【推荐1】叶绿体是植物基因工程的理想受体，将外源基因整合到叶绿体DNA中往往能够获得高效表达，由此发展出叶绿体基因工程。回答下列问题：
（1）叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体，表达载体中除目的基因外，还必须有启动子、终止子、复制原点、______等。启动子的作用是___________识别和结合的位点。
（2）叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性，若目的基因来源于真核生物，则往往选用目的蛋白对应的是______________（填“cDNA片段”或者“基因组DNA片段”）作为目的基因。
（3）将目的基因导入烟草细胞叶绿体时，要穿过多层生物膜，因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入叶绿体，提高转化效率，该方法称为____。
（4）外源基因通常被定点整合到叶绿体DNA的非基因序列中，这样做的目的是____________________
（5）转入叶绿体中的基因不随花粉传递给子代，理由是________

【推荐2】番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

(1)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做_________。
(2)从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了________________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
(3)普通番茄细胞导入目的基因后，经③过程形成______，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。
(4)如图甲，获得目的基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的_____处，DNA连接酶作用于______处。（填“a”或“b”）

(5)如图乙是该目的基因表达过程中的一个阶段，图中3和4的核苷酸相同否？___
说明理由_____________________________________________。

【推荐3】镰孢菌引起的小麦赤霉病被称为小麦“游症”，是威胁粮食安全的重大国际性难题。我国科学家从小麦近缘属植物长穗偃麦草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（编码一种谷胱甘肽S-转移酶），为解决小麦赤霉病的世界性难题提供了“金钥匙”。研究发现，用光诱导型启动子（PrbcS）能够使Fhb7基因表达，其结合T基因后能使Fhb7基因更高水平表达。
(1)PrbcS是一段有特殊结构的DNA片段，能被________识别并结合，驱动基因的持续________。
(2)通过PCR技术扩增Fhb7基因片段，反应过程一般由95℃热变性、55～60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤，经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃综合考虑了两个因素，这两个因素是________和________，若研究人员在反应缓冲溶液中加入4种dNTP时，误加入了单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3位置缺少一个羧基），则子链会停止延伸，分析其原因是__________________。
(3)下图中甲、乙均为Fhb7基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程。

（注：Km^r为卡那霉素抗性基因，origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点）
区别含有中间载体甲-PrbcS-*T与含有重组载体乙-PrbcS-*T的微生物的方法是________。经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0．3kb，经图示信息分析，PrbcS-T的长度约为_______。据图分析，形成重组载体乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶________切割，图中重组载体乙-PrbcS-*T问号处有_____种限制酶的酶切位点。

【推荐1】长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

(1)在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有_________________。
(2)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核的形成；⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为____________________（填序号）。
(3)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有__________________________________
(4)试管牛E的性别为_________________，克隆羊多利的性状和____________ （黑面绵羊\白面绵羊）最接近。
(5)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_________________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的_______________冲洗出来。
(6)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________；图中标号3为__________，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(7)动物的早期胚胎移植到同种且____________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜______________________。

【推荐2】下图表示科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的技术流程。请回答下列问题：
   
(1)培养小鼠上皮细胞的过程中，贴满瓶壁的细胞需用_____酶处理，然后分瓶继续培养。重组胚胎细胞的细胞核来自_____。
(2)步骤①中，应选择培养至_____（填时期）的卵母细胞作为受体细胞。步骤②所用的培养液中，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、核苷酸，以及_____（答出3点）等物质，
(3)步骤③中将基因导入ES细胞的方法通常是_____法；将基因导入ES细胞而不是导入上皮细胞是因为ES细胞具有_____。
(4)为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用_____技术。根据治疗流程不同，基因治疗大体可分为体内基因治疗和体外基因治疗，图示治疗过程属于_____。

【推荐3】犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题：   

(1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有______（答出2点）。步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是_____。
(2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是_______。对杂交细胞等用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行______，经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。
(3)体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加_____以补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染。与培养大多数动物体细胞不同，骨髓瘤细胞在培养过程中不会出现_____的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。
(4)对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行检测，所依据的原理是_____。