组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 目的基因的获取 > PCR扩增的原理与过程
题型:非选择题-解答题 难度:0.85 引用次数:262 题号:18898965
转基因生物反应器是指利用基因工程技术手段将外源基因转化到受体中进行高效表达,从而获得具有重要应用价值的表达产物的生命系统,包括转基因动物、转基因植物和转基因微生物。如图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图,请结合相关知识回答下列问题:

(1)若利用图示流程构建小鼠乳腺生物反应器批量生产人抗利尿激素,应先从人体________细胞中获取_____________,通过反转录获得cDNA,再PCR后获得抗利尿激素基因。一条单链cDNA在PCR仪中进行n次循环,需要消耗________个引物。PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程,故反应体系中需加入____________________酶。构建的表达载体导入的受体细胞一般选用受精卵,原因是___________________
(2)膀胱反应器有着和乳腺反应器一样的优点:收集产物蛋白比较容易,不会对动物造成伤害。此外膀胱生物反应器还具有的显著优势在于不受转基因动物的______________(答2点即可)的限制,而且从尿中提取蛋白质比在乳汁中提取简便、高效。
(3)若图中的受体细胞是大肠杆菌,通常用________处理大肠杆菌,其目的是使大肠杆菌处于______________的生理状态。理论上制备能分泌抗利尿激素的“工程菌株”时,酵母菌比大肠杆菌更适合作为受体细胞,从细胞结构与功能的角度分析,原因是:_____________

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【推荐1】基因治疗将推动21世纪的医学革命。某高血糖患者患有遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素),相关基因治疗设计过程如下图所示,请据图回答:

(1)图示过程中,①和②代表的细胞或结构分别是___,③和④所示的生物工程技术分别是___
(2)④所示的生物工程技术中,获取的健康胰岛B细胞基因可通过PCR技术进行大量扩增.进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中___的设定与引物有关。
A.变性温度B.复性(冷却)温度
(3)培养重组细胞b的培养液中除加入各种营养物质外,通常还需加入___等一些天然成分,并需定期更换培养液,更换培养液的目的是___
(4)图示基因治疗过程称为___(填“体内”或“体外”)基因治疗。
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(1)上图所示②④过程中必须用到的酶有3种,分别是_______________
(2)获取目的S蛋白基因是各种疫苗研制途径需要解决的首要问题,通常采用以下两种方法,一是利用病毒的RNA进行逆转录得到DNA   后,利用PCR技术扩增得到基因S,PCR过程每次循环分为三步,其中温度最低的一步是_____;二是完成病毒S基因测序后,直接人工合成基因S。
(3)为了制备蛋白疫苗,可以通过基因工程技术获得大量蛋白S,基因工程的基本操作流程中最关键的步骤是_____
2022-07-09更新 | 122次组卷
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(1)转基因抗虫棉所需的杀虫基因,可用PCR技术大量扩增。扩增过程中需要将温度冷却至55~60℃,目的是____________。获得大量杀虫基因后,还需利用两种酶构建基因表达载体。为了使杀虫基因和质粒能正确地成功拼接,一般操作方法是____________
(2)将杀虫基因导入棉花细胞有多种方法,我国独创的方法是____________,另外还可以利用农杆菌转化法让另杀虫基因的遗传特性在棉花细胞里得以稳定维持和表达,理由是____________
(3)杀虫基因导入棉花细胞后,可利用放射性同位素标记的目的基因的DNA片段作为____________,目的是检测____________。若是利用抗原一抗体杂交技术,结果显示出杂交带,则说明____________
(4)除了上述的分子检测外,有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。简述在个体水平鉴定杀虫基因是否成功表达的实验思路:____________
2023-02-05更新 | 221次组卷
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