【推荐1】医学上常使用抗生素治疗由细菌引起的疾病。图 1 中①～⑤分别表示不同抗生素抑制细菌的作用机制，其中②表示抗生素通过损伤细胞膜从而达到抑菌的作用。字母 a、b、c 表示遗传信息的传递过程，F、R 表示不同的结构。图 2 表示该细菌细胞中某基因的表达过程。请回答：

（1）图 1 中，将 N 个细菌的 F 用 ³²P 标记后，放在³¹P 的培养液中连续分裂 m 次，含 ³¹P 标记的细菌有 _____________个。
（2）根据题意，图 1 中①表示抗生素能够抑制细菌 _____________从而起到抑菌的作用；④表示抗生素能够抑制细菌 ______从而起到抑菌的作用。
（3）细菌在正常状态下，c 过程中遗传信息的传递也会有损失，其原因是__________。
（4）图 2 中 a 过程所需的酶是_________ ，如果图中信使 RNA 对应的 DNA 片段连续复制 5 次，共需要游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸数目为__________个。
（5）在基因工程构建基因表达载体时，常用到图 1 中的 R，原因是含有多个限制酶切点， 在受体细胞中能自我复制，并且含有______________，便于筛选出含有目的基因的受体细胞。

【推荐2】烟草是有重要经济价值的双子叶植物，易受TMV(烟草花叶病毒)感染而大幅度减产。绞股蓝细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMⅤ感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMⅤ烟草，操作流程如图所示。

(1)①表示遗传信息流动中的___________过程，所需原料为___________。过程③所需要的工具酶是____________________________________________。
(2)大量扩增目的基因可以使用PCR技术，该技术包括变性、退火、延伸三个步骤，变性这一骤的目的是________________________________。
(3)过程④最常用的方法是___________，过程⑤用到的细胞工程技术是___________。
(4)过程⑥还需要进行基因工程操作步骤中的______________________，其中，在个体水平上检验获得的烟草能否抗TM的方法是_________________________________。

【推荐3】香稻以其清香可口的特色深受消费者喜爱和世界稻米市场的青睐。经研究，证实这种香气物质主要是2-乙酰-1-吡咯啉（简称2-AP）。中国农业大学徐明良课题组发现编码甜菜碱醛脱氢酶的基因Badh2抑制2-AP的生物合成。目前，研究人员采用从细菌内提取出来的CRISPR/Ca89系统对Badh2基因进行切割或导致其突变（工作原理如下图所示），可解除其对香味基因2-AP的抑制，从而增加2-AP的积累和含量。

(1)CRISPR/Cas9系统主要包含单链向导RNA和Cas9蛋白两个部分，其中向导RNA的碱基序列可以人为任意设计，当其与目标DNA（如Badh2基因）按照_________原则发生配对时，Cas9蛋白就到相应位置催化_________（化学键名称）水解，从而剪切此处的DNA序列。一般来说，在对不同DNA进行基因编辑时，应使用_______（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因编辑。
(2)构建的CRISPR/Cas9基因表达载体一般包括目的基因、_________、________终止子等。向导RNA能够识别靶基因DNA。研究发现，向导RNA的序列越短，造成编辑对象与“脱靶”的概率越大，最可能的原因是____________________。
(3)CRISPR/Cas9系统对Badh2基因进行切割后与原基因的根本区别是________。上述实例说明基因和性状的数量关系是___________。
(4)与传统育种相比，利用基因编辑技术可以有效地敲除非香型水稻中的Badh2基因，创造新型香稻品种，此方法的优势在于________。（答出1点即可）

【推荐1】科研人员将拟南芥GolS2基因导入水稻体内后，设法使该基因过量表达，产生了较多的糖类化合物，从而大大提升了植株的抗旱能力。回答下列问题：
（1）用_________________技术可以在体外大量合成拟南芥GolS2基因。
（2）科学家设法使GolS2基因在水稻体内过量表达，是科学家对运载体上的_______进行修饰的结果，该组件的功能：__________________________。
（3）为使GolS2基因整合到水稻染色体上，常将目的基因拼接到___________上，然后再通过______________方法获得稳定遗传的转基因水稻。
（4）细胞内糖类化合物含量增多就能提高抗旱能力，原因是_______________________。
（5）对导入了基因表达载体的细胞需进行组织培养，诱使细胞脱分化时需在无菌环境下进行，另外还需满足的条件为________________________。

【推荐2】回答下列Ⅰ、Ⅱ两个小题。
Ⅰ.逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。

(1)逆转录的模板是________________，原料是_________________________________。
(2)在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是________________，此过程需使用的酶是____________________________。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________________的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组逆转录病毒。
Ⅱ.如图为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题：

(3)若A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是__________________，若A为重组逆转录病毒，还可采取________________方法。
(4)小鼠出生后可从其尾巴提取_____________分子，通过____________________方法，可检测出携带目的基因的小鼠。
(5)若目的基因进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是_________________________________________。

【推荐3】RBD是新型冠状病毒表面囊膜S蛋白的受体结合域肽段。Fc为人源抗体IgGⅠ的部分重链，能通过二硫键相结合形成Fc二聚体。科研人员为研制重组蛋白疫苗，构建了融合表达RBD和Fc的重组质粒。实验流程图1如下，请回答下列问题。

(1)通过重叠延伸PCR（重叠链相互搭桥、互为模板而延伸，最终将不同来源的DNA片段拼接起来）获取融合基因。
①第一次PCR和第二次PCR的反应体系中不同的有______，第一次PCR中至少经______次扩增，可得到末端平齐且含引物2的产物；
②有关基因序列如图2，据图分析，引物1和引物4应选择下列选项的_______

A．5'CTTGTACAG-----3'
B．5'TGGTTGTGG-----3'
C．5'GCTCACCAT-----3'
D．5'CCACAACCA-----3'
③经第三次PCR获取融合基因，第三次PCR比第一次PCR延伸所需时间______（填“长”或“短”），原因是______。
(2)构建基因表达载体

分步实验目的	简易操作
酶切融合基因和质粒pCDNA3．1	37℃条件下，酶切8小时，电泳鉴定、回收；酶切位点应添加在引物1和4的①______端
获取重组质粒	将上述融合基因、质粒和②______酶一起加入反应体系，16℃反应过夜
利用大肠杆菌③______	将产物加入感受态大肠杆菌培养液，培养过夜，提取更多重组质粒

(3)将目的基因导入人胚胎肾细胞将重组质粒、聚乙烯亚胺溶液加入到状态良好的人胚胎肾细胞培养液中，培养4~5天，分离纯化融合表达蛋白，推测聚乙烯亚胺溶液的作用是______。
(4)已知RBD二聚体疫苗比RBD单体疫苗效果更优，推断重组蛋白中Fc的作用是______。

【推荐1】【选修3——现代生物科技专题】
科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO₂的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于_____（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用______ 将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的_______技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是 _______。利用PCR技术扩增目的基因时，需要加入两种引物。一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有 ____个。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_____。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是_____。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是_____
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代

【推荐3】回答下列（一）（二）小题
（一）请回答野生酵母的培养和分离及果酒制作实验的有关问题：
（1）从葡萄多年生长的环境中获取少量土样，配制成土壤稀释液，然后取0．1ml稀释液加入到______培养基中，用_____（工具）进行_____分离，最后培养得到野生酵母菌。将分离获得的菌种进行诱变培养后，根据不同菌株的____特征，分别筛选出高产谷胱甘肽酵母菌（甲）和低产硫化氢的酵母菌（乙）。实验结束后，使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉，目的是_____________
（2）成熟的紫葡萄，常用_____（A．高锰酸钾 B．次氯酸钠 C．乙醇 D．无菌水）溶液浸泡约5min，然后制成匀浆放入发酵罐中，并接种相应菌株，发酵获得高品质的葡萄酒。若向发酵罐中加入一定量的_____，可获得酒精含量和糖含量较高的果酒。
（二）某小组欲进行基因工程菌的构建与研究。请回答下列问题：
（1）获取上述高产谷胱甘肽酵母菌（甲）的DNA，经____酶处理得到DNA片段后建立______，从中获取目的基因。
（2）将目的基因与质粒构建成______，将其导入低产硫化氢的酵母菌（乙）后，经培养获取大量酵母菌，再通过分离纯化培养，根据______（A．标记基因的表达   B．目的基因的导入   C．硫化氢的含量   D．谷胱甘肽的含量）检测筛选出优良酵母菌。以上过程中的分离纯化培养相当于动物细胞______培养法。
（3）若要培养转基因植物，还需要用到_____________技术，培养过程中主要是通过________________进行调控。