目前,常用PCR技术对病原体进行核酸检测,该技术通过放大或复制人的样本中存在的遗传物质来发挥作用。回答下列问题:
(1)PCR技术是一项根据__________ 原理,在体外对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
(2)进行检测时,需要进行以下操作:①从病人组织样本中提取DNA;②分析PCR扩增结果;③采集病人组织样本;④利用PCR扩增DNA片段。若要得到正确的检测结果,正确的操作顺序应该是___________ (用数字序号表示)。
(3)为了做出正确的诊断,PCR反应所用的__________ 应该能与病原菌的两条单链DNA特异性结合,在反应过程中,使用DNA聚合酶能够从其____________ 端开始连接脱氧核苷酸,快速扩增目的基因。
(4)PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、__________ 三步,其中变性的结果是__________ 。PCR产物常用__________ 鉴定。
(1)PCR技术是一项根据
(2)进行检测时,需要进行以下操作:①从病人组织样本中提取DNA;②分析PCR扩增结果;③采集病人组织样本;④利用PCR扩增DNA片段。若要得到正确的检测结果,正确的操作顺序应该是
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更新时间:2023-02-10 10:30:10
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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【推荐1】人干扰素(IFN)是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时,每个细胞最多只能产生100~1000个干扰素分子,而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产,在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。
(1)基因工程的核心步骤是__________ 。此步骤需要的工具酶是_________ ,其作用部位都是磷酸二酯键。图中四环素抗性基因的作用是用于_________ 。
(2)PCR技术所依据的原理是_____________ 。在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+的原因是__________ 。
(3)使用大肠杆菌作为工程菌,导入重组质粒时要用含__________ 溶液处理,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(感受态)。酵母菌或大肠杆菌都可作受体细胞,但上述过程最好选用__________ (填“酵母菌”或“大肠杆菌”),理由是_________ 。
(4)干扰素基因在工程菌中也能合成人体所需的干扰素,说明生物界中几乎所有生物________ 。
(5)天然的干扰素在体外保存相当困难,为了生产出耐储存干扰素,科学家可通过________ 工程获得这种新药,具体流程是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→___________ →__________ →使用工程菌获得耐储存的干扰素。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/9/7/e2a10767-d3d6-4834-899f-8de822b26a82.png?resizew=605)
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【推荐2】PCR是多聚酶链式反应的缩写,利用PCR技术可对目的基因进行扩增。请回答下列有关问题:
(1)PCR的原理是_________________________________________________________ 。
(2)PCR技术使DNA解链是通过___________ 实现的。
(3)DNA解链后冷却的目的是让___________ 与____________ 相结合。
(4)当温度加热至70~75℃时,酶把单个脱氧核苷酸通过___________ 形成____________ 键连接到引物上。如此逐渐延伸形成互补链,进而使目的基因加倍。
(5)通过重复循环(2)(3)(4)过程,经过n次循环需要___________ 个引物。
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【推荐3】根据现代生物科技有关知识,回答下列问题。
Ⅰ.下图是牛胚胎移植示意图,请回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/1/75a843fc-0439-49d0-bacd-eaf6b07d9593.png?resizew=370)
(1)胚胎移植前可用SRY-PCR法进行性别鉴定,在PCR扩增SRY基因时,需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、特定引物和__________________ 。
(2)从供体母牛子宫内收集胚胎的方法叫冲卵,其生理学基础是________ 。
Ⅱ.近年来,生物工程运用分子生物学的最新成就,发展出一系列的技术,可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
(3)科学家为了建立生产“干扰素”的乳房生物反应器,利用基因工程技术,构建含有启动子、终止子、目的基因、复制原点和______________________ 等元件的基因表达载体,其中启动子的作用是________________________________________ ,最后通过显微注射法导入羊的受精卵中,最终发育成能生产干扰素的转基因羊。
(4)在单克隆抗体制备过程中,诱导______ 细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞,此过程需要两次筛选,第二次筛选出__________________________ ,单克隆抗体的优点有________________________________ 。
Ⅰ.下图是牛胚胎移植示意图,请回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/1/75a843fc-0439-49d0-bacd-eaf6b07d9593.png?resizew=370)
(1)胚胎移植前可用SRY-PCR法进行性别鉴定,在PCR扩增SRY基因时,需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、特定引物和
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Ⅱ.近年来,生物工程运用分子生物学的最新成就,发展出一系列的技术,可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
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