脂联素(APN)是蛋白类激素。血清中APN的含量可直接反映人体健康情况,低水平的APN可能与肥胖、糖尿病、心血管疾病等相关。开发APN的快速检测方法具有重要的意义。
(1)科研人员通过多次注射______ 对实验小鼠进行免疫,从免疫小鼠的脾中收集______ 细胞与骨髓瘤细胞混合,并加入______ (试剂)促进融合,经选择、培养,最终在培养液中提取分离得到A1、A2、A3等多种抗APN的单克隆抗体。
(2)为确定A1、A2、A3的抗原结合位点是否相同,将等量A1、A2、A3分别固定于反应体系中并结合APN,再分别加入酶E标记的A1、A2、A3,反应后洗掉未结合抗体,加入酶E的底物(可被酶E催化发生显色反应),通过与对照组比较颜色变浅的程度计算出结合抑制率,结果如表。以抑制率50%为界值进行实验数据分析
该实验所得结论是__________________
(3)传统的双抗夹心法可以快速检测样本中有无特定抗原,原理如图1。当胶体金停留在T线或C线,将显现出红色。仅C线显红色,为阴性结果;T线和C线均显红色,为阳性结果;C线不显色,为无效结果。请解释产生阳性结果的原理________________________ 。______ 、______ 、抗A2的抗体。
②简述如何通过检测线的显色结果来判断检测血清中APN的相对含量______ 。
(1)科研人员通过多次注射
(2)为确定A1、A2、A3的抗原结合位点是否相同,将等量A1、A2、A3分别固定于反应体系中并结合APN,再分别加入酶E标记的A1、A2、A3,反应后洗掉未结合抗体,加入酶E的底物(可被酶E催化发生显色反应),通过与对照组比较颜色变浅的程度计算出结合抑制率,结果如表。以抑制率50%为界值进行实验数据分析
抑制率(%) | E酶标抗体 | |||
A1 | A2 | A3 | ||
固相抗体 | A1 | 61 | 23 | 33 |
A2 | 18 | 71 | 56 | |
A3 | 27 | 63 | 73 |
(3)传统的双抗夹心法可以快速检测样本中有无特定抗原,原理如图1。当胶体金停留在T线或C线,将显现出红色。仅C线显红色,为阴性结果;T线和C线均显红色,为阳性结果;C线不显色,为无效结果。请解释产生阳性结果的原理
(4)有人在此基础上研发了双抗夹心法分段半定量检测,如图2。三条T线(T1、T2、T3)分别包埋一定量的相同抗体。
①利用上述研究获得的单克隆抗体对血清中APN半定量检测,在图2的金垫、T线、C线包埋的抗体分别是:
②简述如何通过检测线的显色结果来判断检测血清中APN的相对含量
更新时间:2023-07-09 22:33:03
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【推荐1】细菌侵入人体后,有些种类寄生在宿主细胞内,另一些种类存在于人体的内环境中。为探究某种细菌a的存在部位,科学家以从未感染过此细菌的小鼠作为研究对象(小鼠的生理状况相同),结果如下表。回答以下相关问题:
(分离的T细胞中含有效应T细胞;“+”表示细菌a数量的多少)
(1)实验中,对照组的是______________________ 。
(2)步骤2中小鼠感染细菌a的天数应___________ ,这属于对实验中___________ 变量的控制,在注射细菌a或生理盐水之前,还需要增加的操作是______________________ 。
(3)从结果分析,由于乙组和丁组的细菌a数量基本相同,说明通过___________ 免疫不能有效的抑制细菌a的增殖。通过甲组的结果说明细菌a生活在___________ 。
步骤 组别 | 甲 | 乙 | 丙 | 丁 | ||
1 | 给小鼠注射适量的细菌a | 给小鼠注射等量的生理盐水 | ||||
分离T细胞 | 分离血清 | 分离T细胞 | 分离血清 | |||
2 | 分别注射已经感染细菌4的小鼠,培养一段时间 | |||||
3 | 检测小鼠脾脏中细菌a的数量 | |||||
结果 | + | + + + + | + + + + | + + + + |
(1)实验中,对照组的是
(2)步骤2中小鼠感染细菌a的天数应
(3)从结果分析,由于乙组和丁组的细菌a数量基本相同,说明通过
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【推荐2】为研究某减毒伤寒沙门菌株(SPA)对小鼠免疫保护的效力,研究小组提供了下面研究思路,请以血清中SPA抗体和小鼠死亡率为指标,预测实验结果,并进行分析。
材料与试剂:生长状况相似的小鼠若干只、含减毒株SPA的PBS、含强毒株SPA的PBS、PBS等。
(要求与说明:接种方式不做要求;血清中SPA抗体具体检测方法不做要求;PBS是磷酸缓冲盐溶液,起到溶解保护试剂的作用;首次接种后第3天开始产生相应抗体)
回答下列问题:
(1)完善实验思路
①动物免疫
免疫组:取小鼠30只,每只接种____________ ;
对照组:取小鼠30只,每只接种____________ 。
于第10天分别以相同的剂量和方式进行二次免疫。
②血清SPA抗体的测定
首次免疫接种后每隔一定的天数从免疫组和对照组中每次分别取3只小鼠采血分离血清,检测血清SPA抗体水平,记录并统计分析。
③保护效率检测试验
A组:首次免疫接种后第21天随机从免疫组中另取出5只,接种___________ 。
B组:首次免疫接种后第21天随机从对照组中另取出5只,接种____________ 。
C组:____________ 。
接种后连续观察3周各组小鼠的死亡情况并记录小鼠的临床表现。
(2)结合图1,预测免疫组小鼠的血清SPA抗体水平的变化_________ (用曲线图表示)。
(3)分析与讨论
①本研究实验中两次接种疫苗的目的是____________ 。
②接种疫苗后一段时间内部分小鼠有轻微、短暂的厌食、精神不振等临床表现,欲减轻或消除该表现,请从疫苗类型的角度考虑,可采取的措施有____________ 。
材料与试剂:生长状况相似的小鼠若干只、含减毒株SPA的PBS、含强毒株SPA的PBS、PBS等。
(要求与说明:接种方式不做要求;血清中SPA抗体具体检测方法不做要求;PBS是磷酸缓冲盐溶液,起到溶解保护试剂的作用;首次接种后第3天开始产生相应抗体)
回答下列问题:
(1)完善实验思路
①动物免疫
免疫组:取小鼠30只,每只接种
对照组:取小鼠30只,每只接种
于第10天分别以相同的剂量和方式进行二次免疫。
②血清SPA抗体的测定
首次免疫接种后每隔一定的天数从免疫组和对照组中每次分别取3只小鼠采血分离血清,检测血清SPA抗体水平,记录并统计分析。
③保护效率检测试验
A组:首次免疫接种后第21天随机从免疫组中另取出5只,接种
B组:首次免疫接种后第21天随机从对照组中另取出5只,接种
C组:
接种后连续观察3周各组小鼠的死亡情况并记录小鼠的临床表现。
(2)结合图1,预测免疫组小鼠的血清SPA抗体水平的变化
(3)分析与讨论
①本研究实验中两次接种疫苗的目的是
②接种疫苗后一段时间内部分小鼠有轻微、短暂的厌食、精神不振等临床表现,欲减轻或消除该表现,请从疫苗类型的角度考虑,可采取的措施有
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【推荐3】植物血球凝集素(PHA)皮试是测试T淋巴细胞功能的一种常用方法。将PHA注入皮内,能刺激T淋巴细胞释放淋巴因子,引起皮肤局部血管充血等症状。回答下列问题:
(1)当病原体初次侵染机体时,吞噬细胞将其摄取处理后,把___________ 呈递给T细胞,促进T细胞分泌淋巴因子,然后___________ 细胞在淋巴因子的作用下迅速增殖分化成___________ 细胞,此过程称为体液免疫。
(2)给正常人和艾滋病晚期患者注射PHA后,前者很短时间内出现了皮肤充血症状,后者几乎不出现该症状,原因可能是____________________ 。
(3)有人认为免疫力低下是患癌的原因之一,请从免疫调节的功能解释该观点:_____________ 。
(1)当病原体初次侵染机体时,吞噬细胞将其摄取处理后,把
(2)给正常人和艾滋病晚期患者注射PHA后,前者很短时间内出现了皮肤充血症状,后者几乎不出现该症状,原因可能是
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【推荐1】新型冠状病毒是一种RNA病毒,其表面的棘突蛋白(简称S蛋白)是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂,又可阻断病毒的黏附和入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图,请回答下列问题:______ ,目的是______ ,取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间,再加入培养液可制成单细胞悬液。
(2)步骤④为诱导B淋巴细胞核骨髓瘤细胞融合,与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______ 诱导融合。融合操作后,体系中出现多种类型细胞的原因是______ 。
(3)步骤⑤选出的杂交瘤细胞______ (填“有”或“无”接触抑制现象)。杂交瘤细胞在培养的过程中,要控制好气体环境,其中CO2的作用是______ 。
(4)进行步骤⑥的原因是______ 。步骤⑥含多次筛选,筛选依据的基本原理是______ ,步骤⑦是指从______ 获取大量的单克隆抗体,这种抗体的优点是______ 。
(1)步骤①必须给小鼠注射
(2)步骤④为诱导B淋巴细胞核骨髓瘤细胞融合,与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用
(3)步骤⑤选出的杂交瘤细胞
(4)进行步骤⑥的原因是
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【推荐2】已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合,加促融剂促进细胞融合,获得杂种细胞,并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题:____________________________________________________________________ 。
(2)①过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________ 。
(3)②过程为________ 培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________ 。
(4)④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠________ 内培养,体内培养与体外培养相比,其优点是____________________ 。
(5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需要③过程向培养液中加入_____________ ,理由是杂交瘤细胞可利用__________________ 途径合成DNA,从而才能在该培养液中增殖。
(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是
(2)①过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是
(3)②过程为
(4)④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠
(5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需要③过程向培养液中加入
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【推荐3】现代生物工程技术推动了医药学、免疫学的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理,回答下列问题:
(1)据权威机构预测到2100年,借助辅助生殖技术(即试管婴儿技术)诞生的人数可能将达到全球总人口的3.5%——约4亿人。试管婴儿技术是体外受精技术、早期胚胎培养和_________ 技术等人工助孕技术的俗称。通常情况下,医生会为受孕者移植1~3枚胚胎以提高受孕率,往往是借助于胚胎分割技术得到多个胚胎的,胚胎分割操作过程需要特别注意的问题是将_____________________________ 均等分割。
(2)人体器官移植面临的主要问题之一是免疫排斥。目前临床上提高器官移植成活率的主要措施是使用_____________________ ,如类固醇、环孢霉素A等,这些药物可使免疫系统中的_____ 淋巴细胞增殖受阻。人们还可以通过对患者的_____________________ 进行诱导定向分化培育出特定人造组织器官,进而解决免疫排斥问题。
(3)单克隆抗体制备融合体系中除含有杂交瘤细胞外,还有_________________ ,细胞融合体系中出现多种细胞类型的原因是_______________________________________________ (答两点即可)。
(1)据权威机构预测到2100年,借助辅助生殖技术(即试管婴儿技术)诞生的人数可能将达到全球总人口的3.5%——约4亿人。试管婴儿技术是体外受精技术、早期胚胎培养和
(2)人体器官移植面临的主要问题之一是免疫排斥。目前临床上提高器官移植成活率的主要措施是使用
(3)单克隆抗体制备融合体系中除含有杂交瘤细胞外,还有
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【推荐1】Ⅰ.图为探究绿色植物光合作用速率的实验示意图,装置中的CO2缓冲液可维持瓶内的CO2浓度。该装置放在20℃环境中。实验开始时,针筒的读数是0.2mL,毛细管内的水滴在位置X6mL的读数,才能使水滴仍维持在X的位置。据此实验回答:
(1)若以释放出的氧气量来代表光合作用速率,该植物的光合作用速率是________ mL/h。
(2)用该装置测得的光合作用速率,__________ (高于/低于/等于)实际的光合速率,原因是____________________ 。
(3)若用该装置测定植物的呼吸速率,要对该装置进行的处理是___________ 。
Ⅱ.有研究表明如果在种子萌发期给种子“听音乐”,可以在一定程度上影响种子的萌发,现某科研小组要探究不同频率(低频、中频、高频)的声音对小麦种子萌发的影响,请回答以下问题:
(1)进行实验时,为了遵循探究实验的________ 原则,需要将小麦种子至少分为四组;
(2)以上四组种子分别给予如下处理__________________________________________ ;
(3)将以上四组种子分别置于______________________________ 条件下培养相同时间;
(4)统计四组种子的萌发率。
(5)预期实验结果:________________________________ 。
(6)根据实验结果,得出的实验结论是:不同频率的声音均起促进种子萌发的作用,且频率越高,促进作用越强。
(1)若以释放出的氧气量来代表光合作用速率,该植物的光合作用速率是
(2)用该装置测得的光合作用速率,
(3)若用该装置测定植物的呼吸速率,要对该装置进行的处理是
Ⅱ.有研究表明如果在种子萌发期给种子“听音乐”,可以在一定程度上影响种子的萌发,现某科研小组要探究不同频率(低频、中频、高频)的声音对小麦种子萌发的影响,请回答以下问题:
(1)进行实验时,为了遵循探究实验的
(2)以上四组种子分别给予如下处理
(3)将以上四组种子分别置于
(4)统计四组种子的萌发率。
(5)预期实验结果:
(6)根据实验结果,得出的实验结论是:不同频率的声音均起促进种子萌发的作用,且频率越高,促进作用越强。
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【推荐2】高血脂会对人体健康产生严重威胁,多种疾病与血液胆固醇指标过高密切相关。
(1)胆固醇分子被特定蛋白质包裹形成低密度脂蛋白(LDL)。如图l,血液中的LDL与细胞膜上受体结合后一起进入细胞,二者在囊泡内_____ ,其中LDL进入_____ 被降解,胆固醇分子进一步被细胞利用;LDL受体被W蛋白和C蛋白一起回收至细胞膜,使血液中LDL维持在正常水平。
(2)研究发现,PCSK9蛋白在胆固醇代谢中具有一定的调节作用。如图1,PCSK9能够_____ ,进而阻止受体回收至细胞膜,导致血液中LDL量升高。将经过_____ 的小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合,利用_____ 培养基筛选及抗体检测得到杂交瘤细胞,产生抗PCSK9单克隆抗体可有效降低血液中LDL量。
(3)他汀类药物是目前应用最广泛的降血脂药物,主要通过抑制胆固醇合成途径的关键酶发挥作用。利用实验小鼠对他汀类药物与PCSK9单抗联合使用进行研究,实验设计的分组应包括_____ (选择字母序号)。实验结果表明,对于高血脂小鼠,二者联合使用的降血脂效果均好于各自单独使用。
a、正常饲料b、高脂饲料c、正常饲料+他汀类药物d、高脂饲料+他汀类药物e、正常饲料+PCSK9单抗f、高脂饲料+PCSK9单抗g、正常饲料+他汀类药物+ PCSK9单抗h、高脂饲料+他汀类药物+PCSK9单抗
(4)降脂药领域另一个新兴靶点是ASGRcl蛋白,其编码基因的某些突变会降低基因活性,使血液中LDL水平显著降低。LXR蛋白是一类核受体,通过激活相关基因的转录参与胆固醇的运输。为探究二者在调节血脂中的关系,研究人员进行了相关实验,结果如图2。
实验结果表明,Asgrl敲除小鼠依赖LXR蛋白将胆固醇外排到胆汁,然后通过粪便从体内排出,从而降低血脂水平。判断依据是_____ 。
(5)综合以上材料,目前降脂药物的设计思路有_____ 。
(1)胆固醇分子被特定蛋白质包裹形成低密度脂蛋白(LDL)。如图l,血液中的LDL与细胞膜上受体结合后一起进入细胞,二者在囊泡内
(2)研究发现,PCSK9蛋白在胆固醇代谢中具有一定的调节作用。如图1,PCSK9能够
(3)他汀类药物是目前应用最广泛的降血脂药物,主要通过抑制胆固醇合成途径的关键酶发挥作用。利用实验小鼠对他汀类药物与PCSK9单抗联合使用进行研究,实验设计的分组应包括
a、正常饲料b、高脂饲料c、正常饲料+他汀类药物d、高脂饲料+他汀类药物e、正常饲料+PCSK9单抗f、高脂饲料+PCSK9单抗g、正常饲料+他汀类药物+ PCSK9单抗h、高脂饲料+他汀类药物+PCSK9单抗
(4)降脂药领域另一个新兴靶点是ASGRcl蛋白,其编码基因的某些突变会降低基因活性,使血液中LDL水平显著降低。LXR蛋白是一类核受体,通过激活相关基因的转录参与胆固醇的运输。为探究二者在调节血脂中的关系,研究人员进行了相关实验,结果如图2。
实验结果表明,Asgrl敲除小鼠依赖LXR蛋白将胆固醇外排到胆汁,然后通过粪便从体内排出,从而降低血脂水平。判断依据是
(5)综合以上材料,目前降脂药物的设计思路有
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【推荐3】菠菜叶肉细胞类囊体膜上发生的部分生理过程如图所示,其中甲~丁表示物质,反应中心 PSⅡ、PSⅠ中含有特殊状态的叶绿素a—P680 或P700(可分别吸收680nm或700nm的光)。水光解产生的电子(e⁻)沿电子传递链传递给甲的过程中形成膜两侧H⁺浓度梯度。若物质甲不足,电子会传递给 O₂ 生成 ROS,ROS会损伤生物膜形成光抑制。物质X通过与PQ竞争PSⅡ上的结合位点而阻碍电子传递,物质 Y 则可以阻断甲和电子的结合。
(1)用纸层析法分离叶绿体色素,得到四条色素带,P680 和P700 应包含在距离滤液细线的第____ 条色素带中。物质甲是____ ,物质乙在暗反应中的作用是____ 。PC属于____ (填“亲水性”或“疏水性”)物质。
(2)若给适宜光照条件下的菠菜叶片喷施适量物质 X水溶液,X会与 PQ竞争PSⅡ上的结合位点而阻碍电子传递,进而____ 影响类囊体膜两侧 H⁺浓度梯度,导致光反应产生的物质丁____ 。
(3)若给强光条件下的菠菜叶片喷施适量物质 Y 水溶液,叶片的光抑制将____ ,据图分析原因是____ 。
(4)现有分离到的含PSⅠ或PSⅡ的类囊体,写出鉴定类囊体中含有的反应中心是PSⅠ还是 PSⅡ的实验思路并预期结果____ 。
(1)用纸层析法分离叶绿体色素,得到四条色素带,P680 和P700 应包含在距离滤液细线的第
(2)若给适宜光照条件下的菠菜叶片喷施适量物质 X水溶液,X会与 PQ竞争PSⅡ上的结合位点而阻碍电子传递,进而
(3)若给强光条件下的菠菜叶片喷施适量物质 Y 水溶液,叶片的光抑制将
(4)现有分离到的含PSⅠ或PSⅡ的类囊体,写出鉴定类囊体中含有的反应中心是PSⅠ还是 PSⅡ的实验思路并预期结果
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