不对称PCR的基本原理是采用不等量的引物，产生大量的单链目标DNA。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50~1：100。在PCR反应的早期循环（约20次）中，扩增产物主要是双链DNA，当后期数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA，过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
| A．PCR反应缓冲液中一般需添加Mg2+，以激活DNA聚合酶 |
| B．复性时引物与模板链3'端的碱基序列通过互补配对结合 |
| C．PCR进行最初20次循环的目的是增加模板DNA的量 |
| D．不对称PCR产生的大量单链DNA是由限制性引物延伸而来 |
更新时间：2024-01-14 15:31:22
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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【推荐1】下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验和“PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
| A．利用DNA不溶于酒精但某些蛋白质溶于酒精的原理可以分离DNA和蛋白质 |
| B．鉴定DNA时需使用二苯胺试剂，该试剂需现用现配，加入后置于沸水浴加热 |
| C．进行琼脂糖凝胶电泳时，长度相同的DNA片段会出现在同一位置出现条带 |
| D．利用PCR扩增4次后，得到的DNA含两种引物的DNA片段所占比例为1/8 |
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【推荐2】有关PCR技术，下列叙述不正确的是（ ）
| A．是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术 |
| B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 |
| C．PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸 |
| D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸 |
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【推荐3】甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ）
| A．电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定 |
| B．图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶 |
| C．通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因，要得到24个不含黏性末端的R蛋白基因至少需要5次循环 |
| D．构建好的重组质粒长度共2000bp，据图乙可推测BamHⅠ在重组质粒上有3个酶切位点 |
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