组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 发酵工程 > DNA和蛋白质技术 > 蛋白质的提取和分离 > 蛋白质分离的原理及方法
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:903 题号:15201342
地中海贫血症在我国南方发病率很高。临床上,可以通过从胎儿血液中提取、分离红细胞中的血红蛋白,采用技术手段进行鉴定,从而为胎儿地中海贫血的确定提供实验证明。请回答下列问题:
(1)采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用________离心,其目的是_____________。随后,将离心后的下层红细胞液体倒入烧杯中,加入五倍体积的___________________进行洗涤。
(2)将洗涤后的红细胞倒入烧杯后,加入______________________________________,使红细胞破裂释放出血红蛋白,经搅拌、离心、分层后获得血红蛋白溶液。随后将血红蛋白溶液装入透析袋透析12小时,其目的是___________________,完成血红蛋白粗分离。
(3)粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白(如下图,表示甲~戊五种蛋白质的分子量及电荷量,且五种蛋白质均只由一条肽链构成),若用凝胶色谱法进行血红蛋白的纯化,则图中移动最慢的是蛋白________(填编号)。若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,则移动速度最慢的是蛋白_____(填编号),判断理由是_____________________

相似题推荐

非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】2019年1月10日,施一公教授研究团队在《学》上报道了人源γ-分泌酶结合淀粉样前体蛋白(APP)的高分辨率冷冻电镜结构揭示了结合底物后γ-分泌酶发生的构象变化,并对这些构象变化的功能进行了生化研究从而为研究与癌症以及阿尔茨海默病相关的特异性药物设计提供了重要的结构信息。回答下列问题:
(1)该项研究进行时,需控制温度、酸碱度等条件,因为高温、过酸、过碱会使γ-分泌酶的_______遭到破坏,失去活性。
(2)根据蛋白质的各种特性,如蛋白质分子的_______、所带电荷的_______、以及溶解度、吸附性、对其他分子亲和力等来分离不同种类蛋白质,从而得到γ-分泌酶。
(3)γ-分泌酶由4个跨膜蛋白亚基组成,分别为PS1、Pen-2、Aph-1和 Nicastrin。若对γ-分泌酶4个跨膜蛋白亚基进行分离、纯化及分子量测定,需采用_______及电泳技术。前者是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,相对分子质量较_______(填“大”或“小”)的跨膜蛋白移动速度较慢。
(4)电泳是指_______在电场的作用下发生迁移的过程。对γ-分泌酶的4个跨膜蛋白亚基进行分子量测定时,通常采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,该方法测定的结果只是_______的分子量。
2020-10-09更新 | 102次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐2】请回答下列有关生物技术实践的问题。
(1)为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌(目的菌),该培养基为_____培养基,其中化合物A为目的菌提供_____等营养要素,在分离、纯化、计数过程中,则常采用_____法接种。
(2)在提取胡萝卜素时,常用的萃取剂具有沸点高且_____等特点,在鉴定胡萝卜素粗品时,常用_____法。
(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时,用_____破裂红细胞使血红蛋白得以释放,如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡,气泡会_____,降低分离效果。
2023-07-26更新 | 44次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】猪、牛、羊或其它哺乳动物的红细胞中含有大量血红蛋白,可以选用这些动物的血液为实验材料来提取和分离血红蛋白。如图表示血红蛋白提取和分离的部分装置和操作方法,请回答下列问题:

(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步,图甲代表其中的________________。图乙代表向凝胶色谱柱中加样的操作,正确的操作顺序是________________(填图中数字序号)。
(2)对样品处理时,释放血红蛋白的操作中加入蒸馏水的作用是___________________;然后加入________________体积的甲苯,作用是__________________________
(3)凝胶色谱柱法可以对提取的血红蛋白进行纯化,在对色谱柱填料进行处理时,为了加速凝胶的膨胀,可以将加入洗脱液的湿凝胶用________________进行加热,这种方法不但节约时间,而且能除去凝胶中可能带有的微生物,排出胶粒内的________________。在蛋白质分离过程中,如果红色区带在洗脱过程中________________,说明色谱柱制作成功。
2021-04-30更新 | 42次组卷
共计 平均难度:一般