【推荐1】新型冠状病毒（2019-nCoV） 属于一种带有包囊膜的RNA病毒。研究表明，新型冠状病毒通过其包囊膜上的棘突蛋白与宿主细胞表面的血管紧张素转化酶2（ACE2）分子结合，随后包囊膜与宿主细胞膜融合，病毒衣壳与遗传物质进入细胞内，完成感染过程。回答下列问题：
(1)2019-nCoV主要通过呼吸道侵入人体，鼻腔中的黏膜和毛发属于人体免疫系统的第____道防线，可抵御部分病原体的侵袭。
(2)愈后患者短期内不容易再次被2019-nCoV感染，原因是体内产生了____细胞，当再次接触2019-nCoV时，可以迅速增殖分化为____。
(3)多次注射恢复期康复病人的血浆有助于某些重症、危重症新冠肺炎患者的治疗，主要原因是康复病人的血浆有____，但是某些患者在注射过程中或以后出现了皮肤荨麻疹、气管痉挛、呕吐等症状，分析原因可能是康复病人的血浆中含有的某些成分，被这些患者作为____，从而引发了____。
(4)目前，临床上仍无应对新冠肺炎的特效药，请结合题目信息及所学知识，为治疗新冠肺炎的药物研发提出新思路：____（答出1条即可）。

【推荐2】2023年诺贝尔生理医学奖授予“在核苷碱基（构成核酸的基本单元）修饰方面的发现及在mRNA疫苗开发”上的应用；纳米脂质颗粒LNP能使mRNA疫苗在体内进行靶向递送抗原，过程如图2所示。图1是新冠病毒引起人体免疫应答的过程，请回答下列问题。

(1)图1中，当新冠病毒侵入机体后，被APC摄取并将抗原_________________，才能将抗原信息传递给[细胞a]，一方面通过体液免疫使[细胞b]增殖分化为_________并产生抗体发挥作用；另一方面通过细胞免疫最终形成___________使靶细胞裂解，释放抗原。
(2)图2中编码新冠病毒抗原蛋白的mRNA封装在LNP中进入细胞，体现了细胞膜具有________________，若内体小泡中的mRNA未实现逃逸，则会被_______识别，使该外来mRNA降解；若逃逸成功也需逃避___________识别，以免被降解。
(3)请根据图2信息可知，mRNA疫苗引起机体免疫应答的机理是________________，从而激活宿主细胞的免疫应答，产生相应的抗体和记忆细胞，从而获得对新冠病毒的免疫力。
(4)与灭活病毒疫苗相比，RNA疫苗的优点有_________（至少答两点）。

【推荐3】艾滋病病毒（HIV）被称为“人类免疫系统杀手”，其遗传物质为单链RNA，“遏制艾滋”是全世界人民的共同责任。回答下列问题：
(1)病毒刺激人体免疫系统，使B细胞增殖分化为______（填细胞），人体感染HIV后，发生的特异性免疫类型是______。
(2)下图表示HIV感染人体后，体液中HIV浓度和人体内T细胞数量的变化过程，该图说明艾滋病潜伏期的长短与______直接相关。下图中的T细胞类型是______。人体感染HIV的初期，机体免疫系统是通过______（答出一项即可）等过程使体液中的HIV浓度下降的。

(3)曾经有科学家宣布已经开发出HIV疫苗，但是实践证明该种疫苗的效果并不理想，这可能与HIV易变异有关，其易变异的原因是______。
(4)预防艾滋病需要切断传播途径，艾滋病的传播途径主要有性接触传播、______和母婴传播。

【推荐2】人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请回答相关问题：
   
(1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸、生长因子等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的_____，以满足动物细胞培养的营养需要。对这一成分采取的灭菌方法是_____。为了防止有害代谢物的积累，可采用_____方法，以便清除代谢物。
(2)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_____。为了获得杂交瘤细胞，应将甲放在_____培养基上进行培养。②过程表示将乙细胞接种到_____上，进行_____检测。
(3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图示：

   
①据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与同一抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的_____结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是_____。
②研究人员获得三种抗cTnI单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_____（填“3”、“6”或“9”）组实验，检测并比较各组实验的产物量。

【推荐3】非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的一种急性传染病，死亡率高达100%。为实现对该病毒快速、准确的早期诊断，可用非洲猪瘟病毒p54蛋白的单克隆抗体作为诊断试剂。制备该单克隆抗体时，需先利用大肠杆菌表达出ASFV的p54蛋白并进行纯化，然后利用纯化的可溶性p54蛋白制备单克隆抗体。回答下列问题：
(1)将纯化的可溶性p54蛋白多次注射到小鼠体内可获得血清抗体，但是血清抗体的特异性差，原因是_____________________________________________；同时在小鼠的脾脏内会产生相应的B细胞。诱导从小鼠脾脏中获得的B细胞与骨髓瘤细胞融合时，可使用生物诱导剂________促融。
(2)融合的细胞经过筛选才能获得杂交瘤细胞，在此过程中需要进行筛选的原因是____________________________；获得的杂交瘤细胞还需进行________和________。经多次筛选后，获得的细胞株具有____________________________的特点。
(3)为获得大量抗p54蛋白的单克隆抗体，通常有两种途径：途径一是将筛选获得的杂交瘤细胞进行体外培养，从细胞培养液中获取。体外培养细胞时，为保持无毒无菌的环境，应进行的操作是___________________________________（答两点）。途径二是将筛选获得的杂交瘤细胞________________________________获得。

【推荐1】In-Fusion技术是一项新型的无缝克隆技术。该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（即同源序列，通常为15-20bp），然后用In-Fusion酶处理即可实现无缝连接。它的操作步骤大致为：①质粒线性化；②PCR扩增出两端含线性化质粒同源序列的目的基因；③目的基因与线性化质粒同源区域在In-Fusion酶作用下形成重组质粒；④将重组质粒导入受体细胞。

(1)过程①中需要用到的酶有_____。另外，利用_____处理也可以直接得到线性化质粒。
(2)据图分析，为保证扩增出所需的目的基因，引物A或引物B要依据_____序列进行设计。过程②经过_____轮循环即可初步得到符合要求的目的基因片段。
(3)过程③中，同源序列1、2中的碱基排序不同，这样设计的好处是_____。图示In-Fusion技术可作为模型使用，一般来说只需要改变图中的_____，即可快速构建出另一种目的基因的重组质粒。
(4)若目的基因是氨苄青霉素抗性基因，以大肠杆菌作为受体细胞时，过程④需要用_____处理大肠杆菌。为检测已转化大肠杆菌的抗性效果，在含氨苄青霉素的液体培养基中培养一段时间后，分别用显微镜计数法和_____法进行计数，若计数结果分别是M、N，则致死率可用（M-N）/M×100％表示，此结果较真实值偏大，原因是_____。

【推荐2】中科院动物研究所通过基因工程技术向猪的基因组内插入一个解耦联蛋白基因（UCPl），经过基因改造的猪瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力强。下图是基因改造过程中涉及的相关限制酶及酶切位点。回答下列问题：

(1)基因工程的操作主要包括___________、基因表达载体的构建、___________和目的基因的检测与鉴定，获取目的基因的常用方法是___________和利用PCR技术扩增目的基因。
(2)在构建基因表达载体过程中，为避免出现质粒和目的基因自身环化，常用___________两种限制酶同时切割质粒和UCP1基因。
(3)图中的抗生素抗性基因的作用是作为___________基因，以便于筛选。
(4)检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因，需要使用的技术是___________；若目的基因已经成功插入，则还需要分别采用分子杂交和抗原抗体杂交技术检测___________和___________。

【推荐3】（一）回答与桑椹汁、桑椹酒和桑椹醋生产有关的问题：
（1）桑椹汁生产：挑选新鲜桑椹制匀浆，匀浆中用果胶酶将果胶彻底酶解得到_______，目的是提高果汁的________。
（2）桑椹酒生产：桑椹汁中加入由_______、发酵红曲、乳酸链球菌素构成的复合发酵工艺组合，能快速启动发酵，并能有效抑制发酵过程中_______污染而导致挥发酸超标；在16．6℃下发酵26天，可获得酒精度为4%的桑椹酒；欲加快发酵过程，可以采取的措施有_______（至少答出2点）。
（3）桑椹醋生产：选择高产醋杆菌时，可将醋杆菌用_______法培养在白色的CaCO₃培养基上，并挑选_______的菌落作为发酵菌种。若增加接种量和接种不同类型醋杆菌，则可以加快产酸的进程，并抑制_______对发酵的影响，从而提高醋酸含量，使口感更纯正。
（二）回答与利用生物技术培养抗虫棉有关的问题
（1）获得目的基因：若用化学方法合成目的基因，则该方法的前提是目的基因_______。
（2）导入目的基因：农杆菌转化法是选择________作为载体，为便于筛选导入成功的细胞，载体上带有________基因。将农杆菌与外植体共培养期间，要发生农杆菌的附着，_______，这是为了获得含目的基因的受体细胞。影响转化效率的因素有农杆菌的数量、共培养的时间和温度等环境条件，还有_______等（至少答出2点）。共培养后，将植物材料转入含植物激素和营养物质的培养基中培养，同时添加_______以去除附着的农杆菌。
（3）检测导入是否成功。常用________ 快速筛选出含目的基因的受体细胞。现有抗虫基因整合到一条染色体的转化植株，欲获得纯合植株，常采用的方法有_________________（至少答出2种）。
（A．聚合酶链式反应   B．同位素标记法   C．抗原抗体杂交 D．光电比色法）