12. 接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一,新冠病毒疫苗有多种,我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(重组疫苗)是一种基因工程疫苗。右图是构建含新冠病毒S蛋白(抗原)基因的重组腺病毒表达载体的过程,箭头表示Nco I、Sph I、Nhel、BamHI的酶切位点(四种酶的识别序列详见下表)。请回答下列问题:
限制酶 | Nco I | Sph I | Nhe I | BamHI |
识别序列和切制位点 | C↓CATGG | CCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
(1)获取目的基因:新冠病毒是RNA病毒,一般先通过
_______得到cDNA,再经PCR技术获取大量S蛋白基因,PCR技术是
________。
(2)为使重组质粒构建过程顺利进行,需先使用限制酶
_____和
_____切割质粒,选用两种限制酶对新冠病毒的S蛋白基因和质粒进行切割的目的是
_______(答出1点即可)。
(3)扩增含S蛋白基因的重组腺病毒:腺病毒为DNA病毒,对人体无害,需要利用技术手段将上面得到的重组质粒整合到
_______中,然后培养一种称之为293的细胞,让这种重组病毒侵染这些细胞,同时使用
_______方法检测有无S蛋白的产生,若有,则证明S蛋白基因成功表达,重组腺病毒可以用作疫苗。
(4)人体接种腺病毒重组疫苗后,S蛋白基因经
_______表达出S蛋白抗原,诱导机体通过
________免疫产生抗体。重组疫苗只需注射一针即可完成接种。数周后接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA。请由此推测只需注射一针即可起到免疫保护作用的原因是
________。
(5)综合上述信息,重组腺病毒载体疫苗是安全的,判断的依据是
_________。