【推荐2】PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，与细胞内的DNA复制相比，PCR可以快速扩增所需的DNA片段。请分析回答下列有关问题：
（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中的解旋原理是__________。
（2）此过程需要一种Taq DNA聚合酶。该酶是从____________________中分离的。
（3）与普通DNA聚合酶相比，Taq DNA聚合酶具有的特性是_______________________。
（4）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在____________中才能进行，并且要严格控制__________条件。
（5）PCR中加入的引物有___________种，加入引物的作用是___________。

【推荐3】新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S 蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的 ACE2 受体结合，侵入人体引发肺炎。请回答下列相关问题：
（1）B 细胞识别入侵的病毒后，在 T 细胞产生的______作用下，经过细胞的增殖分化形成______细胞。
（2）为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，需用到 PCR 技术，且检测时间较长，此方法是检测病毒的______；采集血液样本主要用于血清学检查，检测______，但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查，其原因是______。
（3）2021 年 2 月 25 日，由中国工程院院士陈薇团队领衔研发的我国重组新冠疫苗上市注册申请获得批准。现用实验动物检测疫苗接种后机体产生抗体的能力，有若干只健康实验动物、高纯度新冠疫苗、接种物（用于配制各种不同浓度疫苗制剂的溶液）、抗体定量检测仪器等实验材料。请回答下列相关问题：
①对照组具体操作为______。
②根据下表信息，得出接种新冠疫苗的较佳方案为______。

组别（40只）	浓度（VP）	剂量（支）	间隔时间（周）	抗体水平（相对值％）
1	4×105	2	2	94.43
2	5×105	2	2	96.26
3	4×105	2	4	97.56
4	5×105	2	4	98.87

（4）钟南山院士提出，对新冠疑似病人及时检测是切断传染源的重要手段之一。实时荧光 RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）是检测 SARS-CoV-2 有效方法之一，即提取疑似病人组织或细胞中的总 RNA，以其中的 mRNA 作为模板，采用 dT（是一种对 mRNA 特异的方法）或随机引物反转录成 cDNA.再以 cDNA 为模板进行 PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。
①在提取细胞总 RNA 时，由于细胞中物质成分复杂且 RNA 极易被酶解，所以在提取时让其与______等大分子分离和抑制______活性十分重要。
②如从疑似病人咽部获取一段如下图的 mRNA，则此 mRNA 虚线框中含有______个密码子；在翻译时，虚线框后能继续翻译的概率为______。

【推荐1】 Ⅰ．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得 免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

表 1：引物对序列表

引物对 A	P1 AACTGAAATGTAGCTATC P2 TTAAGTCCATTACTCTAG
引物对 B	S1 GTCCGACTAGTGGCTGTG S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG

表 2 几种限制酶识别序列及切割位点表

限制酶	AluⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
切割位点	AG↓CT TC↑GA	G↓AATTC CTTAA↑G	CTGCA↓G G↑ACGTC	CCC↓GGG GGG↑CCC

请根据以上图表回答下列问题：
（1）PCR 过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表 1 为根据 模板设计的两对引物序列，图 2 为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较 高的退火温度？_______________。
（2）图 1 步骤③所用的 DNA 连接酶对所连接的 DNA 两端碱基序列是否有专一性要求？______________。
（3）为将外源基因转入马铃薯，图 1 步骤⑥转基因所用的细菌 B 通常为____。
（4）对符合设计要求的重组质粒 T 进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开， 请根据图 1 中标示的酶切位点和表 2 所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用 EcoRⅠ和 PstⅠ酶切，得到_____种 DNA 片段。
②采用 EcoRⅠ和 SmaⅠ酶切，得到_____种 DNA 片段。
Ⅱ．2019 新型冠状病毒，即“COVID19”，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径 50～200 nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠， 故而得名。COVID19 基因组长度为 29．8 kb，为单股正链 RNA其 5′端为甲基化帽子，3′端有多聚腺苷酸(Po1yA)结构，可直接作为翻译模板。

（1）下列说法错误的是_______________(填字母)。
A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞， 使人患病
B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组 成一定不含蛋白质
C．病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷、一分子含氮碱基与一分子磷酸
D．此病毒的单股正链 RNA，只有转录形成对应的负链 RNA 才能附着在细胞的核糖体 上
（2）这种病毒的遗传物质为 RNA，研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用_____法。研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些 情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为____________________。
（3）病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了抗体具 有特异性，此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对 COVID19 上抗原的单克隆抗体，用到的技术有___________和___________。
（4）将 COVID19 不稳定的 RNA 转换成 DNA 后， 技术人员常采用荧光定量 PCR 技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图，在 PCR 反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某 条模板链互补的荧光探针，当 Taq 酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系 统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与 PCR 起始状态_______含量呈正相关。

【推荐2】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。请分析并回答问题：
（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过__________获取目的基因。
（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的__________处，DNA连接酶作用于____________处。（填“a”或“b”）

（3）水稻是典型的单子叶植物，将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有_______________。（写出一种即可）
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交检测导入是否成功，又要用____________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
（5）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是___________→____________→____________→____________。

【推荐3】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。

（1）为增加白细胞介素基因的数量，可使用___________________技术，但前提是必须知道该基因的部
分核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________________。
（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有___________，还应有____________________，以利于外源基因的表达。
（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用_____________处理酵母菌细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_________。在表达过程中，启动子需与____________________识别和结合，从而驱动转录过程。
（4）为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是_____________________。