某RNA病毒,其主要表面抗原为S蛋白,由S基因控制合成。以下为制备相关疫苗的两条途径示意图,结合所学知识回答下列问题:
(1)获取S基因时,可利用病毒的RNA在逆转录酶的作用下,合成对应的________________ 分子,再通过________________ 技术扩增S基因。
(2)在I途径中,通常会将腺病毒复制基因敲除,目的是________________ 。另外,还需要用与切割S基因相同的限制酶切割腺病毒的DNA,以便获得________________ ,然后可用DNA连接酶将两者“缝合”形成一个重组DNA分子。在II途径中,常用Ca2+处理大肠杆菌,使其细胞处于________________ 的生理状态。
(3)据图分析,分别简述两种疫苗在机体内发挥作用的机理________________ 。
(4)某科研团队想利用可增殖的Vero细胞(为非洲绿猴肾细胞的传代细胞,可无限增殖)制备抗S蛋白的单克隆抗体作为诊断试剂,请写出相关的实验思路_______________ 。
(1)获取S基因时,可利用病毒的RNA在逆转录酶的作用下,合成对应的
(2)在I途径中,通常会将腺病毒复制基因敲除,目的是
(3)据图分析,分别简述两种疫苗在机体内发挥作用的机理
(4)某科研团队想利用可增殖的Vero细胞(为非洲绿猴肾细胞的传代细胞,可无限增殖)制备抗S蛋白的单克隆抗体作为诊断试剂,请写出相关的实验思路
更新时间:2022-02-23 21:38:56
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【推荐1】在人类文明的发展进程中,不断遭受病毒的侵袭,病毒通过与细胞表面的特定受体蛋白结合后入侵宿主细胞,有些病毒与癌症的发生也密切相关,如宫颈癌、鼻咽癌等均可由病毒致癌因子引起。CAR-T细胞免疫疗法是指将嵌合抗原受体(CAR)导入T细胞中,从而产生肿瘤特异性识别的T细胞,以激发自身免疫系统来消灭肿瘤。请回答下列问题:
(1)不同类型的病毒侵染的细胞不同,如人乳头瘤病毒侵染宫颈细胞,EB病毒侵染鼻咽部细胞,原因是__________ ,要诊断某宫颈癌患者是否感染了人乳头瘤病毒,请从免疫学角度提供―种诊断方法:___________ 。
(2)T细胞受抗原刺激后可增殖分化成__________ ,相关细胞进一步行使免疫功能,最终消灭自身肿瘤细胞,这体现了免疫系统的___________ 功能。
(3)为探究机体清除肿瘤是否与体液免疫有关,某同学设计实验方案如下:将肿瘤体积大小相同的若干小鼠(体内已有的免疫细胞和造血干细胞已被射线杀死)均分为A、B两组,A组做手术但不切除骨髓,B组切除骨髓,一段时间后比较两组小鼠肿瘤体积大小。该实验方案不能达到探究目的,原因是__________ 。
(1)不同类型的病毒侵染的细胞不同,如人乳头瘤病毒侵染宫颈细胞,EB病毒侵染鼻咽部细胞,原因是
(2)T细胞受抗原刺激后可增殖分化成
(3)为探究机体清除肿瘤是否与体液免疫有关,某同学设计实验方案如下:将肿瘤体积大小相同的若干小鼠(体内已有的免疫细胞和造血干细胞已被射线杀死)均分为A、B两组,A组做手术但不切除骨髓,B组切除骨髓,一段时间后比较两组小鼠肿瘤体积大小。该实验方案不能达到探究目的,原因是
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【推荐2】IgM和IgG是在抗原的作用下,淋巴细胞活化成浆细胞后产生的免疫球蛋白,具有抗感染作用。图1为机体感染新冠病毒后发生的部分免疫过程,图2为机体感染新冠病毒后血清检测中IgM和IgG含量的变化情况。请回答下列问题。
(1)图1中细胞①的作用是_____ ,再次感染新冠病毒时细胞④的来源有_______ (填序号)。
(2)血清特异性IgM和IgG两种抗体检测可作为感染诊断的重要标准,通过检测外周血中的IgM和IgG,可区分“近期感染”或“既往感染”,结合图2分析,若某人既往感染过新冠病毒且目前已康复,对其进行核酸检测、IgM、IgG三种检测,结果显示______ (用+或-表示,+表示阳性,-表示阴性),试分析出现上述IgM、IgG抗体检测结果的原因:_____ 。在快速阻断病毒大面积传播上,_____ (填“核酸检测”或“血清学检测”)检测更具优势。
(1)图1中细胞①的作用是
(2)血清特异性IgM和IgG两种抗体检测可作为感染诊断的重要标准,通过检测外周血中的IgM和IgG,可区分“近期感染”或“既往感染”,结合图2分析,若某人既往感染过新冠病毒且目前已康复,对其进行核酸检测、IgM、IgG三种检测,结果显示
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【推荐3】新冠肺炎在全球传播,严重影响人类的健康、生活和生产。建立动物模型是研究疾病致病机理、开发药物的重要手段,这对预防和治疗新冠肺炎有同样的重要意义。
(1)建立小鼠新冠病毒感染模型的原初策略是用野生型新冠病毒充当______ 感染小鼠,以此建立小鼠新冠病毒感染模型。
(2)我国科学家应用新策略,通过基因修饰的方法建立了小鼠新冠病毒感染模型。具体如下图,图中①~④表示实验的步骤:
①为了获取hACE2基因,先提取体细胞中的总DNA,然后运用PCR技术进行特异性扩增hACE2。提取体细胞总DNA时,用______ (试剂)分离蛋白质与DNA。PCR技术能特异性扩增hACE2的原因是______________ 。
②为保证hACE2基因在小鼠细胞中稳定存在和传给子代,并且能够表达和发挥作用,hACE2重组DNA分子中应包含______ 和终止子。其中终止子的作用为________________________ 。
③图中步骤③中的小鼠细胞常为______ 。从步骤③到步骤④,hACE2转基因小鼠的产生,至少还要用到______ 技术。
(3)上图中得到的hACE2转基因小鼠个体不一定是合格的新冠病毒感染模型个体。选取合适的实验材料,设计实验检验hACE2转基因小鼠是否为新冠病毒感染模型。简要说出实验思路__________ 。
(1)建立小鼠新冠病毒感染模型的原初策略是用野生型新冠病毒充当
(2)我国科学家应用新策略,通过基因修饰的方法建立了小鼠新冠病毒感染模型。具体如下图,图中①~④表示实验的步骤:
①为了获取hACE2基因,先提取体细胞中的总DNA,然后运用PCR技术进行特异性扩增hACE2。提取体细胞总DNA时,用
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【推荐1】全球新冠肺炎疫情仍在流行,防控疫情最有效、最经济的办法就是接种疫苗。目前我国疫苗研发取得可喜进展,新冠疫苗接种工作也有序展开。2021年2月,陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒基因疫苗,目前已获批上市。请回答下列问题。
(1)已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用。制备腺病毒载体新冠病毒疫苗时,首先需要在_____________ 的作用下,以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录得到S抗原基因。接着常利用PCR技术扩增S抗原基因,为了便于S抗原基因与腺病毒载体的连接,需要在引物的___________ (填“3'”或“5'”)端加上限制酶切割位点。
(2)S抗原基因整合进腺病毒基因组时,需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间,原因是:_________________________ ;且腺病毒中负责复制的关键基因片段也被剪切掉,目的是:____________________________________ 。
(3)注射以上腺病毒载体疫苗后也难以使人类彻底摆脱新冠病毒,可能的原因有:________________ (至少答出两点)。
(4)研究人员还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从脾脏中获取浆细胞,与骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基筛选出_________ 。接着经过多次筛选获得针对S蛋白的___________________ 。利用该方法制备的产物来治疗新冠肺炎的原理是_____________________ 。
(1)已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用。制备腺病毒载体新冠病毒疫苗时,首先需要在
(2)S抗原基因整合进腺病毒基因组时,需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间,原因是:
(3)注射以上腺病毒载体疫苗后也难以使人类彻底摆脱新冠病毒,可能的原因有:
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【推荐2】青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素,科研人员利 用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体,其基本操作过程如图所示。回答下列问题:(1)上述实验前必须给小鼠注射青蒿素— 牛血清白蛋白结合抗原,该处理的目的是 __________
(2)为了完成过程②得到细胞乙,需要取该实验小鼠的________ ,将其剪碎后用 ____________ 处理,使其_____ ,再加入培养液。
(3)图中过程③需用选择培养基进行细胞培养,其结果是_______________________________ 。图中过程④含多次筛选,筛选的目的是为了得到 _____________________________________ 。
(4)若要使细胞丁大量增殖,培养方法中操作更简便的是___________________ 。
(2)为了完成过程②得到细胞乙,需要取该实验小鼠的
(3)图中过程③需用选择培养基进行细胞培养,其结果是
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【推荐3】通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法,用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答下列问题:
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA 为模板通过_____ 过程合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_____ 与_____ 的碱基配对。
(2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针,利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是_____ 。
(3)除核酸检测外,研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术,该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下:
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白;
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细胞;
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,获得大量的特异性抗体。
其中步骤②中经多次筛选、检测后遭淘汰的细胞有_____ ;步骤③大规模培养时要注意定期更换培养液,其目的是_____ 。
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA 为模板通过
(2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针,利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是
(3)除核酸检测外,研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术,该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下:
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白;
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细胞;
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,获得大量的特异性抗体。
其中步骤②中经多次筛选、检测后遭淘汰的细胞有
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【推荐1】科研工作者将径柳匙叶草液泡膜 Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2 基因)转移到棉花细胞内,获得了耐盐新品种。图 1 是含有目的基因的 DNA 片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶(Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的黏性末端相同);图 2 是农杆菌 Ti 质粒结构示意图。请分析回答问题:
(1)将径柳匙叶草不同基因的 DNA 片段导入受体菌的群体中储存,再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因,这种获取目的基因的方法称为____________ 。
(2)计划用 EcoR Ⅰ 分别切割图 1 中 DNA 片段和图 2 所示质粒,以构建基因表达载体。
①构建表达载体需要的工具酶是_____________ 、______________ ;
②本方案的缺陷是:可能导致___________________ 以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷,最佳方案是用________ 切割图1的DNA,用________ 切割图2质粒。
(3)目的基因成功导入受体细胞后,还需要利用_________________ 技术才能得到转基因棉花苗,这一技术的原理是_________________ 。
(1)将径柳匙叶草不同基因的 DNA 片段导入受体菌的群体中储存,再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因,这种获取目的基因的方法称为
(2)计划用 EcoR Ⅰ 分别切割图 1 中 DNA 片段和图 2 所示质粒,以构建基因表达载体。
①构建表达载体需要的工具酶是
②本方案的缺陷是:可能导致
③为避免上述缺陷,最佳方案是用
(3)目的基因成功导入受体细胞后,还需要利用
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【推荐2】转基因抗虫棉的迅速推广普及,有效地控制了棉铃虫的危害。抗虫棉培育过程如下图所示:
注:质粒中“Bt”代表“Bt毒蛋白基因”, “KmR”代表“卡那霉素抗性基因”。
(1)过程①是基因工程4个步骤中的_____ ,所需要的酶是_____ 。过程③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是_____ 。
(2)种植转基因抗虫棉可以大大减少_____ 的使用,以减轻环境污染。
(3)体外快速扩增目的基因,常采用PCR技术,该技术的原理为_____ 。
(4)卡那霉素抗性基因的作用是_____ 。
(5)若要检测转基因棉花细胞中Bt毒蛋白基因是否转录出了mRNA,可采用核酸分子杂交技术,用_____ 作探针;若要鉴定转基因棉花是否被赋予抗虫特性,需要做_____ 实验。
注:质粒中“Bt”代表“Bt毒蛋白基因”, “KmR”代表“卡那霉素抗性基因”。
(1)过程①是基因工程4个步骤中的
(2)种植转基因抗虫棉可以大大减少
(3)体外快速扩增目的基因,常采用PCR技术,该技术的原理为
(4)卡那霉素抗性基因的作用是
(5)若要检测转基因棉花细胞中Bt毒蛋白基因是否转录出了mRNA,可采用核酸分子杂交技术,用
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【推荐3】人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程,图中 Tetr 表示四环素抗性基因,Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因,五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题:
(1)一个基因表达载体的组成必须有启动子、复制原点、____________________ 等。若选用牛作为转基因动物可将____ 基因与 ______ 基因的启动子等调控组件重组在一起,可通过__________ 方法将基因表达载体导入受精卵中,然后使其发育成转基因动物。
(2)据图分析,筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含____________________ (填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”)的培养基上进行,原因是_______________________________ 。
(3)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是________________ ,若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端与 BclⅠ酶切的 DNA 末端连接起来,连接部位的 6 个碱基对序列为__________________________ ,对于该部位,这两种酶____________ (填“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)培养出早期胚胎后,科学家欲进行胚胎分割移植,则应该选择发育良好,形态正常的_______ 胚,将其移入盛有操作液的培养皿中,然后用分割针进行分割。
(5)若利用转基因大肠杆菌(工程菌)则不能生产有活性的人乳铁蛋白,这是因为______ 。
限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
识别序列及切割位点 |
(1)一个基因表达载体的组成必须有启动子、复制原点、
(2)据图分析,筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含
(3)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是
(4)培养出早期胚胎后,科学家欲进行胚胎分割移植,则应该选择发育良好,形态正常的
(5)若利用转基因大肠杆菌(工程菌)则不能生产有活性的人乳铁蛋白,这是因为
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【推荐1】如图为人体内几种免疫细胞参与机体免疫的机制图解,其中⑤表示某种化合物,⑥是抗原呈递(或提呈)细胞,①②③④⑦代表某种细胞,回答下列问题。
(1)免疫系统能消灭侵入体内的病原体,这体现了免疫系统的_____ 功能。图中化合物⑤参与的免疫过程为_____ 免疫,参与⑤合成和分泌的细胞器有_____ 。
(2)图中细胞①的名称是_____ ,该细胞需要在_____ 中发育成熟,图中细胞⑦的名称是_____ ,其作用是_____ 。
(3)当细胞①的活性下降时,其产生的_____ 减少,从而使细胞②的增殖分化能力下降。
(4)某科研团队研发出了新冠病毒IgM/IgG抗体快速测试卡(1滴血,15分钟即可肉眼观测到结果)。该检测技术运用了_____ 的原理。如果某疑似患者的抗体检测呈阴性,_____ (填“是”或“否”)可以排除新冠病毒感染,理由是_____ 。
(1)免疫系统能消灭侵入体内的病原体,这体现了免疫系统的
(2)图中细胞①的名称是
(3)当细胞①的活性下降时,其产生的
(4)某科研团队研发出了新冠病毒IgM/IgG抗体快速测试卡(1滴血,15分钟即可肉眼观测到结果)。该检测技术运用了
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【推荐2】临床上,发热是指在致热原的作用下,使机体体温调节中枢的“调定点”上移而引起的一种高水平体温调节活动。根据近期流行病学调查,新冠肺炎患者的主要临床表现是发热,这也是当前我们进入公共场所需要检测体温的原因。人感染新冠病毒后体温上升的主要调节机制示意图如下。请分析回答:
(1)侵入人体的病毒会引起细胞产生内生致热原(EP),EP刺激位于____________ 的体温调节中枢,导致体温“调定点”上移。在体温上升期,图中运动神经元兴奋使得____________ ,增加产热;而交感神经则使皮肤的______________ ,减少散热。此时,甲状腺激素分泌增加,细胞代谢增强,与该过程相关的激素甲是___________________ 。上述体温调节过程属于___________________ 调节方式。
(2)抗体检测适用于快速筛查出疑似病例和无症状感染者。病毒感染人体后,病毒的某些结构蛋白一般作为抗原,刺激人体_____________ (填细胞名称)产生特异性抗体。临床上可利用抗原试剂检测抗体的存在,该方法的免疫学原理是______________________ 。
(3)新冠病毒是一种具有包膜的_______ 病毒,包膜表面的棘突蛋白S与人细胞膜表面的血管紧张素转换酶2(ACE2)受体结合,发生病毒包膜与细胞膜的融合,释放病毒的RNA侵入细胞。因此,病毒感染人类首先需要接触到有这种酶的细胞,完成受体结合,而暴露在空气中的嘴唇、眼皮、鼻腔和口腔里的大量黏膜上皮细胞存在ACE2受体。基于以上信息,为减少人体新冠病毒的感染而研发的药物应具有的作用____________________ 、_______________ 。
(1)侵入人体的病毒会引起细胞产生内生致热原(EP),EP刺激位于
(2)抗体检测适用于快速筛查出疑似病例和无症状感染者。病毒感染人体后,病毒的某些结构蛋白一般作为抗原,刺激人体
(3)新冠病毒是一种具有包膜的
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【推荐3】根据新冠病毒致病机制及人体免疫反应特征研制新冠疫苗,广泛接种疫苗可以快速建立免疫屏障,阻击病毒扩大。下图1为新冠病毒入侵细胞后的增殖示意图,图2为人体免疫应答产生抗体的一般规律示意图。请据图回答下列问题。(1)图1中,新冠病毒通过S蛋白与细胞表面的ACE2受体结合,侵入细胞释放出病毒的(+)RNA,在宿主细胞中经____ (过程)合成病毒的RNA聚合酶。
(2)在RNA聚合酶的作用下,病毒利用宿主细胞中的原料,按照____ 原则合成(-)RNA。随后大量合成新的(+)RNA。再以这些RNA为模板,在_____ (场所)大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。
(3)制备病毒灭活疫苗时,先大量培养表达____ 的细胞,再接入新冠病毒扩大培养,灭活处理后制备疫苗。细胞培养时需通入CO2,其作用是____ 。
(4)制备S蛋白的mRNA疫苗时,体外制备的mRNA常用脂质分子包裹后才用于接种。原因一是人体血液和组织中广泛存在____ ,极易将裸露的mRNA水解,二是外源mRNA分子不易进入人体细胞产生抗原。
(5)第一次接种疫苗后,人体内识别到S蛋白的B细胞,经过增殖和分化,形成的_____ 细胞可合成分泌特异性识别____ 的IgM和IgG抗体(见图2),形成的____ 细胞等再次接触到S蛋白时,发挥免疫保护作用。
(2)在RNA聚合酶的作用下,病毒利用宿主细胞中的原料,按照
(3)制备病毒灭活疫苗时,先大量培养表达
(4)制备S蛋白的mRNA疫苗时,体外制备的mRNA常用脂质分子包裹后才用于接种。原因一是人体血液和组织中广泛存在
(5)第一次接种疫苗后,人体内识别到S蛋白的B细胞,经过增殖和分化,形成的
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