Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________ 以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出________ 反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于________ 恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中________ (填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有________ 能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________ 的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中________ 培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 单克隆单体的优点是________________________ 。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入
(2)实验用骨髓瘤细胞置于
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I |
更新时间:2021-12-12 15:52:59
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【推荐1】已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用,S蛋白与人细胞膜上ACE2受体结合后,新冠病毒入侵人体细胞。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒基因疫苗,目前已获批上市。回答下列问题:
(1)制备腺病毒载体新冠疫苗时,首先需在_____ 的作用下,以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录得到S抗原基因后,利用PCR技术扩增S抗原基因的体系中需加入_____ 酶。
(2)腺病毒DNA上有_____ ,便于S抗原基因插入,S抗原基因整合进腺病毒基因组时,需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间,使S抗原基因能_____ ,从而激发人体产生抵抗新冠病毒的抗体和记忆细胞。
(3)研究人员还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从其脾脏中获取浆细胞,与骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基筛选出_____ 的杂交瘤细胞。接着经过多次筛选并在体外培养,获得针对S蛋白的单克隆抗体,该单克隆抗体最主要优点是_____ 。
(4)将新冠病毒灭活制成的灭活疫苗对预防新冠肺炎也有很好的效果,这种疫苗免疫程序是两针免疫,接种间隔为3-8周,间隔时间过长、过短都可能影响免疫预防的效果,原因可能是_____ 。
(1)制备腺病毒载体新冠疫苗时,首先需在
(2)腺病毒DNA上有
(3)研究人员还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从其脾脏中获取浆细胞,与骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基筛选出
(4)将新冠病毒灭活制成的灭活疫苗对预防新冠肺炎也有很好的效果,这种疫苗免疫程序是两针免疫,接种间隔为3-8周,间隔时间过长、过短都可能影响免疫预防的效果,原因可能是
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解题方法
【推荐2】癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞,克服肿瘤的免疫逃逸,在癌症治疗方法中取得越来越突出的地位,科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。
(1)癌细胞由于______ 基因和_______ 基因突变导致其表面物质发生改变,如某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1,如图1所示:PD-L1能抑制T细胞的活化,使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗,据图1推测,其原因是________ 。但此种方法对一些肿瘤无效。
(2)CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此,科研人员尝试构建既能结合PSMA,还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞,如图2.制备过程为:先将_______ 分别注射到小鼠体内,分离出B淋巴细胞,诱导其与小鼠的______ 细胞融合,筛选得到两种杂交瘤细胞,再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链,由于二者随机组合而产生多种抗体,因此还需进行筛选才能获得所需的_______ 。
(3)科研人员将癌细胞和T细胞共同培养,加入不同抗体,比较不同抗体对T细胞活化的作用。实验各组由活化T细胞产生的细胞因子IL-2的含量如图3所示,结果说明:①PSMA×CD28和PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞,且随________ ;②_________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/11/18/e78fc265-dc44-4b2e-9733-6f3bddac0915.png?resizew=364)
(1)癌细胞由于
(2)CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此,科研人员尝试构建既能结合PSMA,还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞,如图2.制备过程为:先将
(3)科研人员将癌细胞和T细胞共同培养,加入不同抗体,比较不同抗体对T细胞活化的作用。实验各组由活化T细胞产生的细胞因子IL-2的含量如图3所示,结果说明:①PSMA×CD28和PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞,且随
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【推荐3】Ⅰ甘蔗既是人们喜爱的一种食品,又是制取蔗糖的重要原材料。甘蔗渣除用作燃料、造纸等之外,近年来研究人员还发现有其他经济价值。回答下列问题:
(1)甘蔗渣中含有一种多酚类物质,该物质具有预防鸡和鸡蛋感染沙门氏菌的作用,因而能够降低鸡的死亡率。该物质可用萃取法提取。萃取前需将原料干燥和粉碎,干燥和粉碎目的是______ 。
(2)为了解甘蔗渣中微生物数量,称取1g甘蔗渣样品,转入99mL无菌水中,经______ 后,获得细胞密度不同的菌悬液。用______ 法将0.1mL稀释液接种于培养基上,其中104倍稀释度的菌悬液培养后平均长出了88个菌落,则每克甘蔗渣微生物数量为______ 个。
(3)甘蔗渣中富含纤维素,人们发现醋酸菌也能合成纤维素,因此筛选优良菌株可以用于工业化生产细菌纤维素。培养筛选得到的醋酸菌时,在液体培养基中加入乙醇作为______ 。经多次传代培养以获得目标菌株。此外,选育优良菌株的方法还有______ 等。
Ⅱ.通过动物细胞融合技术可以制备杂交瘤细胞,对健康的实验小鼠进行腹腔内免疫,一周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,再用特定的选择性培养基进行筛选。
(4)动物细胞融合一般用______ 进行生物诱导。
(5)正常细胞合成DNA有两条途径,a通路和b通路。骨髓瘤细胞是DNA合成b通路的缺陷型细胞株,让B淋巴细胞与其融合,在加入DNA合成a通路阻断剂(氨基蝶呤)的培养液中培养,这种培养会产生以下哪些效果______
(6)经选择性培养的杂交瘤细胞,还需要进行______ 和抗体检测,经多次筛选,可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(7)杂交瘤细胞体外培养过程是否需要添加血清?______ (填“是”或“否”)试分析原因_____ ,通过杂交瘤细胞获得的单克隆抗体的最大优点是:______ 。
(1)甘蔗渣中含有一种多酚类物质,该物质具有预防鸡和鸡蛋感染沙门氏菌的作用,因而能够降低鸡的死亡率。该物质可用萃取法提取。萃取前需将原料干燥和粉碎,干燥和粉碎目的是
(2)为了解甘蔗渣中微生物数量,称取1g甘蔗渣样品,转入99mL无菌水中,经
(3)甘蔗渣中富含纤维素,人们发现醋酸菌也能合成纤维素,因此筛选优良菌株可以用于工业化生产细菌纤维素。培养筛选得到的醋酸菌时,在液体培养基中加入乙醇作为
Ⅱ.通过动物细胞融合技术可以制备杂交瘤细胞,对健康的实验小鼠进行腹腔内免疫,一周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,再用特定的选择性培养基进行筛选。
(4)动物细胞融合一般用
(5)正常细胞合成DNA有两条途径,a通路和b通路。骨髓瘤细胞是DNA合成b通路的缺陷型细胞株,让B淋巴细胞与其融合,在加入DNA合成a通路阻断剂(氨基蝶呤)的培养液中培养,这种培养会产生以下哪些效果______
A.促进细胞融合 | B.淘汰B淋巴细胞 |
C.淘汰骨髓瘤细胞 | D.阻断杂交细胞DNA合成 |
(7)杂交瘤细胞体外培养过程是否需要添加血清?
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【推荐1】为研究多种血糖调节因子的作用,我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量,科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导iPS细胞,继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠,具体步骤如下图。请回答问题:___________ 细胞的简称。图中黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________ 过程类似。该过程结束后,细胞的全能性______ (填“提高”或“降低”)。
(2)图中灰鼠体内受精的场所是____________ 。受精过程中,阻止后来的精子进入的反应分别是__________________ 和卵细胞膜反应。
(3)本图中的重构胚通过胚胎移植技术进入代孕白鼠子宫内继续发育,X鼠的体色为_______ 。在上述技术流程中可以是雄鼠的有_________ (填图中相关鼠的名称)。
(4)胚胎移植后,重构胚进一步扩大导致透明带破裂的过程称为___________ 。
(5)为确定克隆鼠培育是否成功,须对X鼠进行__________ 的相关检测。
(2)图中灰鼠体内受精的场所是
(3)本图中的重构胚通过胚胎移植技术进入代孕白鼠子宫内继续发育,X鼠的体色为
(4)胚胎移植后,重构胚进一步扩大导致透明带破裂的过程称为
(5)为确定克隆鼠培育是否成功,须对X鼠进行
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【推荐2】近年来,由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题,导致野生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝,采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难,甚至无法完成。科研人员利用种间体细胞核移植技术(iSCNT)在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程如下:____ 、____ 。
(2)待郊狼数量增多以后,还可以采用体外受精技术或动物细胞核移植技术获得郊狼胚胎,并进行胚胎移植,进一步恢复濒危郊狼的种群数量。下列叙述正确的是____
①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时,桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时,受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
(3)与胚胎细胞核移植技术相比,iSCNT技术难度更____ ,原因是____ 。
(4)采用机械方法将郊狼早期胚胎切割后移植,可以获得同卵双胎或多胎,下列说法正确的是____
(5)从生态的角度分析,iSCNT技术的优点是____ 。
(6)生物技术在造福人类的同时也可能带来安全与伦理问题,下列有关生物技术安全性等问题的观点错误的是____
(2)待郊狼数量增多以后,还可以采用体外受精技术或动物细胞核移植技术获得郊狼胚胎,并进行胚胎移植,进一步恢复濒危郊狼的种群数量。下列叙述正确的是
①动物细胞核移植属于动物细胞工程技术
②体外受精前需要对郊狼的精子进行获能处理
③体外受精前常需要对雌性郊狼进行超数排卵处理
④胚胎早期发育时,桑葚胚内部开始出现含液体的腔
⑤胚胎移植时,受体常会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应
(3)与胚胎细胞核移植技术相比,iSCNT技术难度更
(4)采用机械方法将郊狼早期胚胎切割后移植,可以获得同卵双胎或多胎,下列说法正确的是____
A.胚胎分割时,应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚 |
B.不考虑基因突变,利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎 |
C.胚胎分割时,需将囊胚的滋养层进行均等分割 |
D.胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能 |
(5)从生态的角度分析,iSCNT技术的优点是
(6)生物技术在造福人类的同时也可能带来安全与伦理问题,下列有关生物技术安全性等问题的观点错误的是____
A.生殖性克隆人理论上增加了人类基因的多样性 |
B.生殖性克隆需要核移植技术,而治疗性克隆不需要 |
C.鉴于转基因食品安全的不确定性,应该禁止转基因食品上市 |
D.我国禁止克隆人的实验,对治疗性克隆实验也进行严格审查 |
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【推荐3】Ⅰ.某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/2/2691213503266816/2691949234028544/STEM/65a35a1ae8e84e638cb850ee21add9f5.png?resizew=387)
若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题:
(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过_____________ 次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是_____________ 小鼠,理由是_____________________________________ 。
(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有__________________________ (只考虑两两融合),体系中出现多种类型细胞的原因是______________ 。
(3)杂交瘤细胞中有_____________ 个细胞核,染色体数目最多是_________ 条。
(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是__________________________ 。
Ⅱ.为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/2/2691213503266816/2691949234028544/STEM/7032e4981b2243f3b54ad468a730fcbc.png?resizew=299)
(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为_______________ 。
(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12d后下降的原因有__________________________________ ;培养液中蔗糖的作用是____________ 、_____________ 。
(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经_______________ 处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和_______________ 酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到染色体数为8n的细胞,合理的解释是_______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/2/2691213503266816/2691949234028544/STEM/65a35a1ae8e84e638cb850ee21add9f5.png?resizew=387)
若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题:
(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过
(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有
(3)杂交瘤细胞中有
(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是
Ⅱ.为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/4/2/2691213503266816/2691949234028544/STEM/7032e4981b2243f3b54ad468a730fcbc.png?resizew=299)
(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为
(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12d后下降的原因有
(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经
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