【推荐1】膀胱生物反应器是利用转基因技术，将外源基因导入动物基因组中并定位表达于膀胱特定组织，在动物的尿液中提取具有重要价值产品的转基因动物的总称。A蛋白是人体中具有重要调节功能的蛋白质，下图表示利用膀胱生物反应器生产A蛋白的技术流程。回答下列问题：

(1)将图中A蛋白基因导入受精卵中最常用的方法是___________，进行①过程前需要构建基因表达载体，完整的基因表达载体包括启动子、____________等，启动子是___________片段，它是___________的部位，构建基因表达载体时，应将A蛋白基因与___________的启动子重组在一起。
(2)②过程需要将受精卵在体外培养至___________期才可以进行③过程。③过程指___________。进行该过程前，代孕母体的处理及生理状况是___________。
(3)膀胱生物反应器A蛋白的产量比乳腺生物反应器A蛋白的产量_____________（填“高”或“低”），原因是___________。

【推荐2】（现代生物科技）用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片段，利用特定技术在该DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
第三步：将插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示：

（1）第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是_____。neo^R基因不仅能使靶基因失活，还是_____；“靶基因失活”的含义是_____
（2）从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有_____、_____、_____等。
（3）科学家可以通过‘“基因敲除”技术来治疗疾病，上题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因功能并说明原因，_____。

【推荐3】为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，回答下列问题：
   
(1)试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有____________。
(2)从B牛体内获得的卵子，需要培养到_____________（填时期）才能和获能的精子结合完成受精。胚胎移植后需要对____________检查，E牛的性别可能是____________。
(3)卵细胞去核的方法普遍使用的是__________，“去核”实质上是去除_________。用于核移植的供体细胞一般选择传代10代以内的细胞，原因是_____________。
(4)方法1中，若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对囊胚阶段的胚胎进行分割，分割时应注意____________。
(5)某农场对牛进行同期发情处理，统计结果如下表。

两种同期发情方法的同期化结果比较
方法	处理牛数量/头	处理48h后发情牛数量/头
方法1（PGF法）	9	5
方法2（孕酮+PGF法）	9	6

①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供____________。
②与方法1相比，方法2的优点是_____________。

【推荐1】将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 请根据以上图表回答下列问题。

表1

引物对A	P1AACTGAAATGTAGCTATC P2TTAAGTCCATTACTCTAG
引物对B	S1GTCCGACTAGTGGCTGTG S2AGcTGGcGTTTAGcCTcG

表2几种限制酶识别序列及切割位点表

限制酶	AluI	EcoR I	Pst I	Sma I
切割位点	AG↓CT TC↑GA	G↓AATTC CTTAA↑G	CTGCA↓C G↑ACGTC	CCC↓GGG GGG↑CCC

(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是_____。
(2)PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_____。
(3)为将外源基因转入马铃薯，图2步骤⑥转基因所用的细菌B通常为_____。
(4)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图2中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_____种DNA片段。
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_____种DNA片段。

【推荐2】请分析以下资料，并回答问题。
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的“鼠—人”嵌合抗体，用于癌症治疗。
（1）据资料甲，为扩增出大量的目的基因（牛生长激素基因）需用到PCR技术。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是____________；PCR扩增时退火温度的设定是成败的关键，如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有_______________________________。
（2）据资料甲，目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是____________________________________________；导入前需构建基因表达载体，表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等，其中启动子的作用是___________________________。
（3）据资料乙，鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与___________融合，形成____________细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用__________________诱导融合。
（4）)在制备单克隆“鼠—人”嵌合抗体过程中要进行两次筛选，第一次筛选的目的是_________________________；第二次筛选的目的是__________________________。

【推荐3】科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草井培有成转基因抗盐烟本，培育过程如图1所示，表格所示为相关限制酶识别序列及切制位点。回答下列问题:

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	A↓AGCTT TTCGA↑A

(1)表中Sau3AI酶切的DNA末端与BamHI酶切的DNA末端连接，该连接序列________(填“能”、“不能“或“不一定能")被BamHI酶识别。质粒和目的基因构建重组质粒时，应选用图1中___________两种限制酶切割。
(2)若通过PCR技术扩增抗盐基因，除了模板外还需提供____________________等物质。
(3)步骤①构建的基因表达载体，除图I中质粒所示结构外，还需具有_____________及目的基因:步骤②中需先用___________处理农杆菌以便将重组质粒导入农杆菌细胞。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，上图2表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基中除了含有农杆菌生长繁殖所必需的成分外，A培养基还需加入___________，B培养基还需加入________从而达到筛选目的。从检测筛选的结果分析，含目的基因的是菌落________(填数字) 中的细菌。

【推荐1】2018年11月一对基因编辑先天免疫艾滋病的双胞胎婴儿在中国诞生。其基因编辑免疫艾滋病的原理：CCR5基因是HIV病毒入侵机体细胞的主要辅助受体之一，通过基因敲除技术让CCR5基因失效，从而产生对艾滋病的免疫作用。该成果有望让那些感染艾滋病毒的夫妇有机会生一个能免于感染艾滋病的孩子。请回答：
(1)CCR5基因在___________(“T细胞”、“B细胞”、“T细胞和B细胞”)中能表达。
(2)医学专家首先要卵子捐献者注射___________，已获得足够数量的卵子。在体外受精前，需要对精子进行___________处理。
(3)基因敲除是把Cas9蛋白和特定的引导序列通过___________技术导入到还处于单细胞的受精卵里，使CCR5基因失效。
(4)早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→___________→囊胚→原肠胚，囊胚中的___________层细胞将发育成胎膜和胎盘。
(5)中国政府对设计试管婴儿的态度是：_________________________________。

【推荐2】2018年11月，世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿诞生。这项研究用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术即基因编辑时用约为头发二十分之一细的针把Cas9蛋白和特定的引导序列注射到受精卵中，对CCR5基因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗艾滋病病毒。请回答下列问题：
（1）艾滋病病毒的遗传物质是______，因为__________________________，所以至今还未研发出有效预防艾滋病的疫苗。
（2）基因编辑时，若要去除基因中的部分序列，则可能用到的酶有_________。
（3）基因编辑时，将Cas9蛋白和特定的引导序列注射到受精卵的方法是______，用受精卵作为受体细胞的原因是_____________________________________。
（4）基因编辑婴儿的诞生过程，用到的生物工程技术有______。该项研究引发社会各界的诸多争议，请你从伦理学角度谈谈对基因编辑婴儿诞生的看法____________________。

【推荐3】研究发现，许多癌细胞能表达PD—L1，PD—L1是一种能与T细胞上的PD—1结合的物质，它可让T细胞误认为癌细胞是自身的正常组织细胞，从而不会对癌细胞进行清除。根据这一理论开发出的PD—1抑制剂类药物——一种抗体，该抗体能阻断PD—1与PD—L1的结合，使T细胞能正常发挥作用，原理如图。临床实验证明，使用PD-1抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩，这种使用PD—1抗体治疗癌症的方法叫做癌症免疫疗法。回答问题：

（1）人体免疫系统能够及时消灭机体产生的癌细胞体现了免疫系统的____________功能。据图分析免疫细胞对癌细胞进行清除主要是___________（填“体液免疫”、“细胞免疫”）发挥作用。
（2）FBX038是PD—1经泛素化降解的通路的一个关键酶，为研究FBX038在调节T细胞抗肿瘤功能中的作用，研究者在小鼠中选择性敲除了T细胞的FBX038基因，小鼠中的T细胞种类、数量无影响。然后尝试给小鼠们移植了黑色素瘤和结直肠癌，结果敲除了FBX038基因的小鼠明显肿瘤进展更快，肿瘤浸润T细胞中PD—1水平___________（填“更高”、“更低”），由此推测，癌症小鼠模型中，FBX038基因转录水平___________（填“升高”、“下降”），体内FBX038含量___________。
（3）临床使用PD—1抗体药物应采用___________（填“口服”、“注射”）的方式，理由是_________。