人内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物,由184个氨基酸组成,广泛存在于肝脏等组织中,通过抑制肿瘤血管的生成来抑制癌症的发展。我国科学家研制出含内皮抑素基因的双歧杆菌口服液。口服后,双歧杆菌在肠道定植.繁殖,双歧杆菌死亡裂解后,其产生的内皮抑素能被肠壁细胞吞噬.转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题:
(1)获取人的内皮抑素基因的cDNA应从_____ 细胞中去提取______ ,再利用_______ 方法合成。这种方法合成的cDNA与人细胞中的基因相比,结构上的主要区别是_________ 。
(2)使内皮抑素基因能在双歧杆菌中稳定存在并能表达和遗传,最关键的步骤是_________ 。由于受体细胞是双歧杆菌,常用的目的基因运载体是___________ ,重组运载体上必须具有_________________________ (填基因或序列)。
(3)科学家要对培育的双歧杆菌进行目的基因是否转录的检测,检测的方法是___________ 。
(4)病人口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液,________ (填属于或不属于)体内基因治疗。
(1)获取人的内皮抑素基因的cDNA应从
(2)使内皮抑素基因能在双歧杆菌中稳定存在并能表达和遗传,最关键的步骤是
(3)科学家要对培育的双歧杆菌进行目的基因是否转录的检测,检测的方法是
(4)病人口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液,
更新时间:2020-12-22 11:08:20
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【知识点】 基因工程综合
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【推荐1】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/6/12/38594df0-562c-466c-96ba-559cdab6532d.png?resizew=427)
(1)DNA序列经过上表中几种限制酶识别切割后,可以获得______________ 种黏性末端的DNA片段;用限制酶______________ 切割某种特殊序列的DNA片段可获得平末端的DNA片段。
(2)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,可以同时使用______________ 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA,这样处理的优点是_______________________________ 。但不可以用SmaⅠ切割,原因是________________________________ 。
(3)质粒和外源DNA构建重组质粒时,需要用到DNA连接酶,可以将双链DNA片段的平末端“缝合”的连接酶是______________ 。
限制酶 | BamH I | Hind Ⅲ | EcoR I | Sma I |
识别序列及切割位点 |
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/6/12/38594df0-562c-466c-96ba-559cdab6532d.png?resizew=427)
(1)DNA序列经过上表中几种限制酶识别切割后,可以获得
(2)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,可以同时使用
(3)质粒和外源DNA构建重组质粒时,需要用到DNA连接酶,可以将双链DNA片段的平末端“缝合”的连接酶是
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名校
【推荐2】虫草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用。研究人员培育了能合成SOD的转基因酵母菌。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/11/12/2074052657864704/2078960130605057/STEM/5980193a8d634be5a35089a589ccad9f.png?resizew=370)
注:Hind Ⅲ和ApaLⅠ是两种限制酶,箭头表示酶的切割位置。
(1)将图中的重组DNA分子用Hind Ⅲ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到____ 种DNA片段。图示的表达载体存在氨苄青霉素抗性基因,不能导入用于食品生产的酵母菌中,据图分析,可用________ 切除该抗性基因的部分片段使其失效,再用DNA连接酶使表达载体重新连接起来。
(2)作为受体细胞的酵母菌缺失URA3基因,必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,因此,图示表达载体上的URA3基因可作为____ 供鉴定和选择;为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基____ (填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。
(3)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为____ 。为了确定受体细胞中SOD基因是否转录,可用标记的____ 作探针进行分子杂交检测,分子杂交的原理是_____ 。
(4)利用蛋白质工程获得活性更高的SOD时,需根据所设计蛋白质的结构推测其____ 序列,最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经____ 获得所需的基因。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/11/12/2074052657864704/2078960130605057/STEM/5980193a8d634be5a35089a589ccad9f.png?resizew=370)
注:Hind Ⅲ和ApaLⅠ是两种限制酶,箭头表示酶的切割位置。
(1)将图中的重组DNA分子用Hind Ⅲ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到
(2)作为受体细胞的酵母菌缺失URA3基因,必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,因此,图示表达载体上的URA3基因可作为
(3)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为
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【推荐3】(一)中国女科学家屠呦呦因研制的抗疟药青蒿素挽救了数百万人的生命,而获2015年诺贝尔生理医学奖。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径,如下图所示,请回答有关问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/28/2515519552282624/2515905258438656/STEM/1219439c7e1d4ed284e11a556f7ec3e2.png?resizew=611)
(1)图中②表示_______ 过程,需要______ 作为原料。
(2)科学家发现酵母细胞中也含有FPP, 但不能直接合成青蒿素,如要培育能产生青蒿素的酵母细胞,需要向酵母细胞中导入______________________ 基因。若已知目的基因的一小段核苷酸序列,则获得该基因的方法是________ 。
(3)培育能产生青蒿素的酵母菌属于基因工程,核心步骤是_______ , 构建基因表达载体时,必须使用______ 和______ 两种工具酶。表达载体应该含有________ 酶识别和结合的部位,以驱动目的基因的转录,该部位称为________ 。
(4)为检测转基因酵母菌中的目的基因是否转录了出所需的mRNA,可采用____ 方法。
(二)2020年初,武汉出现了不明原因的肺炎,经检测是由一种新型冠状病毒(NCP)引起的,目前的检测手段主要是利用荧光PCR试剂盒或IgM 抗体快速检测试剂盒,科研人员正在加紧研制生产NCP的疫苗和探索相应抗体的制备。回答有关的问题:
(1)该病毒的遗传物质是_______ ,运用荧光PCR试剂盒对新冠病毒核酸进行检测,原理是提取病人体液样本中的RNA,进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),该过程需要_______ 酶和________ 酶。
(2)科研人员提出用康复者血清治疗新冠型肺炎,是因为康复者血清中存在_______ (填“抗原”或“抗体”),但血清成分复杂,易引起受体出现_________ ,所以该方法存在缺陷。
(3)针对血清治疗存在的缺陷,研究者从治愈患者捐献的血液中提取浆细胞,然后用___________ 诱导该细胞和骨髓瘤细胞发生融合。几经努力,最终生产出单克隆抗体,此种方法生产的抗体具有______________________ 的优点。
(4)虽说我国疫情现已得到了很好的控制,但随着各地复工复产,人员不断流动,偶尔仍会出现几例本土病例的报道,结合所学知识,请你谈一下我们该如何预防?________________________________________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/7/28/2515519552282624/2515905258438656/STEM/1219439c7e1d4ed284e11a556f7ec3e2.png?resizew=611)
(1)图中②表示
(2)科学家发现酵母细胞中也含有FPP, 但不能直接合成青蒿素,如要培育能产生青蒿素的酵母细胞,需要向酵母细胞中导入
(3)培育能产生青蒿素的酵母菌属于基因工程,核心步骤是
(4)为检测转基因酵母菌中的目的基因是否转录了出所需的mRNA,可采用
(二)2020年初,武汉出现了不明原因的肺炎,经检测是由一种新型冠状病毒(NCP)引起的,目前的检测手段主要是利用荧光PCR试剂盒或IgM 抗体快速检测试剂盒,科研人员正在加紧研制生产NCP的疫苗和探索相应抗体的制备。回答有关的问题:
(1)该病毒的遗传物质是
(2)科研人员提出用康复者血清治疗新冠型肺炎,是因为康复者血清中存在
(3)针对血清治疗存在的缺陷,研究者从治愈患者捐献的血液中提取浆细胞,然后用
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