【推荐1】研究人员利用最新基因编辑工具CRISPR/Cas9，成功敲除比格犬的载脂蛋白E（APOE）基因，培育出动脉粥样硬化疾病模型犬“苹果”。利用苹果腹部皮肤体细胞作为样本，建立细胞系，取其细胞核注入比格犬去核卵母细胞中，形成早期胚胎后进行胚胎移植，得到了我国首只克隆犬“龙龙”。下图为克隆犬“龙龙”诞生的流程图，回答下列问题：
   
(1)CRISPR/Cas9系统是由Cas9蛋白和sgRNA构成的RNA-蛋白复合体，其中的_________负责识别并结合特定DNA序列，引导蛋白对目的基因进行编辑。复合体中另一组成分能发挥酶的作用，负责切开_________键，执行对目的基因的编辑，实现对比格犬APOE基因的敲除。
(2)为了获得较多的卵母细胞，需要对供体实验比格犬注射_________。实验比格犬卵母细胞去核过程去除的“核”实际是_________复合物。
(3)取“苹果”的皮肤细胞，并进行体细胞建系。皮肤细胞在培养过程中需要一定的气体环境，将其置于含_________的混合气体的培养箱中进行培养。
(4)克隆本质上是一种无性繁殖，该过程的最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________。为实现这一工序，需用相应激素对受体母犬进行_________处理。

【推荐2】科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示），请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养之前，要对动物组织用___进行处理分散成单个细胞。培养过程中随着细胞生长会产生___现象导致细胞生长受限。
(2)为使核移植的胚胎或动物的遗传物质几乎全部来自有重要价值的动物体，在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞前，必须先进行的操作是___。
(3)以上过程获得奶牛所用到的细胞工程技术包括___。
(4)若获得的克隆动物与体细胞供体动物性状相同吗？___（填“完全”或“不完全”），从遗传物质的角度分析其原因是___。
(5)在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是___。

A．卵母细胞大，便于操作

B．卵母细胞含有的营养物质多

C．卵母细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达

D．重组细胞才具有全能性

【推荐3】我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实施。十二年前，33岁的产妇朱女士利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩。2016年3月，朱女士决定生育第二个孩子，医院找到当年为她冷冻的“胚胎”，经过检胎等程序，朱女士已成功怀孕12周。冷冻12年后复苏、植入，该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝。有意思的是，这个沉睡了12年的“冰宝宝”，跟自己11岁的亲哥哥其实是“同龄”。请回答以下相关问题：
（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，在取卵前通常需要注射_____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。试管婴儿技术采用了体外受精等技术，精子顶体内含有的 ___________能协助精子穿过卵细胞的___________________________最终进入卵细胞内完成受精作用。
（2）随着胚胎的进一步发育，胚胎的内部会出现含有液体的囊腔——囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做___________。
（3）胚胎的早期培养与动物细胞培养一样，都需要满足_____________________及营养等条件。
（4）若做试管婴儿的夫妇中，妻子患有线粒体疾病（线粒体DNA缺陷），丈夫正常，则子女患病情况为____________，该疾病的遗传____________（填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律。那么这对夫妇要想获得健康的孩子，可通过特殊的设计试管婴儿技术即“三亲婴儿”（医生要去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育），“三亲婴儿”的获得过程，除运用胚胎工程的技术手段外，还要特别运用_______________________________技术。

【推荐1】如图为牛胚胎移植过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）②阶段常用_______激素对供体母牛进行处理，其目的是获得更多的卵子。
（2）冲卵的生理基础是_______________________________________。
（3）③阶段对胚胎进行质量检查，这时的胚胎应发育到_______________阶段。
（4）若要通过④获得遗传物质完全相同的多个新个体，可对③阶段检查合格的胚胎进行__________________技术处理。

【推荐2】阅读资料，回答问题：
资料一：科学家将蜘蛛丝蛋白基因转入山羊机体内，然后从羊奶中提取蛋白质，抽成丝后坚如钢铁。
资料二：继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。
（1）培育转基因动物用到的生物技术是______________________________________，在培育转基因动物时，通常要将外源基因转入________中，其原因是_______________________________________。如何检测受体细胞是否含有目的基因？_________________________________________________。
（2）为使目的基因在后代中长期保持，应将目的基因导入细胞的_________________中。
（3）从提取、分离产物的角度分析，乳腺和膀胱哪一个作为转基因动物的生物反应器更好？__________；原因是___________________________________________。

【推荐3】以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，请据图回答下列有关问题：

(1)图中对良种奶牛进行处理时用到的激素是__________________，①过程必须用到________酶，②过程使用的是____________酶。③表示__________技术，④表示基因工程中__________________过程；若方法C是最常用的将目的基因导入动物细胞的方法，则方法C是______________。
(2)如果转基因牛E的牛奶中含有______________________________，则说明血清白蛋白基因在个体水平已表达成功，其他细胞中不含血清白蛋白是__________________________的结果。
(3)图中A和B分别是指____________________和__________________。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，是目前最好的天然抗癌药物之一。最初的紫杉醇都是从红豆杉树皮中提取的，无法满足人们的需求。利用植物组织培养获得紫杉醇的过程如图所示：

(1)取自红豆杉树皮的外植体需要使用75%的酒精和______消毒处理，才能接种到培养基。用纤维素酶和果胶酶除去愈伤组织的细胞壁获取______的过程中，常常在______ （较高/较低）渗透压的溶液中进行。
(2)植物培养基中最常用的糖类是蔗糖，蔗糖除了作为碳源和能源外，还具有______的作用。
(3)外植体经诱导形成愈伤组织，并由愈伤组织培养阶段转入细胞悬浮培养阶段，细胞悬浮培养时振荡的意义是____________。
(4)如果将外源基因导入红豆杉进行遗传改造，下图表示构建重组DNA的过程示意图，载体质粒PO具有四环素抗性基因（tet^r）和氨苄青霉素抗性基因（amp^r），回答下列问题：

图中酶1和酶3分别是______、______。获得的重组质粒通常通过_________法导入愈伤组织。
（二）新型冠状病毒是一种具有很强传染能力的RNA病毒。快速、准确地检测新型冠状病毒对病情的确诊和疫情的防控尤为重要，疫苗及药物的研制等都离不开生物技术与工程的支持。
(5)新冠核酸检测采用实时荧光PCR技术：通过咽拭子采集的样本转移至含病毒保存液的采样管中。病毒RNA需要经过______酶作用生产cDNA，才能作为PCR的模板。
(6)效应细胞毒性T细胞能识别被感染细胞表面的______ 。阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染，可能产生假阴性的因素有______ 。
a.取样太早，样本中病毒量少，达不到实时荧光PCR检测阈值
b.样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解
c.病毒发生变异
(7)利用______技术将骨髓瘤细胞和______细胞相互融合形成______细胞，此细胞生产的抗新冠病毒的单克隆抗体，不仅可以用于对患者的治疗，还能作为特异探针，利用______技术对高风险人群进行检测。

【推荐2】研究人员欲比较肠杆菌YT1和芽孢杆菌YP1两类细菌降解塑料中聚乙烯（PE）的能力，并通过基因工程拼接黄粉虫肠道内菌株WZ降解塑料中聚氯乙烯（PVC）的胞外酶基因A，培育降解塑料的“超级菌”。请回答下列问题：
(1)菌株的筛选。配置固体培养基，接种菌株后表层覆盖0.1mm厚度的PE塑料，分组实验，结果如图所示：

培养基及 接种菌株	培养基1	培养基2	培养基3
	单独培养并接种YT1	单独培养并接种YP1	混合培养YT1和YP1后，选取YP1接种
降解圈直径R1（cm）	1.22	1.55	1.43
菌落R2（c2（cm）	0.35	0.55	0.43
R1/R2	3.5	2.8	3.3

从功能上讲，该培养基属于___________培养基。培养基3中接种混合培养后的YP1，与单独培养并接种YP1比较，降解PE的能力____________，其原因可能是___________。
(2)培育“超级菌”。对菌株WZ的A基因测序可知，如果在其调节功能区增加一个碱基对A／T，则可以大大增强其基因表达能力。通过经典的大引物PCR定点诱变技术在体外改造A基因，操作过程如图1。改造A基因与图2所示的质粒构建表达载体，培育“超级菌”。




①通过PCR1构建大引物：需要两步，先后使用的引物分别是___________。PCR中引物的作用是___________。
②通过PCR2获得完整的改良的A基因。
③构建改良基因表达载体：为实现质粒和改良基因的准确连接，应选用的限制酶是___________。
④将表达载体导入受体菌株。
⑤检测和鉴定：在含氨苄青霉素和β-半乳糖苷的平板上培养一段时间后，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是___________。

【推荐3】科学网2022年2月10报道，我国科学家建立了蛋白质从头设计新方法。报道中记述我国科研人员从头设计的9种蛋白质分子的高分辨晶体结构，其中5种蛋白质具有不同于已知天然蛋白的新颖结构。请回答下列相关问题：
(1)可以通过蛋白质工程对相关蛋白质进行改造，其基本途径是从预期____________出发，通过设计蛋白质的结构和推测____________序列，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因。该工程是一种通过______________________，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
(2)若要利用我国科学家建立的蛋白质从头设计的新方法获得全新的氨基酸序列，通过蛋白质工程、基因工程等途径从大肠杆菌中获得蛋白质，利用PCR技术对目的基因扩增，使用PCR技术扩增的前提______________________
(3)构建基因表达载体的目的是使________________。构建的基因表达载体除含目的基因外，还必须有________________（至少答出三点）等。
(4)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么这一启示是________________________。