG

(1)要将人乳蛋白基因插入载体中，若只允许使用一种限制酶切割质粒，应选择的限制酶是______。基因工程技术中通常选择______种限制酶进行酶切，目的是______。
(2)人乳铁蛋白基因可利用PCR技术进行扩增，扩增需要引物______（在“Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ”中选择），连续扩增5次后至少需要引物______个。
(3)据图分析，成功获得含有人乳铁蛋白基因的重组质粒需要再含有______（填“四环素”或“氢苄青霉素”）的培养基上进行筛选，然后将需要的重组质粒导入牛的受精卵，再利用______工程技术获得转基因小牛。
(4)检测人乳铁蛋白基因是否成功翻译常采用______技术，若______，则表明目的基因已翻译形成蛋白质。
(5)对比大肠杆菌，转基因动物作为生物反应器生产人乳铁蛋白更具有优势，其理由是______。

9 . 单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（       ）

   

A．为使A野化单峰骆驼超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素

B．为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术

C．卵裂期，胚胎的总体积不增加，但有机物总量增加

D．若①表示体外受精，可用B野化单峰骆驼的获能的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用

10 . 为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。请根据图示信息回答：

(1)体内受精时，牛的精子和卵细胞正常在___中完成受精作用，并逐渐形成胚胎。为了提高已有胚胎的利用率，可采用___技术。
(2)在受精的过程中，判断卵子是否受精的标志是___。
(3)试管牛E的培育属于___（“有性繁殖”或“无性繁殖”）；试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养、___。克隆牛F的培育依据的原理是___。
(4)若培育转基因牛，如生产生长激素的乳腺生物反应器。科学家需要将___和乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，再通过显微注射法导入牛的受精卵中。