1966年,日本科学家冈崎提出DNA半不连续复制假说:DNA复制时,一条子链是连续形成,另一条子链不连续即先形成短链片段(如图1所示)后再连接成长链片段。为验证假说,冈崎讲行了如下实验:让T4噬菌体在20℃时侵染大肠杆菌70min后,将3H标记的脱氧核苷酸添加到大肠杆菌的培养基中,在15s、30s、60s、120s时,分离T4噬菌体DNA并通过加热使DNA全部解旋,再进行密度梯度离心,以DNA单链片段分布位置确定片段大小,发现DNA单链片段越小离试管口距离越近。检测相应位置DNA单链片段的放射性,结果如图2所示。下列说法不正确的是( )
A.子代噬菌体DNA中检测到放射性的原因是标记的脱氧核苷酸被大肠杆菌吸收,成为噬菌体DNA复制的原料 |
B.通过加热破坏了DNA分子中的氢键,起到的作用跟DNA酶类似 |
C.120s时结果中短链片段减少的原因是短链片段逐步连接成长链片段 |
D.实验中能检测到较多的短链片段为冈崎假说提供了有力证据 |
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更新时间:2022-05-07 16:53:01
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【知识点】 探究DNA的复制过程解读
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【推荐1】利用“同位素示踪技术”和“密度梯度超速离心技术”探究DNA的复制过程,是最早证明DNA半保留复制的实验证据,下列有关该实验的叙述正确的是( )
A.需要将大肠杆菌在以15NH4Cl为唯一氮源的培养基中先培养一代,使其DNA都被15N标记,作为实验用的亲代细菌 |
B.将亲代细菌转入14NH4Cl为唯一氮源的培养基中培养,分别取子一代和子二代细菌进行密度梯度超速离心和分析 |
C.若离心管中只出现中间条带,则所用材料全部来自子一代细菌 |
D.若用加热方法将子一代或子二代细菌的DNA双链打开后再离心分离同样会出现中间条带 |
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解题方法
【推荐2】研究人员为了研究半保留复制的具体过程,以T4噬菌体和大肠杆菌为实验对象进行了实验探究:20℃条件下,用T4噬菌体侵染大肠杆菌,进入T4噬菌体DNA活跃复制期时,在培养基中添加含3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸,培养不同时间后,阻断DNA复制,将DNA变性处理为单链后,离心分离不同长度的T4噬菌体的DNA片段,检测离心管不同位置的放射性强度,结果如图所示(DNA片段越短,与离心管顶部距离越近)。下列叙述正确的是( )
A.可在培养基中添加秋水仙素,阻断DNA复制 |
B.为了节省实验时间,DNA不变性处理成单链直接离心也可 |
C.实验结果说明DNA复制时子链合成的过程,短时间内首先合成的是长片段DNA |
D.如果实验中抑制DNA连接酶的活性,则大部分放射性会出现在离心管顶部 |
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