【推荐1】请根据有关生物工程方面的知识回答下列问题：
（1）基因工程的核心是___________，所需的工具酶有___________。从分子水平上看，基因工程得以实现的遗传学物质基础是：______________________ (写出两点)。基因工程中限制酶切割后的运载体与目的基因能再次拼接的理由是_____________________。
（2）将目的基因导入植物细胞最常见的方法是___________， 原理是利用其菌体中质粒的T- DNA片段可___________的特点；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是___________。
（3）动物细胞工程中___________技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程的一项重要应用是制备单克隆抗体，在该过程形成的杂交瘤细胞中发生的遗传信息流动有DNA→DNA、___________。
（4）胚胎工程中，胚胎移植选择受体的条件是___________并具有健康体质和正常繁殖能力，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生___________，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。为了获得产奶量高的奶牛，需取囊胚期___________细胞做性别鉴定。若对囊胚进行胚胎分割，要注意__________，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

【推荐2】下图为筛选、制备单克隆抗体的示意图，①~⑤代表相关过程，a~g代表相关细胞。请回答下列问题：

(1)由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有__________________（写出2个）。过程①是给小鼠注射S抗原蛋白，其目的是__________________，过程②的促融方法有_________（写出一种生物促融的方法）。
(2)图中过程③④为两次筛选过程，过程③是指把c细胞群稀释放在_________培养基的多孔培养皿中培养，只有_________能够存活且增殖，因此，细胞集落为单个存活细胞的克隆。过程④是用__________________方法经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
(3)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠的淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂。小鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂。若将小鼠的这两种细胞在含氨基蝶呤的试管中混合后促融，则试管中细胞的种类数和能增殖的细胞种类数分别是（不考虑三个及以上细胞融合）_________（填“3和1”、“5和3”、“5和1”或“3和3”）。

【推荐3】我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：

(1)获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。
(2)进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____，且在进行细胞原代培养时会出现_____现象。
(3)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是_____。图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在_____条件下空间位置的转移。除图中所示外，胚胎移植技术中胚胎的来源还有_____（答出两点）。
(4)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_____。

(5)科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。

①据图分析，（       ）组蛋白乙酰化水平和（       ）组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。括号内应填入的选项是_____。
A．提高；提高          B．降低；降低          C．提高；降低          D．降低；提高
②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、_____、_____、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。

【推荐1】请根据给出的材料回答下列相关问题。
Ⅰ.据美联社2008年1月17日《干细胞》杂志报道，美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞。请回答：
(1)上述过程中主要应用到的动物细胞工程有_________________。
(2)在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时，通常需要加入___________等天然成分。在细胞培养时，要保证被培养的细胞处于一定的气体环境，所需要的气体主要有____，其作用分别是______________。如果将此细胞用于检测有毒物质是否引起了细胞基因突变，可用___________________技术。
(3)科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或_____________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。
(4)胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________________反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(5)我国禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，而美国国会反对治疗性克隆。请你谈谈反对克隆人的理由：__________________。（至少两点）。
Ⅱ.下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据下图作答。

(6)在体外培养条件下，为保持胚胎干细胞的未分化状态，通常在培养皿中铺上一层____________细胞。
(7)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有___________。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其本质原因是基因____________________的结果。
(8)若将上述技术用于白血病人的骨髓移植，且图中患者是A型血（Ⅰ^Ai），提供卵细胞的女性是AB型血（Ⅰ^AⅠ^B）的，则骨髓移植成功后患者的血型是_________型。
(9)科学家为何要将患者的体细胞的核植入去核的卵细胞，而不直接用体细胞进行细胞培养？_____________。
(10)按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是_________。

【推荐2】M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：


(1)传统的细胞核移植技术中，受体卵母细胞普遍使用______________方法去核，所去的“核”是指______________。
(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是______________。
(3)与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是______________。
(4)为了获得更多的克隆动物A，可在胚胎移植前进行分割，分割胚胎时要注意______________
(5)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的______________淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路______________。

【推荐3】如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：

(1)图中①是取自患者体细胞的___________，过程②表示_____________技术。过程②通常用去核卵母细胞作为受体细胞，除了因为它体积大、易操作，含有丰富的营养物质外，还因为它______________。
(2)重组细胞在体外培养时会发生贴壁生长现象， 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用____________________酶等进行处理。
(3)图中过程③表示_____________技术，过程③中将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞通常采用的方法是_____________。
(4)与一般的异体移植相比，图示方法最大的优点是_________________。

【推荐1】某课题组为了解决本地奶牛产奶量低的问题进行了相关研究，如下图所示。其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛（♀），供体2是本地黄牛（♀），请据图回答下列问题：

（1）通过方法1获得的小牛，其遗传物质来源于______，其中细胞B的名称是______。
（2）通过方法2获得早期胚胎的过程中，若体外受精，则需对采集的成熟精子进行______处理以使其具备受精能力，而完成受精后，则需将受精卵进一步培养至______期再移植到受体母牛子宫内。
（3）方法3中的胚胎干细胞可以取自______，其在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显，在功能上具有______。
（4）研究表明，囊胚比桑椹胚更适合通过方法4获得二分胚，但在操作时应特别注意______，否则会影响二分胚的恢复和发育。

【推荐2】毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山头羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)获取外源基因用到的工具酶是__________，为了提高实验成功率，通常利用______技术获得大量标记的外源基因。
(2)在过程②中，用____________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的____________，在培养过程中，应将培养瓶置于________培养。
(3)图中重组细胞的细胞核来自____________的细胞，若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行________后进行胚胎移植。以上技术是在________(填“体内”或“体外”)完成的。
(4)下列有关基因工程的叙述正确的是________。
A．切割目的基因和载体DNA时为了获得相同的黏性末端，必须用相同的限制性核酸内切酶。
B．用基因探针可以检测目的基因是否表达
C．限制性核酸内切酶的作用只是用来提取目的基因
D．重组表达载体上含有RNA聚合酶的识别结合位点

【推荐3】某研究所采用最新生物技术首次实现了哺乳动物的同性繁殖，具体操作过程如下图，请根据图回答下列问题：

(1)培育孤雌小鼠时，为了获得更多的卵母细胞，可以用____激素处理雌性小鼠，使其超数排卵。将卵母细胞转化为phESC的过程类似于植物组织培养中的____过程。将卵细胞和具有精子细胞核特点的phESC融合后，培养至甲图所示的____阶段，再将其转移至代孕小鼠体内。最终得到的小鼠细胞中性染色体组成可能为____。
(2)培育孤雄小鼠时，首先需要通过____方法对卵母细胞进行去核处理，之后将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞中形成重构胚。核移植过程还需要借助高效率的电刺激法，电刺激除了可以促进细胞融合，同时还起到了____的作用。最终得到的小鼠细胞中性染色体组成可能为____。
(3)为提高上图中甲、乙两个胚胎的利用率，一次性获得较多的模型动物可以通过____技术实现。该技术操作过程中，要特别注意将内细胞团____。

【推荐1】治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，基本过程如下：

（1）过程①②依次采用了细胞工程的_________技术及胚胎工程的早期胚胎培养技术，图中采集到的卵母细胞必须培养到__________________（填时期）才能去除细胞核。
（2）进行动物细胞体外培养，首先应保证被培养的细胞处在____________的环境中，此外，应___________，以便清除代谢产物，防止________________________________。
（3）据图可知胚胎干细胞可取自囊胚的_________________，由于胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，即____________________________________________________________________。若将图中获得的组织器官移植给______________________（填“个体A”或“个体B”），则发生免疫排斥反应的可能性很小。

【推荐2】某大学科研人员用小鼠ES细胞（即胚胎干细胞）免疫兔，获得大量分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，从而建立了胚胎干细胞的抗体库。此类单克隆抗体能够识别ES细胞的特异性分子标志，该标志对于胚胎干细胞的鉴定、分离以及自我更新和分化机制的研究有着十分重要的意义。请依据相关知识回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体所用到的生物技术手段主要有___________和___________。制备此单克隆抗体之前，必须对兔注射___________，使兔产生免疫反应。
（2）从兔的脾脏中提取的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，可形成多种融合细胞，此时需要用特定的选择性培养基进行筛选，在该培养基上___________的细胞不能生存。
（3）上述筛选过程中获得的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和___________检测，经多次筛选，就可获得能分泌所需抗体的细胞，该细胞在体外培养时应在含有___________的混合气体的恒温培养箱中进行，最终获得大量的单克隆抗体。该抗体与传统方法制备的抗体相比，最主要的优点是___________。
（4）通过ES细胞的体外诱导分化，还可以培育出人造组织器官，解决器官移植时存在的___________的问题。