【推荐1】大肠杆菌β­半乳糖苷酶(Z 酶)可催化底物(X­gal)水解产生蓝色物质。在 pUC18 质粒中，lacZ′ 编码 Z 酶氨基端的一个片段(称为α­肽)，该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α­肽、缺失α­肽的Z 酶片段单独存在时均无Z 酶活性，共同存在时就会表现出 Z 酶活性。利用图乙中的 DNA 片段与pUC18 质粒进行基因工程操作。

(1)限制酶能催化双链 DNA 分子中_____(填化学键名称)的断裂。本实验可使用限制酶_____处理 pUC18 质粒和图乙中的 DNA 片段，再通过 DNA 连接酶连接，获得含目的基因的重组质粒。
(2)用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有_____，在该培养基上不能生长。从功能上划分， 该培养基属于_____培养基。
(3)当上述培养基中含有 X­gal 时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为_____，这是因为目的基因与质粒连接后，使 lacZ′_____ （能、不能）合成α­肽。

【推荐2】科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄细胞的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生 长。质粒上有 PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育 过程的示意图（ampr 为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤， Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图回答问题。

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切 后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用_____限制酶，分别对__________ 进行切割，切割后产生的 DNA 片段分别为_____种。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼抗冻蛋 白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有_____________，作为标记基因。
（3）利用组织培养技术将导入鱼抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组 织培养过程中番茄组织细胞的__________过程。

【推荐3】胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射人人体后，会堆积在皮下，要经过较长时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，因此治疗效果受到影响。下图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题。

(1)蛋白质工程的目标是根据人们对________的特定需求，对蛋白质的__________进行分子设计。
(2)人工合成的新胰岛素基因在导入受体细胞前要先构建_____________，其目的是使目的基因在____________中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够___________________。在这个过程中需要_______________酶的参与。
(3)在将基因表达载体导入大肠杆菌时，一般要用___________处理该菌，使之成为____________细胞，以便吸收周围环境中的DNA分子。
(4)在大肠杆菌中直接生产的胰岛素还不具有生物活性，原因是_________________。

【推荐1】通过胚胎工程建立的转基因动物模型，常用于基因表达调控的研究、良种动物的筛选以及基因药物的产生等。制备转基因鼠的流程如图所示，请回答下列有关问题：

（1）体外受精时，人工采集的动物精子必须经过________处理才能完成图示中的①过程。
（2）在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚的上一阶段是________胚。小鼠胚胎干细胞可由囊胚的_____________分离培养获得。
（3）图示中甲为处于________________期的去核卵母细胞。以成熟体细胞为供体进行⑤过程成功率很低，而以胚胎干细胞为供体成功率会显著提高，原因是___________________。
（4）图中重组细胞需要利用______________技术培养到适宜时期才能移入另一只经____________处理、未经配种的代孕母鼠体内。

【推荐2】如图所示为利用女性甲和乙以及男性丙的遗传物质培育试管婴儿的流程图。回答下列问题：

（1）图中①过程运用了__________技术。
（2）图中②过程获得精子必须进行__________处理，才能进行③过程。精原细胞经减数分裂产生的精细胞通过变形成为精子，精细胞中的高尔基体和中转变成精子的__________。
（3）图中③过程表示受精作用，而受精的标志以及受精完成的标志分别是__________。
（4）图中④过程表示__________，所用培养基中需加入血清的主要目的是____________________。
（5）图中⑤过程表示___________________。从该试管婴儿的遗传物质来源角度分析，培育该试管婴儿可以避免__________遗传病的发生。

【推荐3】长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：
      
(1)在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到的两项技术________，把早期胚胎送入受体母牛的最佳时期是_______期。
(2)若获得的克隆牛G与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______。
(3)培育试管牛E时需对母牛B和母牛D进行_______处理，其目的是_______，以便将胚胎移至母牛D的子宫内。受体母牛必须和供体牛属于_______。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_____。

【推荐1】杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，据图回答下列问题：
   
(1)为了获得更多的卵母细胞，需用______激素对雌性杜泊羊进行超数排卵处理，过程②中产生的精子需进行获能处理，目的是_____。
(2)在受精阶段，保证一个精子和一个卵细胞结合的机制是_______和______。
(3)在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或______作为受精的标志。
(4)图中移植的胚胎处于________期，此时胚胎在发育过程中细胞_____（是/否）发生分化。为获得雌性杜泊羊，胚胎移植前需取样______，做______分析鉴定性别。为提高胚胎的利用率，尽快获得数量较多的子代杜泊羊，图中⑤过程使用______技术对胚胎进行处理，处理时要注意将内细胞团_______分割。

【推荐2】绵羊虽是第一种体细胞克隆成功的哺乳动物，但该技术体系仍然存在效率低下的问题，体外培养体系对绵羊体外胚胎发育至关重要。已有研究表明，在胚胎培养液中添加维生素C可显著提高猪体细胞克隆胚胎囊胚率，但不知对绵羊克隆胚胎囊胚率是否有影响，某兽医研究所对此进行了研究。下图为实验过程中获得重组细胞的大致过程，回答下列问题：

（1）图示实验二属于___________________移植，收集的小尾寒羊卵母细胞应培养到_______________________________（时期）进行去核，去核实际操作是用微型吸管吸出_________________________。
（2）下表分别为实验一和实验二在胚胎培养液中加入维生素C后的相关实验结果：
实验一：不同浓度维生素C对绵羊孤雌胚胎发育的影响

维生素C浓度/（µmol•L-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
0	3	120	82.80	26.47	15.73
50	3	141	82.37	28.60	20.92
100	3	99	83.89	21.70	14.34
200	3	80	85.56	22.61	12.29

实验二：维生素C对绵羊体细胞克隆胚胎发育的影响

维生素C浓度/（µmol•L-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
x	3	70	83.93	28.89	14.96
0	3	76	87.05	22.53	9.47

①题图中“孤雌激活处理”的实质是_________________________，进而能发育成早期胚胎，以便进行实验一。
②据表中数据可知，进行实验一可以为实验二提供_________________________，实验二中“x”处数据应为_________________________。
③综合实验一和实验二结果可说明_________________________。

【推荐3】下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图，请回答下列问题：

（1）若要大量获得目的基因，可使用_______________扩增白蛋白基因，通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和_____、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为___________________________。
（2）如果需要通过①采集到更多的卵子，常用的激素是____________；通过②采集的精子需___后才能进行受精作用。
⑶在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供____（气体）以维持___。
（4）为使⑤能成功进行，需要对奶山羊C进行___________处理，使之与供体的生理状况保持相同。

【推荐1】血清白蛋白可以运输脂肪酸、氨基酸，同时能维持血浆正常的渗透压。在临床上人血清白蛋白可用于治疗休克与烧伤等。下图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程，请根据所学知识回答下列问题：

（1）要获得牛组织的单细胞需要将剪碎的牛组织用___________处理。
（2）将获得的单细胞进行培养时，需要在培养液中加入一定量的_________，以防止培养过程中的杂菌污染。此外，还应_________，以清除细胞代谢产物造成的危害。
（3）用奶牛乳腺生产血清白蛋白的重要步骤之一是获取血清白蛋白基因，目前比较常用的方法有_______________________________。（至少写出2种）
（4）科学家成功将血清白蛋白基因导入牛组织单细胞中，并选用发育到MⅡ中期的卵母细胞作为受体细胞进行细胞核移植，选用该细胞的主要原因是_______________。
（5）将体外培养的胚胎植入母体中培养，还需要对受体进行_______________处理。若要获得同卵双胎或多胎，可选用发育良好的____________进行胚胎分割，然后进行移植，这种获得同卵双胎或多胎的繁殖方式属于__________（“有性”或“无性”）繁殖。

【推荐2】回答下列(一)、（二）小题：
（一）下图为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图。

(1)苹果汁的制作中可利用果胶酶提高出汁率，果胶酶可以从黑曲霉、___________等微生物中获得。利用苹果酒制作苹果醋所需的微生物是______。
(2)酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为______而又有酶活性的制剂。图是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是______。

A.实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用
B.为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌
C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行
D.固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
(3)图中①过程为获得酒精含量和糖含量较高的苹果酒，需向果汁中添加_____________。
(4)由图中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是______。
（二）科学家通过诱导黑鼠体细胞脱分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠。流程如下：

(5)从黑鼠体内获得一部分组织细胞，经过______消化，使其分散成单个的细胞，然后放入______（仪器）中保温培养。在培养过程中细胞保持生长、分裂（繁殖）乃至______和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。
(6)下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是______。

A．二倍体细胞大多具有异倍体核型

B．某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞

C．细胞克隆的最基本要求是必须来源于单个细胞

D．未经克隆化培养的细胞系细胞往往遗传性状不均一

(7)图中重组囊胚通过______技术移入白鼠子宫内继续发育。为了提高成功率，代孕母鼠也需进行激素处理，使其______。

【推荐3】I：如图所示是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列问题：

(1)方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技术有________________和________________。
(2)用激素处理的目的是使B牛____________，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到____________（填细胞分裂时期）才能与精子结合。
(3)在自然受精情况下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫做_______。卵子受精的标志是___________。将方法Ⅰ中的受精卵移入到____________中继续培养，待胚胎培养至囊胚期，可取滋养层细胞进行性别鉴定。
II：如图所示为用基因工程与胚胎工程培育良种牛的过程，请据图回答下列问题：

(4)③表示基因工程中________________________过程。
(5)用促性腺激素处理良种母牛的目的是________________________。
(6)如果转基因牛D的牛奶中含有________________________，则说明人血清白蛋白基因在个体水平已表达成功。