甘草酸是中药甘草中的主要活性成分,为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如图一。图二是科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根培育抗鼓胀病的苜蓿新品种流程图(注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的呼吸作用,二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/9/7/2803105224007680/2806628201504768/STEM/c8d8c05fa776465cacbfc77eff0ca87b.png?resizew=593)
(1)图一中制备单克隆抗体首先需要对动物进行免疫处理,所用的抗原是________________________ 。②过程常用____________ 作为诱导剂,该诱导剂不能用于植物细胞的融合。③和④过程为两次筛选过程,这两次筛选的目的分别是____________________________________ 。细胞丁的特性是________________________ 。
(2)图二中①过程可使用____________ 作为诱导剂,也可使用____________ 等物理方法。图中③过程愈伤组织经过____________ 形成再生植株,这一过程的原理是_____________________________________ 。推测在融合后只有异源融合产物能够存活的原因是____________________________________ 。
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(1)图一中制备单克隆抗体首先需要对动物进行免疫处理,所用的抗原是
(2)图二中①过程可使用
更新时间:2021-09-12 18:02:36
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【推荐1】在肿瘤患者的治疗中,被动免疫治疗适用于肿瘤晚期患者,主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类。利用单克隆抗体和高效细胞毒类药物结合生产的药物ADC可以有效杀伤肿瘤细胞。ADC的作用机制和过继性细胞治疗相关过程如下图所示。回答下列问题:
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(1)在单克隆抗体制备过程中,初步筛选出来的杂交瘤细胞进行____________ 和抗体检测才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(2)图1所示ADC(抗体—药物偶联物)模式图中,①表示_____________ 。
(3)图2所示过继性细胞治疗中,可以用____________ (实验器材)将从肿瘤患者体内获取的多种免疫细胞一一分离,对这些分离的细胞进行单克隆培养过程中会出现分裂受阻,其原因主要有细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏,还有可能发生___________ 现象
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(1)在单克隆抗体制备过程中,初步筛选出来的杂交瘤细胞进行
(2)图1所示ADC(抗体—药物偶联物)模式图中,①表示
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【推荐2】人感染埃博拉病毒(EV)会引起致命的出血热。
(1)埃博拉病毒要入侵机体,首先需要穿过身体表面的物理屏障是______ 。
(2)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染、破坏巨噬细胞等,使其不能暴露该病毒的______ ,以致感染信息不能呈递给______ ,从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程,导致机体对该病毒的特异性免疫功能下降。
(3)EV表面的糖蛋白(EV-GP)作为______ 刺激机体产生特异性免疫反应。用EV-GP免疫小鼠,通过______ 技术获得杂交瘤细胞,用于生产单克隆抗体治疗该病。
(4)EV-GP具有多个与抗体结合的位点。为了研究两种单抗(分别称为A、B)与EV-GP结合的位点是否相同,可按图所示简要流程进行实验。
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①请将图中应使用的抗体填入表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ处(填“A”或“B”或“无关抗体”),完成实验方案(一种即可)。
②若A、B与EV-GP结合的位点不同,与对照组1、2分别比较,实验组的荧光值应______ 。
(1)埃博拉病毒要入侵机体,首先需要穿过身体表面的物理屏障是
(2)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染、破坏巨噬细胞等,使其不能暴露该病毒的
(3)EV表面的糖蛋白(EV-GP)作为
(4)EV-GP具有多个与抗体结合的位点。为了研究两种单抗(分别称为A、B)与EV-GP结合的位点是否相同,可按图所示简要流程进行实验。
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①请将图中应使用的抗体填入表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ处(填“A”或“B”或“无关抗体”),完成实验方案(一种即可)。
抗体 组别 | 未标记抗体 | 荧光标记抗体 |
实验组 | Ⅰ | Ⅱ |
对照组1 | Ⅲ | Ⅳ |
对照组2 | 同Ⅱ | 同Ⅱ |
②若A、B与EV-GP结合的位点不同,与对照组1、2分别比较,实验组的荧光值应
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【推荐3】双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。癌症的免疫疗法可通过使用双特异性抗体重新激活抗肿瘤的免疫细胞,进而克服肿瘤的免疫逃逸。PSMA是某些种类癌细胞表面高表达银蛋白,CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程,如图甲所示;双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理,如图乙所示。
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(1)与植物体细胞杂交相比,图甲中过程②特有的诱导融合方法是__________ 诱导,过程②选用的骨髓瘤细胞__________ (选填“能”或“不能”)在HAT选择培养基上生长。在细胞培养过程中除了提供营养物质外,还需向培养基中添加____________ ,并将其置于__________ 的气体环境的培养箱中进行培养。
(2)为选出能产生专一抗体的细胞,要将从HAT选择培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞·mL⁻¹,将细胞稀释液滴入多孔培养板中,使多孔培养板每孔中有________ 个细胞,然后筛选出专一抗体检测呈__________ (选填“阳性”或“阴性”)的细胞进行克隆化培养,该克隆化培养细胞具有的特点为__________________________ 。图甲方框内需要经过__________ 次筛选,才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。
(3)结合题干,据图乙分析,双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是________________ 。
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(1)与植物体细胞杂交相比,图甲中过程②特有的诱导融合方法是
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解题方法
【推荐1】同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”,但易造成家畜胀病;二倍体的百脉根因富含缩合单宁,饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线,以期获得抗胀病的新型苜蓿。(注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的呼吸作用,二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)____ 。在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度,设计思路是____ 。
(2)步骤①可采用化学法进行诱导,化学法除聚乙二醇融合法外,还有____ 法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是____ 。融合后的原生质体经过______ 再生,形成杂种细胞,进而经过②脱分化形成愈伤组织。
(3)步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上,通常应在培养基中加入的两类植物激素是____ 。长出芽后,再将其转接到诱导生根培养基上,最终得到杂种植株。得到的杂种植株,理论上是否可育?并简要阐述理由:____ 。
(2)步骤①可采用化学法进行诱导,化学法除聚乙二醇融合法外,还有
(3)步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上,通常应在培养基中加入的两类植物激素是
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【推荐2】基因工程又称为DNA重组技术,回答相关问题:
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径, 即_____ 和从生物材料中分离;分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是______ 。
(2)在基因表达载体中,启动子是_________ 聚合酶识别并结合的部位;若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是______ ;假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产,若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用__________ 作为外植体进行组织培养。
(3)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是______ 。
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径, 即
(2)在基因表达载体中,启动子是
(3)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是
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【推荐3】菊花组织培养的大致过程如图所示,回答下列问题:
(1)菊花的组织培养原理是__________________________________ 。
(2)图中B过程是____________________________ 。
(3)启动细胞分裂,B过程和C过程的关键性激素是______________________ 。
(4)愈伤组织细胞的特点是__________________________________ 。
(5)植物的微型繁殖技术常用于工厂化育苗,该项技术的主要特点是(答出两点即可)。_________________
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/8/11/b662edba-b808-41b4-9ddb-418f11334252.png?resizew=452)
(1)菊花的组织培养原理是
(2)图中B过程是
(3)启动细胞分裂,B过程和C过程的关键性激素是
(4)愈伤组织细胞的特点是
(5)植物的微型繁殖技术常用于工厂化育苗,该项技术的主要特点是(答出两点即可)。
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