【推荐1】糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年上升的趋势，治疗糖尿病少不了胰岛素。如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径，据图回答下列问题：

（1）科研人员用显微注射技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，细胞A应该是_____________。
（2）科研人员用DNA分子杂交技术检测胰岛素基因是否整合到转基因羊的DNA上，以_____________作为探针，使探针与羊基因组的DNA杂交，如果显示出___________，就表明胰岛素基因已插入染色体DNA中。
（3）莴苣为双子叶植物，受体细胞B应该是莴苣的___________（填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵”），过程②常用的方法是___________。导入该细胞后，需对该细胞进行组织培养，经_____________过程形成愈伤组织。
（4）图中过程③是先将受体细胞A培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到经过________处理的受体母羊子宫内。目前对动物细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，因此，在胚胎的早期培养中，通常还需要添加_____________等成分。
（5）若该转基因“胰岛素羊”乳汁中检测到胰岛素，其乳腺细胞分泌的胰岛素与转基因“胰岛素细菌”产生的胰岛素相比所具有的优点是_______________________，其原因是___________________________________。

【推荐2】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，具体操作流程如下：

请回答下列问题：
（1）从良种母羊体内的输卵管采集的卵母细胞处于____________期，此时采集的卵母细胞______（填“能”或“不能”）直接与获能的精子在体外受精。
（2）为了使hPA基因顺利在羊的乳腺细胞中表达，要将hPA基因与____________等调控组件重组在一起，通过____________法导入羊的受精卵，然后将受精卵移入发育培养液中培养，为防止杂菌污染，培养液中需要加入______。
（3）受精卵经过卵裂可以发育成早期胚胎，在胚胎发育的______阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能。
（4）将早期胚胎置入代孕母羊子宫之前需对其做______处理，这就为早期胚胎移入代孕母羊体内提供了相同的生理环境。

【推荐3】1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产量最高纪录。科学家希望利用体细胞核移植技术克隆卢辛达，加速优良品种奶牛的繁育，请结合图回答下列问题：

（1）取卢辛达的耳部组织，用________________将组织块分散成单个细胞。再用培养液稀释制成细胞悬液，置于CO₂培养箱中进行培养，CO₂的作用是__________________。培养时细胞增殖还表现出_______________和接触抑制等现象。
（2）用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成_____________和______________，最终形成重组胚胎，优良品种奶牛的克隆成功，说明了动物____________具有全能性。
（3）牛的早期胚胎通常要发育到____________阶段才进行移植。移入当地普通黄牛子宫内的胚胎之所能够存活，是因为______________________________ 。
（4）克隆出的犊牛与卢辛达奶牛的性状基本相同，但不是百分百的复制，原因是______________________________。（答出两点即可）

【推荐1】如图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答下列问题:

（1）方法2获得的小牛的遗传物质来源于_______________。方法1和方法2更容易获得克隆动物的是___________。方法3获得的①②中的遗传物质是否相同___________（“是”或“否”）。
（2）细胞B来自囊胚的_________，供体3提供__________细胞。
（3）胚胎移植是克隆动物的最后一道工序，受体能为供体的胚胎提供相同的生理环境，依据的生理学基础是______________________。
（4）世界卫生组织解释克隆为“遗传上同一的机体或细胞系（株）的无性繁殖”。你认为在细胞工程、胚胎工程中哪些技术也属于克隆?_______________________（至少答出三个）

【推荐2】人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中 Tetr 表示四环素抗性基因，Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
识别序列及切割位点

(1)一个基因表达载体的组成必须有启动子、复制原点、____________________等。若选用牛作为转基因动物可将____ 基因与 ______ 基因的启动子等调控组件重组在一起，可通过__________方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。
(2)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含____________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_______________________________。
(3)要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是________________，若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端与 BclⅠ酶切的 DNA 末端连接起来，连接部位的 6 个碱基对序列为__________________________，对于该部位，这两种酶____________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。
(4)培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好，形态正常的_______胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。
(5)若利用转基因大肠杆菌（工程菌）则不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为______。

【推荐3】人凝血酶Ⅲ是一种分泌蛋白，可预防和治疗急、慢性血栓。为高效生产人凝血酶Ⅲ，某兴趣小组提出了两种方法，如图所示。回答下列问题：

(1)方法一中，一般选择_________法将获取的人凝血酶Ⅲ基因导入受精卵中，培养获得早期胚胎后，可采用______技术以提高胚胎利用率，并切去部分滋养层细胞做性别鉴定，选取______（填“雌性”、“雄性”或“雌性和雄性”）胚胎以用于后续培养并生产人凝血酶Ⅲ。
(2)早期胚胎能够在受体奶牛体内存活并发育，其免疫学基础是_______。
(3)方法二通过基因工程生产人凝血酶Ⅲ，该方法的核心步骤是___________。该方法选择大肠杆菌作为受体细胞，是因为大肠杆菌具有__________________（答出2点）等特点。
(4)小组成员中有人对方法二提出疑问，他认为将人凝血酶Ⅲ基因导入大肠杆菌中不能获得活性高的人凝血酶Ⅲ，其依据是______。

【推荐2】西红柿怕冻，生活在寒带的比目鱼却因体内有一种抗冻蛋白质而不怕冻。科学家将比目鱼的抗冻蛋白质基因转移到西红柿里，培育出了抗冻西红柿。这种西红柿可以在冬季或较寒冷的地区种植，一年四季都能获得西红柿。下图为培育转基因抗冻西红柿的过程示意图。据图回答下列问题：

(1)通过过程①可以构建该种比目鱼的__________文库。该文库与其基因组文库相比，基因的结构中缺少__________。
(2)过程②要用SmaⅠ限制酶切割抗冻蛋白质基因和质粒，所需的DNA连接酶是__________（“E·coli DNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）。
(3)过程②构建的重组质粒通过农杆菌的__________作用，使抗冻蛋白质基因进入西红柿组织细胞并插入到__________上，此过程有利于目的基因的__________。
(4)过程③④所属细胞工程技术及其原理是__________。
(5)针对转基因产品，我国制定了很多法规，既维护了消费者对转基因产品的__________的权利，又保证了转基因技术和已上市的产品的安全性。

【推荐3】图（a）中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的）。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）经BamHⅠ酶切后得到的目的基因（干扰素基因）可以与图（b）中表达载体被____酶切后的产物连接，理由是________。
（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组DNA，如图（c）所示。甲、乙、丙三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_____，不能表达的原因是____。

（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____。
（4）为了得到实验所需的大量干扰素基因，研究人员利用PCR 技术进行扩增，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_______作为引物。若要将1个干扰素基因PCR扩增10 轮，则需要在缓冲液中至少加入______个引物。

（5）为检测干扰素基因是否表达，可以采用_______的方法。