【推荐1】下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题。

（1）图中①所示的结构名称是______________。
（2）图中③④所示的生物技术名称分别是_______、______。
（3）过程③通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它____________________。
（4）图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是_________，该种基因治疗所属类型为_____________。

【推荐2】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

请回答：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_____。
（2）ES细胞除来源于早期胚胎外，还可来源于______，它在形态上的特性______；在功能上的特性是______。
（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的_____设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_____的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的_____，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。

【推荐3】基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是：从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因、连接，中间插入正常PKU基因和标记基因，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。

（1）构建重组载体时，常用的工具酶有________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞_________。
（2）为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的_________取出，并用_________处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为___________。
（3）用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现PKU基因错误整合。错误整合时，载体的两个中至少会有一个与一起整合到染色体DNA上。已知含有的细胞具有G418的抗性，、的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是__________的胚胎干细胞，理由是_________。
（4）将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠__________，说明PKU基因成功表达。

【推荐1】I．Hela细胞系是人工培养、具有无限增殖能力的永生癌细胞系，在世界各地的相关实验室中为研究者提供了相同的研究对象。回答下列问题：
（1）Hela细胞源自一位美国妇女的宫颈癌细胞，目前实验室中为了进一步研究Hea细胞，需进行_______(填“原代”或“传代”)培养。细胞体外培养所需营养物质有糖、氨基酸、无机盐等，通常还需要加入________等天然成分，在动物细胞培养过程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________。
（2）某小组为研究葡萄糖饥饿对Hela细胞生长的抑制情况，其它营养条件适宜，用不同葡萄糖浓度的培养基，培养Hela细胞24h，实验结果如下表所示：

葡萄糖浓度/（mmol·L-1）	Hela细胞生长抑制率％
0	56.16
1.0	36.30
1.5	25.00
2.0	16.44

该实验______（填“需要”或“不需要”)另设对照组。实验结果表明：葡萄糖浓度与Hela细胞生长抑制率的关系是__________。体内低浓度葡萄糖可____癌细胞的增殖，为肿瘤的限食疗法提供理论依据。
II．在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧柴以及收入等问题。以上做法依据的生态工程原理是_______。单一的人工林比天然混合林的稳定性低，容易遭受害虫危害，这体现了生态工程的______原理。

【推荐2】因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度。据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起到保护创面免受感染的作用。为了使移植的猪皮存活时间更长，有人设法导入人的相关基因(用P表示)，获得转基因小白猪。其简单流程如图所示：

(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有____________；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是__________。
(2)过程②中，常用________酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、________、温度和pH、________。
(3)过程③中所用的胚胎工程技术是______________，然后将早期胚胎移入另一头与供体__________但未经配种的代孕母猪的相应部位。
(4)图中的卵母细胞应在体外培养到__________期。

【推荐3】P53 基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明 P53 基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现 P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：

（1）切下新鲜的肝癌组织，在 37℃下用_____消化 30～40 分钟，用培养液制成_____在培养箱中培养，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是_______________________。
（2）若P53 基因两侧的一段核苷酸序列是已知的，则获取P53 基因的方法通常是_____。
（3）将 P53 基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀。最后筛选出含有 P53 基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是_____。
（4）为证明P53 基因对肝癌细胞有抑制作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的生长曲线。请分析两条曲线分别是哪种细胞，曲线 1 是_____细胞，曲线 2 是_____细胞。

【推荐1】中国科学家首次利用CRISPR/Cas9基因编辑方法，敲除了体外受精的猴胚胎中的生物节律核心基因——BMAL1，产生了一批BMAL1基因缺失的猕猴，接着采集了其中一只睡眠紊乱症状最明显的BMAL1基因缺失猕猴的体细胞，再通过体细胞克隆技术获得5只BMAL1基因被敲除的克隆猴。请根据题干信息回答以下问题：
（1）根据所学的基因工程知识可知，基因编辑涉及的工具酶包括________________，得到节律失调猴模型的关键是____________________________。
（2）下图表示用体细胞克隆技术获得BMAL1基因缺失猕猴的操作过程，请将该过程补充完整；
___________
（3）体细胞克隆技术的原理主要是_______________，获得的5只克隆猴表现型相差不大的根本原因是_______________。
（4）借助基因编辑技术，2018年11月，中国科学家贺建奎团队创造出世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿露露和娜娜，在世界上引起轩然大波。你赞同这种做法吗，请说明理由：______________________________。

【推荐2】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答：

（1）过程①将进行培养的上皮细胞注入去核的卵母细胞中，接受细胞核的卵母细胞应处于_____时期，去除卵母细胞细胞核的目的是_____。
（2）过程②利用的技术是_____，当重组胚胎培养到囊胚期时，可从其_____分离出ES细胞，ES细胞在功能上具有_____的特点。
（3）过程③中获取的目的基因是________，若要将目的基因导入受体细胞，需要构建_____，构建之前可以根据_______设计引物，利用PCR技术对目的基因进行扩增。将基因导入ES细胞的方法通常是_____法，为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因，可采用_____技术。
（4）按此方法和图示技术流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_____和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）等。检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用_____进行杂交实验。

【推荐3】Leigh氏综合症是一种攻击神经系统的严重神经障碍症，其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带有这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh氏综合症而夭亡。她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。请根据男婴孕育过程回答下面的问题：

(1)该母亲的前两个孩子患病夭亡的原因是___________________。该健康男婴孕育过程中依次使用了__________、__________、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。
(2)图示过程中代表该母亲卵母细胞的是___(填“A”或“B”)。取卵之前,该母亲需要注射____________激素。
(3)将受精卵移入发育培养液中继续培养至桑椹胚或_____，再进行胚胎移植。进行早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需添加激素和_______。早期胚胎需经过______(水平)检测合格后才能植入母亲的子宫继续发育。

【推荐1】近年来，现代生物科技在生产、生活、医学领域有广泛应用。回答相关问题。
（1）我国科学家发明了转基因抗虫棉。科学家所构建的Ti质粒上具有________，它能把抗虫基因整合到受体细胞________上。我国科学家还独创了________法将抗虫基因导入受体细胞。
（2）我国科学家先后通过猴胚胎细胞和体细胞获得克隆猴。克隆猴与供体猴的遗传物质________（填“完全相同”或“基本相同”或“完全不同”）。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是：________。
（3）畜牧业胚胎工程已产业化。胚胎分割所需要的主要仪器设备为________显微镜和显微操作仪。胚胎移植程序中要对供、受体母畜进行同期发情处理，目的是：________。

【推荐2】我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①—⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。

(1)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是__________，去掉卵母细胞细胞核的目的是__________。
(2)通过核移植方法获得的食蟹猴，与核供体相比，食蟹猴体细胞的染色体数目____________（填“减半”“加倍”或“不变”）
(3)用胚胎分割移植的方式来克隆食蟹猴，依据的原理是_____________，胚胎分割时应注意的问题是________________。
(4)向融合细胞注射Kd4d的mRNA，可提高胚胎的形成率，其作用主要是通过基因表达的____________过程实现的。
(5)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如图所示。由实验结果可知________________________。

【推荐3】应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转入生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是________，②过程常用的方法是_________________________________________________。
(2)可通过转入生长激素基因牛分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用________技术，培育出多头相同的转基因牛犊。
(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体时，Ⅱ最可能是________细胞，Ⅲ代表的细胞具有__________________的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是___________________________________，⑤过程采用的技术是________。
(5)要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。