地中海贫血症在我国南方发病率很高。临床上,可以通过从胎儿血液中提取、分离红细胞中的血红蛋白,采用技术手段进行鉴定,从而为胎儿地中海贫血的确定提供实验证明。请回答下列问题:
(1)采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用________ 离心,其目的是_____________ 。随后,将离心后的下层红细胞液体倒入烧杯中,加入五倍体积的___________________ 进行洗涤。
(2)将洗涤后的红细胞倒入烧杯后,加入___________________ 和___________________ ,使红细胞破裂释放出血红蛋白,经搅拌、离心、分层后获得血红蛋白溶液。随后将血红蛋白溶液装入透析袋透析12小时,其目的是___________________ ,完成血红蛋白粗分离。
(3)粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白(如下图,表示甲~戊五种蛋白质的分子量及电荷量,且五种蛋白质均只由一条肽链构成),若用凝胶色谱法进行血红蛋白的纯化,则图中移动最慢的是蛋白________ (填编号)。若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,则移动速度最慢的是蛋白_____ (填编号),判断理由是_____________________ 。
(1)采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用
(2)将洗涤后的红细胞倒入烧杯后,加入
(3)粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白(如下图,表示甲~戊五种蛋白质的分子量及电荷量,且五种蛋白质均只由一条肽链构成),若用凝胶色谱法进行血红蛋白的纯化,则图中移动最慢的是蛋白
更新时间:2022-02-28 21:38:13
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【推荐1】2019年1月10日,施一公教授研究团队在《学》上报道了人源γ-分泌酶结合淀粉样前体蛋白(APP)的高分辨率冷冻电镜结构揭示了结合底物后γ-分泌酶发生的构象变化,并对这些构象变化的功能进行了生化研究从而为研究与癌症以及阿尔茨海默病相关的特异性药物设计提供了重要的结构信息。回答下列问题:
(1)该项研究进行时,需控制温度、酸碱度等条件,因为高温、过酸、过碱会使γ-分泌酶的_______ 遭到破坏,失去活性。
(2)根据蛋白质的各种特性,如蛋白质分子的_______ 、所带电荷的_______ 、以及溶解度、吸附性、对其他分子亲和力等来分离不同种类蛋白质,从而得到γ-分泌酶。
(3)γ-分泌酶由4个跨膜蛋白亚基组成,分别为PS1、Pen-2、Aph-1和 Nicastrin。若对γ-分泌酶4个跨膜蛋白亚基进行分离、纯化及分子量测定,需采用_______ 及电泳技术。前者是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,相对分子质量较_______ (填“大”或“小”)的跨膜蛋白移动速度较慢。
(4)电泳是指_______ 在电场的作用下发生迁移的过程。对γ-分泌酶的4个跨膜蛋白亚基进行分子量测定时,通常采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,该方法测定的结果只是_______ 的分子量。
(1)该项研究进行时,需控制温度、酸碱度等条件,因为高温、过酸、过碱会使γ-分泌酶的
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【推荐2】请回答下列有关生物技术实践的问题。
(1)为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌(目的菌),该培养基为_____ 培养基,其中化合物A为目的菌提供_____ 等营养要素,在分离、纯化、计数过程中,则常采用_____ 法接种。
(2)在提取胡萝卜素时,常用的萃取剂具有沸点高且_____ 等特点,在鉴定胡萝卜素粗品时,常用_____ 法。
(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时,用_____ 破裂红细胞使血红蛋白得以释放,如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡,气泡会_____ ,降低分离效果。
(1)为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌(目的菌),该培养基为
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【推荐3】猪、牛、羊或其它哺乳动物的红细胞中含有大量血红蛋白,可以选用这些动物的血液为实验材料来提取和分离血红蛋白。如图表示血红蛋白提取和分离的部分装置和操作方法,请回答下列问题:
(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步,图甲代表其中的________________ 。图乙代表向凝胶色谱柱中加样的操作,正确的操作顺序是________________ (填图中数字序号)。
(2)对样品处理时,释放血红蛋白的操作中加入蒸馏水的作用是___________________ ;然后加入________________ 体积的甲苯,作用是__________________________ 。
(3)凝胶色谱柱法可以对提取的血红蛋白进行纯化,在对色谱柱填料进行处理时,为了加速凝胶的膨胀,可以将加入洗脱液的湿凝胶用________________ 进行加热,这种方法不但节约时间,而且能除去凝胶中可能带有的微生物,排出胶粒内的________________ 。在蛋白质分离过程中,如果红色区带在洗脱过程中________________ ,说明色谱柱制作成功。
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【推荐1】请回答下列问题
(1)为了从土壤中筛选能有效降解有害有机化合物A的细菌,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌(目的菌),从功能看该培养基为___________ 培养基,在对该菌进行分离、纯化、计数过程中,常采用___________ 法接种。实验过程中还需配制空白培养基作为对照,如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示,造成这种结果的原因可能是___________ 。
(2)某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。在用该材料提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中,将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后,发现仍存在浑浊和沉淀问题,你将如何解决这一问题?____________________ 。在果汁生产中,为了提高果胶酶的使用效率和产品纯度,一般需要将酶用___________ 法进行固定化处理。
(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时,用_______________ 洗涤红细胞,用___________ 破裂红细胞使血红蛋白得以释放,如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡,气泡会___________ ,降低分离效果。
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【推荐2】土壤中的某些微生物能产生分解纤维素的纤维素酶,纤维素酶在食品行业和环境保护中都有十分广泛的应用。回答下列问题:
(1)筛选纤维素分解菌时,可从富含有机质的土壤中取样,然后将土壤滤液加入到以_________ 为唯一碳源的液体培养基中进行选择培养。吸取适量的培养液,稀释涂布到含有刚果红的固体培养基上,等培养基上长出菌落后,通过_________ 就可以筛选出纤维素分解菌。
(2)从纤维素分解菌的液体培养基中获得纤维素酶粗提取液,将粗提取液装入透析袋中,置于pH适宜的磷酸缓冲液中进行透析处理,这样就可以除去其中分子量_________ (填“较大”或“较小”)的杂质。采用凝胶色谱法分离纯化纤维素酶时,凝胶柱中不能有气泡存在,因为气泡会_________ ,降低分离效果。
(3)将纤维素酶固定化可以使酶反复利用,一般来说,酶适合采用_________ 法固定化。研究人员测定了不同温度对酶活性的影响,结果如图所示。纤维素酶活性的高低,可以用单位时间内、单位体积中_________ 来表示。图示结果表明,相对于游离酶,固定化酶具有的优点是__________ 。
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【推荐3】科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌,并对果胶酶进行分离纯化。请回答下列问题:
(1)配制以_______ 为唯一碳源的选择培养基,筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______________ (回答两点)等特征可进行物种鉴定。
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度 离心后, _______ (填“上清液”、“沉淀物”或“上清液和沉淀物”)即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后,可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白,在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度_______ (填“较快”或“较慢”)。
(3)在凝胶色谱柱在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象,如果发生则___________________ ,装填时不得有气泡存在,原因为气泡会________________________ 。
(4)用凝胶电泳法测定果胶酶分子量时,需要在凝胶中加入SDS,目的是_________________ ,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(5)某一实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程中,溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温,才能加入已活化的酵母菌,原因是___________________________________ 。如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅,说明 _____________________ 。利用固定化酵母细胞进行酒精发酵,与直接接种酵母菌相比较有哪些优点?(说出两点) _______________________________
(1)配制以
(2)将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行
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