2 . 我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型。其中BMAL1基因敲除猴的基本构建流程如图所示。回答下列相关问题：

   

(1)采集猕猴卵母细胞，在体外培养到____期才去核，去除的“核”实际上是指____。除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、____和化学物质处理等方法去核。
(2)核移植成功后，用物理或化学方法激活重构胚，目的是____。
(3)一次核移植技术后，需要获得更多的基因敲除猴，可在囊胚期对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意____。
(4)不考虑基因突变，利用A6的成纤维细胞进行克隆获得的多只第二代基因敲除猴的基因型____（填“相同”或“不相同”）。与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是____（写出1点即可）。

3 . 胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛。请据图回答下列问题：

(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于______、______，细胞B的名称是______。
(2)应用2中牛完成体内受精的场所是______，胚胎移植后可以通过胎盘从母体获得正常发育所需要的物质。这种产生试管牛的方法中，采用的胚胎工程技术有______、______（至少答出2种）等。
(3)应用3中获取的胚胎干细胞简称______细胞。还可以在骨髓、外周血、脐带血中获取______干细胞。通过科学家的体外诱导成纤维细胞，还可以获取______细胞（简称iPS细胞）。
(4)应用4中通过______技术获得二分胚①和②，同时，可以通过取样______细胞进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对______的分析进行性别鉴定。

4 . 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图，请回答下列问题：

(1)黑鼠体细胞培养，培养装置应置于__________中培养。培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为_______________。
(2)图中2细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得；也可用__________处理灰鼠，从灰鼠体内取出更多卵子，再通过体外受精后进行早期胚胎培养获得。
(3)图中重组囊胚通过__________技术移入白鼠子宫内继续发育，此技术对代孕受体的要求是__________。若想进一步提高胚胎的利用率，可采用____________技术。
(4)小鼠胚胎干细胞(简称ES细胞)可由囊胚的_______________分离培养获得。

5 . 我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如下图所示，请分析回答：

   

(1)体外培养动物细胞时，首先应保证其处于______的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是______。
(2)用促性腺激素对雌性小鼠进行______处理可得到大量卵母细胞。
(3)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应在体外培养到______期，得到的重构胚通常需要发育到______阶段才能进行胚胎移植。可利用______的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠。
(4)ahESC与精子和去核卵母细胞融合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是______。
(5)据图分析只依赖雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断。理由1：______；理由2：______。

6 . 在家畜优良品种繁育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述正确的是（       ）

A．采集的卵母细胞要经过获能处理后才能完成受精

B．当胚胎发育到适宜阶段时可在液氮环境中冷冻保存

C．胚胎移植前需要对受体进行选择和免疫抑制处理

D．运用胚胎分割技术可以提高胚胎移植的成活率

7 . 我国绒山羊所产的羊绒因品质优秀被誉为“软黄金”而畅销全球。胸腺素β4（Tβ4）是动物体内一种分布广泛的多肽，可促进动物毛发生长。研究者利用基因编辑技术将Tβ4基因定点整合到绒山羊基因组中，获得新型绒山羊，部分操作过程如图所示。请回答下列问题：

(1)利用PCR技术可获取和扩增T94基因。PCR反应体系中除含有缓冲液、模板DNA、原料、引物外.还应含有____酶；在PCR过程中引物结合在模板链的____端。
(2)利用引物组合2和3____（填“能”或“不能”）鉴定Tβ4基因插入位点，可利用____方法进行鉴定。
(3)获得的重构胚通常需要继续培养至____阶段再将其移植到受体中，该过程能成功进行的生理基础是____。
(4)若要同时获得多只与此转基因母羊相同的羊，可对早期胚胎进行____，操作若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意____。

8 . 下图是转乳糖酶基因试管牛和克隆牛的培育过程，回答下列问题：

(1)细胞1为_________，是动物基因工程中常用的受体细胞，可通过_________法导入目的基因，基因工程的核心步骤是_________。
(2)胚胎移植前需要将细胞1在发育培养液中培养成胚胎，培养时的气体环境条件为_________。胚胎移植前可对早期胚胎进行胚胎分割和性别鉴定，性别鉴定一般用发育到囊胚期的细胞，对囊胚期胚胎进行分割时，要注意将_________均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(3)克隆牛的培育是通过__________技术实现的，属于____________（填“有性”或“无性”）生殖。从进化角度分析，试管牛相比于克隆牛的优势是__________。
(4)有人提出，克隆动物的培育技术已经逐渐成熟，是时候将其应用于培育克隆人了，你是否赞同这种观点?______________。对于克隆，中国政府的态度是_________

9 . 胚胎工程具有多方面的应用，通过该技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力；如图为体外受精和胚胎移植技术繁殖奶牛过程，据图回答下列问题：

(1)A 细胞必须发育到_____时期才能与获能的精子受精，受精的标志是_____。
(2)图中①处细胞名称是_____，也可从 ① 分离胚胎干细胞，胚胎干细胞存在于_____中，它的功能特点是_____；若对该时期的胚胎进行分割需要注意_____，这样做的目的是_____。
(3)图中涉及的胚胎工程技术有_____（至少填三项）。
(4)对接受胚胎的个体需要选择_____个体作为受体，在移植前要经过_____。

10 . 绿色荧光蛋白在紫外线的照射下能发出绿色荧光，下图表示转绿色荧光蛋白基因（Gfh）小队的培育过程，图中Neo基因编码的产物能分解G418。G418是一类对原核细胞和真核细胞都有毒性的抗生素，请回答下列有关问题：

(1)①过程将绿色荧光蛋白基因与运载体连接起来利用的工具是______。
(2)可以从______中提取胚胎干细胞，③过程胚胎干细胞培养需要的条件有______（答出2点即可）。
(3)⑤过程应把转基因胚胎干细胞导入囊胚的______，为了获得多只小鼠c，⑥过程的操作是______，该过程的操作要求是______。
(4)让转基因干细胞与这些细胞一起发育成胚胎，若幼鼠______，则说明Gfp基因在幼鼠体内成功表达。
(5)据图分析，Neo基因在转基因绿色荧光小鼠的培育过程中发挥作用的机理是______。