红细胞含有大量的血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:
(1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,经处理并离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是_____________________ 。
②以上所述的过程为样品处理,它包括红细胞的洗涤、_____________ 、分离血红蛋白溶液。
(2)收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。
①透析的目的是_________________________ 。
②透析过程中需要用到___________________ 缓冲液。
(3)通过_________________ 法将样品进一步纯化,该方法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的。最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于___________________________ 。
(1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,经处理并离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是
②以上所述的过程为样品处理,它包括红细胞的洗涤、
(2)收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。
①透析的目的是
②透析过程中需要用到
(3)通过
更新时间:2020-08-21 10:39:06
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【推荐1】黑茶常被压缩为茯砖茶,其内的金黄色菌落俗称“金花”,主要是冠突散囊菌,其内含丰富的营养素,对人体极为有益。回答下列问题:
(1)为分离茯砖茶中的冠突散囊菌,制备马铃薯琼脂培养基→无菌水浸泡黑茶30min过滤获得菌液→取0.2mL稀释液接种在培养基平板上,在适宜条件下培养一段时间观察菌落形态并计数。由培养基的配方可知,冠突散囊菌属于______________ (填“细菌”、“真菌”或“放线菌”)。若采用稀释涂布平板法,应先做系列稀释再涂布培养,确保以10倍等梯度稀释的操作是每次均从上一个稀释倍数的试管中取1mL菌液,再加入______________ 中进行稀释,移液管使用过程中的无菌操作有______________ (答出两点即可)。
(2)冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶叶中的淀粉转化低聚糖,也能分泌氧化酶催化多酚类化合物氧化,使茶叶汤色变棕红,消除粗青味。酶催化作用的机理是_______________ ;欲将多种相对分子质量不同的酶进行分离,可用______________ 法;淀粉酶适合采用______________ 法固定化技术生产麦芽糖浆;若要模拟冠突散囊菌分解茶汤中的成分,应该采用固定化细胞技术而非固定化酶,理由是固定化细胞能____________ ,使冠突散囊菌能发生连续的酶反应,分解茶汤中的成分。
(1)为分离茯砖茶中的冠突散囊菌,制备马铃薯琼脂培养基→无菌水浸泡黑茶30min过滤获得菌液→取0.2mL稀释液接种在培养基平板上,在适宜条件下培养一段时间观察菌落形态并计数。由培养基的配方可知,冠突散囊菌属于
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【推荐2】I、乳酸菌数量是评价活性乳酸菌制品质量的重要指标。研究小组用具有乳酸菌筛选功能的MRS培养基对某品牌酸奶中乳酸菌数进行研究。将乳酸菌专用MRS培养基倒平板,每个平板接入0.1 mL酸奶样品的稀释菌液,涂布均匀。回答下列问题:
(1)为防止杂菌污染需要对培养基进行高压蒸汽灭菌,灭菌是指_____ 。
(2)梯度稀释时,应用_____ 对酸奶进行稀释。若要将样品稀释10倍,可用无菌移液管吸取5 mL酸奶样品加入盛有_____ mL稀释液的三角瓶中充分混匀。
(3)平板接种后需对培养皿进行处理,再放置在培养箱中37℃恒温培养。该小组设计三种不同的处理方案:①将培养皿置于点燃蜡烛的密闭容器内,待蜡烛熄灭后将密闭容器放入培养箱;②将培养皿直接置于密闭容器内后放置在培养箱中;③培养皿不做处理直接放置在培养箱中。为能更真实反映样品中的乳酸菌数量,应选择的处理方案是_____ (填序号),理由是_____ 。
II、如图所示为血红蛋白提取和分离的部分装置,回答下列问题。
(4)在进行第一步样品处理时首先要对红细胞进行洗涤,目的是_____ ,以利于后续步骤的分离纯化。红细胞破碎后,通过_____ 法将血红蛋白从混合液中分离出来,图甲所示为分离结果,其中_____ (填数字标号)是红色透明的血红蛋白水溶液。
(5)图乙装置可用于第二步_____ 过程,即透析12小时。
(6)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经_____ 进行纯度鉴定。
(1)为防止杂菌污染需要对培养基进行高压蒸汽灭菌,灭菌是指
(2)梯度稀释时,应用
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【推荐3】请回答下列有关生物技术实践中的问题:
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有干热灭菌、_______ 灭菌和______ 灭菌。为了避免灭菌后器皿被污染,灭菌前应该将器皿_____________________ 。
(2)果醋制作过程中起主要作用的微生物是____________ ,在制作果醋过程中,如果榨取的果汁非常浑浊,可向果汁中加入_________________ ,使之澄清。
(3)凝胶色谱分离技术中,分子量小的蛋白质最后洗脱的原因是___________________________ 。血红蛋白的提取和分离的实验中,如果红色区带_______________________ ,说明色谱柱制作成功。
(4)橘皮精油的提取之所以不采用水蒸气蒸馏法,是因为水中蒸馏会导致原料_______________ 和有效成份_________________ 等问题。
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【推荐1】某同学对“血红蛋白的提取和分离”实验进行改进和研究,实验步骤如图1所示。请回答下列问题:
(1)血红蛋白由4条肽链组成,包括_________________ ,血红蛋白因含有_______ 而呈红色,这有利于对提取过程的监测。
(2)洗涤红细胞的目的是____________________________ 。将样品稀释后转移至离心管中,离心后选取_______ (填“上层”或“下层”)暗红色的红细胞液体并将其转入烧杯中,加入5倍体积的______________ 进行洗涤。
(3)待红细胞破裂释放血红蛋白后,将得到的混合溶液充分搅拌并离心,结果如图2所示。血红蛋白分布在图2的_______ (填序号)层,用滤纸过滤,可得到含血红蛋白的滤液。
(4)将滤液装入透析袋中,可除去_______ 的杂质。
(1)血红蛋白由4条肽链组成,包括
(2)洗涤红细胞的目的是
(3)待红细胞破裂释放血红蛋白后,将得到的混合溶液充分搅拌并离心,结果如图2所示。血红蛋白分布在图2的
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【推荐2】请根据“血红蛋白的提取和分离”实验,回答下列问题:
(1)血红蛋白因含有____________ (该物质中含Fe2+)而呈红色,这有利于对提取过程进行监测。
(2)在进行样品处理时首先要使用__________ 对红细胞进行洗涤。在该过程中,若________________ 会使白细胞一同沉淀,达不到分离的效果。
(3)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入___________ 使红细胞破裂,释放出血红蛋白,再通过离心的方法将血红蛋白从混合液中分离出来。
(4)将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,透析的原理是_________________ 。
(5)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化。装填色谱柱时不能有气泡存在,因为________________________________ 降低分离效果。
(6)最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。加入 SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于_________________ 。
(7)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75),其中“75”表示_________________ ,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。
(1)血红蛋白因含有
(2)在进行样品处理时首先要使用
(3)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入
(4)将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,透析的原理是
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【推荐3】科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌,并对果胶酶进行分离纯化。请回答下列问题:
(1)配制以_______ 为唯一碳源的选择培养基,筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______________ (回答两点)等特征可进行物种鉴定。
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度 离心后, _______ (填“上清液”、“沉淀物”或“上清液和沉淀物”)即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后,可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白,在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度_______ (填“较快”或“较慢”)。
(3)在凝胶色谱柱在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象,如果发生则___________________ ,装填时不得有气泡存在,原因为气泡会________________________ 。
(4)用凝胶电泳法测定果胶酶分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是_________________ ,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(5)某一实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程中,溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温,才能加入已活化的酵母菌,原因是___________________________________ 。如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅,说明 _____________________ 。利用固定化酵母细胞进行酒精发酵,与直接接种酵母菌相比较有哪些优点?(说出两点) _______________________________
(1)配制以
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行
(3)在凝胶色谱柱在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象,如果发生则
(4)用凝胶电泳法测定果胶酶分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是
(5)某一实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程中,溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温,才能加入已活化的酵母菌,原因是
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