黏膜免疫系统作为第一道免疫防御屏障，能够参与保护生物体免受病原体的感染。多聚免疫球蛋白受体（pIgR）作为黏膜免疫防御的一个关键因子，能够介导免疫球蛋白跨过上皮细胞进行转运和分泌，发挥免疫球蛋白在黏液中清除病原体和毒素的作用。研究人员从大菱鲆提取pIgR基因，针对不同器官组织开展了pIgR基因研究（如下图），其中DEPC物质可与RNA酶结合使酶发生变性。

                  

(1)研究人员通过mRNA得到cDNA时所需要的酶是________________，提取过程加入DEPC物质作用是_______________。
(2)为将pIgR基因以正确方向插入质粒需要双酶切，这就要求在设计引物时，需在引物的5'端加入相应的酶切位点。已知a链为转录模板链，引物1的5'端酶切位点的碱基序列为GAATTC，则引物2的5'端酶切位点的碱基序列为_______________，理由是_______________。
(3)构建pIgR基因表达载体后，与处于感受态的大肠杆菌菌株混合，pIgR基因表达载体进入菌体内，此过程称为_______________。然后将菌液涂布在含有_______________的LB固体培养基培养，加入诱导剂诱导pIgR基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。
(4)在整个实验过程中多次使用PCR技术，如利用PCR技术扩增pIgR基因时，需要在反应体系中加入______________、_____________、引物、耐高温的DNA聚合酶、缓冲液等物质，设置PCR仪器的控制参数，启动三步骤扩增过程，在三个步骤中温度最低是______________。