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1 . 狂犬病是由狂犬病病毒(RABV)感染中枢神经系统引起的传染病,人和动物感染后一旦出现临床症状,死亡率几乎100%。当前,接种疫苗和抗体注射是预防狂犬病最为有效的途径。RABV是一种RNA弹状病毒,RABV-G(病毒表面糖蛋白)是RABV诱导机体产生抗体的唯一抗原,利用基因工程技术可获得重组RABV-G蛋白(rRVGP)的亚单位疫苗,并制备相应的单克隆抗体。回答下列相关问题:
(1)在国内外研究中,rRVGP已经在多种细胞系统中实现了合成。在昆虫细胞系统中获取疫苗过程如下:
①提取病毒的RNA进行RT-PCR,即将病毒RNA经过______ 过程获得cDNA,并对cDNA进行PCR扩增。RT-PCR过程中需要加入的酶有______ 。
②利用______ 进行核酸分子杂交或利用______ 技术鉴定PCR产物以检测是否获得正确的目的基因。
③待用②中后者方法鉴定结束后,用刀片切割______ 并回收目的基因,从而达到提纯的目的。 接着将纯化得到的目的基因与特定质粒酶切连接,再利用______ 法将重组DNA分子导入果蝇S2细胞,待表达后破碎细胞,最后利用______ 技术对rRVGP进行检测。
(2)2023年诺贝尔生理学或医学奖颁布给了两位在mRNA疫苗上做出突破性贡献的先驱。在狂犬病的预防中,同样也可以使用mRNA疫苗,但缺陷是机体缺少______ (填“RNA聚合酶”或“DNA聚合酶”),使得mRNA进入细胞后不能在体内持续产生大量抗原,且mRNA在体内容易被降解。对此研究人员研制出一种自扩增RNA(saRNA)疫苗,即在mRNA中加入一段可复制的序列,并对mRNA5'端加帽,3'端加尾部修饰,使其能在机体内稳定存在。相比于传统的mRNA疫苗,saRNA疫苗还具有的优点是______ 。
(3)RABV-G的单克隆抗体制备及鉴定。过程如下:
①将RABV-G作为抗原对小鼠多次注射后,从脾脏中分离出小鼠的B淋巴细胞与可以______ 的骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基对融合细胞进行筛选。
②对筛选后的细胞进行______ 培养和抗体检测,最后获得所需的杂交瘤细胞。
③将获得的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养或体外培养获得单克隆抗体。
(4)除了利用细胞融合技术制备单克隆抗体,还可以利用转基因动物乳腺生物反应器生产单克隆抗体。过程如下:
①体外获取单克隆抗体的基因后,将该基因插入到乳腺细胞特异性表达的乳清酸性蛋白(WAP)基因组中,为减少后续分离单克隆抗体的难度,可对原WAP基因进行______ ,但必须保留原有的启动子和调控序列,且插入的位点在调控序列下游,以保证基因的正确表达。
②将上述重组基因导入哺乳动物细胞,通过同源重组技术获得经转化的细胞。
③将符合要求的细胞的细胞核植入_____ ,从而形成融合细胞。将融合细胞进行______ ,一段时间后植入雌性动物代孕体,直到母体分娩出转基因动物。
④待个体长大后,从乳汁中分离纯化RABV-G单克隆抗体。
(1)在国内外研究中,rRVGP已经在多种细胞系统中实现了合成。在昆虫细胞系统中获取疫苗过程如下:
①提取病毒的RNA进行RT-PCR,即将病毒RNA经过
②利用
③待用②中后者方法鉴定结束后,用刀片切割
(2)2023年诺贝尔生理学或医学奖颁布给了两位在mRNA疫苗上做出突破性贡献的先驱。在狂犬病的预防中,同样也可以使用mRNA疫苗,但缺陷是机体缺少
(3)RABV-G的单克隆抗体制备及鉴定。过程如下:
①将RABV-G作为抗原对小鼠多次注射后,从脾脏中分离出小鼠的B淋巴细胞与可以
②对筛选后的细胞进行
③将获得的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养或体外培养获得单克隆抗体。
(4)除了利用细胞融合技术制备单克隆抗体,还可以利用转基因动物乳腺生物反应器生产单克隆抗体。过程如下:
①体外获取单克隆抗体的基因后,将该基因插入到乳腺细胞特异性表达的乳清酸性蛋白(WAP)基因组中,为减少后续分离单克隆抗体的难度,可对原WAP基因进行
②将上述重组基因导入哺乳动物细胞,通过同源重组技术获得经转化的细胞。
③将符合要求的细胞的细胞核植入
④待个体长大后,从乳汁中分离纯化RABV-G单克隆抗体。
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5次组卷
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2卷引用:浙江省杭州市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
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解题方法
2 . 前段时间,甲流肆虐,可用甲流抗原试剂盒自测是否患有甲流,其原理如下图。结合垫处含有足量的、可移动的、与胶体金结合的抗体1,T处固定有抗体2,抗体1和抗体2与甲流病毒表面同一抗原蛋白的不同位点发生特异性结合,导致胶体金大量聚集使相应位置呈红色。C处固定有抗体1的抗体。请根据以上信息判断以下叙述错误的是( )
A.若检测结果为阳性,则检测过程中特异性结合共发生3次 |
B.若待测样本中不含甲流病毒,结果为C、T处都不出现红色 |
C.若显色结果为只有T处出现红色,则结果不可靠 |
D.若显色结果为只有C处出现红色,则结果为阴性 |
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5次组卷
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2卷引用:浙江省杭州市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
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3 . 非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难,我国科学家经过反复实验首次成功获得了克隆猴“中中”和“华华”。培育克隆猴的流程如图所示,其中Kdm4d表示组蛋白去甲基化酶,TSA表示组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列相关叙述错误的是( )
A.去核操作其实是去除卵母细胞中的染色体—纺锤体复合物 |
B.用灭活的仙台病毒处理可使细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子重新排布 |
C.为避免胚胎移植后出现免疫排斥反应,需提前给代孕母猴注射免疫抑制剂 |
D.注入Kdm4d的mRNA和用TSA处理,可影响重构胚中相关基因的表达 |
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4 . 细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料,回答下列问题。
I:为降低宫颈癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体药物偶联物(ADC),以便精准治疗。过程如图1所示。(1)本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自____ ;体外培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞时,培养液需额外添加____ 天然成分以及通入一定浓度CO2的目的是____
(2)取小鼠的脾脏获得B淋巴细胞时,需要用____ 制成单个细胞,这类细胞会贴附在培养瓶的瓶壁上,这种现象称为____ 。
(3)过程①诱导细胞融合常用____ 方法(动物细胞融合所特有),过程③筛选的杂交瘤细胞有什么特点____ 。
(4)研究发现,ADC在患者体内的作用如图2所示。①ADC能降低宫颈癌治疗药物的副作用,是因为单克隆抗体能精确地定位宫颈癌细胞,该过程的原理是____ 。
②根据图2,尝试解释ADC的作用机理:ADC进入宫颈癌细胞后,细胞中的____ 释放水解酶可将其水解,释放出的药物最终作用于____ ,可导致癌细胞凋亡。
I:为降低宫颈癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体药物偶联物(ADC),以便精准治疗。过程如图1所示。(1)本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自
(2)取小鼠的脾脏获得B淋巴细胞时,需要用
(3)过程①诱导细胞融合常用
(4)研究发现,ADC在患者体内的作用如图2所示。①ADC能降低宫颈癌治疗药物的副作用,是因为单克隆抗体能精确地定位宫颈癌细胞,该过程的原理是
②根据图2,尝试解释ADC的作用机理:ADC进入宫颈癌细胞后,细胞中的
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解题方法
5 . 肺癌是生长在气管、支气管、细支气管包括肺泡组织的一种恶性肿瘤。癌症的治疗过程会出现各种副作用,为降低肺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体药物偶联物(ADC),过程如下图所示。下列叙述错误的是( )
A.本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自人的肺癌细胞 |
B.图中参与融合的A细胞是已免疫的B淋巴细胞 |
C.图中a代表治疗肺癌的药物,b代表单克隆抗体 |
D.ADC能选择性杀伤肿瘤细胞 |
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6 . 抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程如图所示。回答下列问题。(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是____ 。在培养箱中还需通入混合气体,其中CO2的主要作用是____ 。
(2)与诱导植物原生质体融合的方法不同,获得乙可采用____ 诱导法;由于细胞融合是____ 的,细胞乙会有3种类型;通过首次筛选获得的丙是____ 细胞;在二次筛选中,将丙接种到96孔板,进行____ 培养,再利用____ 技术检测每孔中的抗体,最终筛选出细胞丁。
(2)与诱导植物原生质体融合的方法不同,获得乙可采用
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7 . 科研人员将抗癌药物连接在单抗上制成“生物导弹”用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是“杀伤性弹头”,下列叙述不正确的是( )
A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成 |
B.“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成 |
C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能 |
D.“生物导弹”的制备应用了动物细胞培养及动物细胞融合技术 |
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8 . 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,患者乳腺上皮细胞的人表皮生长因子受体2(HER2)呈阳性。抗体-药物偶联物(T-DM1)是抗HER2的靶向治疗药物,由曲妥珠单克隆抗体、细胞毒性药物DM1通过连接物偶联形成。下图表示曲妥珠单克隆抗体的制备过程以及T-DM1的作用机制,其中①~⑤表示过程,请回答下列问题:(1)过程①注入HER2的目的是__________ 。
(2)过程③需用特定培养基选择培养,使__________ 死亡,从而获得细胞2。
(3)过程④进行__________ 和__________ ,最终筛选出的细胞3是__________ 。
(4)图中T-DM1进入机体后,其中曲妥珠单克隆抗体的作用是__________ ,然后T-DM1通过__________ 方式进入乳腺癌细胞,释放出的DM1的作用是__________ 。
(2)过程③需用特定培养基选择培养,使
(3)过程④进行
(4)图中T-DM1进入机体后,其中曲妥珠单克隆抗体的作用是
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9 . 抗PD-L1单克隆抗体能与骨髓瘤细胞膜表面的PD-L1特异性结合,因而具有治疗某些癌症的作用。图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图,下列叙述错误的是( )
A.在分离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1进行免疫处理 |
B.多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞的融合细胞 |
C.图中细胞集落a~d都能大量增殖,但不一定都能产生抗体 |
D.图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体 |
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10 . 下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:(1)图1所示过程所用的生物技术有____________ 和___________ ,将特定的抗原注入小鼠,需在一定时间内间隔注射3次以上,其目的是___________ 。
(2)将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中,至少要进行两次筛选,一次是通过_________ 培养基,筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过________________ 检测,筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(3)培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用________________ ,杂交瘤细胞体外培养过程中,为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,常采取的措施是_______________ 。
(4)图2中的早期胚胎发育到___________ 阶段才可以移植,在移植之前,需要进行质量检查,用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是_________ 。为了获得多个基因型相同的优质奶牛,可采用的技术手段是___________ 。
(2)将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中,至少要进行两次筛选,一次是通过
(3)培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用
(4)图2中的早期胚胎发育到
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